第三章灭菌与无菌制剂

1、第三章 灭菌与无菌制剂 Preparations of sterilization and sterility第一节 概 述By definition, a sterile preparation is described as the absolute absence of microbial contaminants. Certain pharmaceutical preparations, medical devices and items for which usage involves contact with broken skin, mucosal surfaces or int

2、ernal organs are required to be sterile. Microbiological materials, such as soiled dressings and other contaminated items, also need to be sterilized before disposal or reuse. Sterilization is the process by which a product is rendered sterile, i.e. the destruction or removal of microorganisms. Most

3、 preparations can be sterilized in their final container or packaging. Certain processes will achieve terminal sterilization through the destruction of the microorganisms, for example by physical means such as heat and radiation or a combination of physical and chemical means (e.g. gaseous steriliza

4、tion). However, such processes can be detrimental for the chemical composition of certain preparations. For these sensitive preparations or for preparations to which an additional component is added aseptically, the process of non-terminal sterilization, which is based on aseptic filtration, is used

5、. NEED FOR STERILITY Certain pharmaceutical preparations, medical products and devices are required to be sterile. Briefly, these include: Injections - intravenous infusion, total parenteral nutrition (TPN), small-volume injections and small-volume oily injections non-injectable sterile fluids - non

6、-injectable water, urological irrigation solutions, peritoneal dialysis and haemodialysis solutions, inhaler solutions ophthalmic preparations - eye drops, lotions and ointments and some contact lens solutions dressings implants absorbable haemostats surgical ligatures and sutures (absorbable and no

7、n-absorbable) instruments and equipment - syringes, metal instruments, respirator parts. 灭菌与无菌制剂主要是指直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等的一类制剂。 这类制剂直接作用于人体血液系统，在使用前必须保证处于无菌状态。 基本概念： (1)灭菌：系指用物理或化学等方法杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。(2)灭菌法：系指杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的方法或技术。 2无菌和无菌操作法(1)无菌：系指在任一指定物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。(2)无菌操作法：系指

8、在整个操作过程中利用或控制一定条件，使产品避免被微生物污染的一种操作方法或技术。3防腐和消毒 (1)防腐(antisepsis)：系指用物理或化学方法抑制微生物的生长与繁殖的手段，亦称抑菌。对微生物的生长与繁殖具有抑制作用的物质称抑菌剂或防腐剂。(2)消毒(disinfection)：系指用物理或化学方法杀灭或除去病原微生物的手段。对病原微生物具有杀灭或除去作用的物质称消毒剂。 一、灭菌和无菌制剂 1定义 (1)灭菌制剂：指采用某一物理、化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。 ( 2)无菌制剂：指采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂

9、。 2. 无菌制剂种类 ：注射用制剂，如注射剂、输液、注射粉针等； 眼用制剂，如滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂和凝胶剂等；植入型制剂，如植入片等； 创面用制剂，如溃疡、烧伤及外伤用溶液、软膏剂和气雾剂等；手术用制剂，如止血海绵剂等。 第二节 灭菌与无菌技术 灭菌与无菌目的是：杀灭或除去所有微生物繁殖体和芽孢，最大限度地提供制剂的安全性，保护制剂的稳定性，保证制剂的临床疗效。 药剂学中灭菌法可分为三大类：即物理灭菌法、化学灭菌法、无菌操作法。 （一）物理灭菌法 该法采用加热、射线和过滤方法，杀灭或除去微生物。包括：1. 干热灭菌法: 在干燥环境中进行灭菌的技术，其中包括火焰灭菌法和干热空气灭菌法.火焰

10、灭菌法：系指用火焰直接灼烧灭菌的方法。适用于物品与用具的灭菌.干热空气灭菌法：系指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于物品与用具和耐高温的粉末化学药品灭菌. 1351450C灭菌35h；1601700C灭菌24h; 1802000C灭菌0.51h。 2. 湿热灭菌法 系指用饱和蒸气、沸水或流通蒸气进行灭菌的方法。该法的灭菌效率比干热灭菌法高. 湿热灭菌法包括：热压灭菌法、流通蒸气灭菌法、煮沸灭菌法和低温间歇灭菌法。 (1)热压灭菌法：指用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。该法具有很强的灭菌效果，灭菌可靠，能杀灭所有细菌繁殖体和芽孢，适用于耐高温和耐高压蒸气的所有药物制剂和用具。灭菌温度(蒸气

11、表压)与时间的关系： 115(67kPa)、30min；121(97kPa)、20min；126(139kPa)、15min。1 atm = 1.0132 bar = 0.10132 MPa =14.496 psi = 1.0332kg/cm2影响湿热灭菌的主要因素有： 1)微生物的种类与数量：耐热、压的次序为 芽孢繁殖体衰老体。 微生物数量愈少所需灭菌时间愈短。2)蒸气性质：灭菌效率是饱和蒸气湿饱和蒸气、过热蒸气 3)药品性质和灭菌时间：灭菌温度愈高，灭菌时间愈长，药品被破坏的可能性愈大。 4)其他：在中性环境微生物的耐热性最强，碱性环境次之，酸性环境则不利于微生物的生长和发育。 灭菌操作：

12、先开夹套中蒸气加热10min，当夹套压力上升至所需压力时，将待灭菌物品置于金属编制篮中，排列于格车架上，推人柜室，关闭柜门，并将门闸旋紧。待夹套加热完成后，将加热蒸气通人柜内，当温度上升至规定温度(如121)时，计时(此时即为灭菌开始时间)，柜内压力表应固定在规定压力(如97kPa左右)。灭菌完成后，先关闭蒸气阀，排气至压力表降至“0”点，开启门，灭菌物品冷却后取出。 保证灭菌效率，注意事项 必须使用饱和蒸气。 必须排尽灭菌柜内空气。在灭菌柜上常附有真空装置，以便在通人蒸气前将柜内空气尽可能抽尽。若热蒸气中含有1的空气时，传热系数降低60。灭菌时间应以全部药液温度达到所要求的温度时开始计时。灭

13、菌完毕后必须先停止加热，逐渐减压至压力表指针为“0”后，放出柜内蒸气，使柜内压力与大气压相等，稍稍打开灭菌柜，1015min后全部打开，以免柜内外压力差和温度差太大，造成被灭菌物冲出或玻璃瓶炸裂。 (2)流通蒸气灭菌法 指在常压下，采用100 0C流通蒸气加热杀灭微生物的方法。灭菌时间通常为3060min。该法适用于消毒及不耐高热制剂的灭菌。但不能保证杀灭所有的芽孢，是非可靠的灭菌法。 (3)煮沸灭菌法 指将待灭菌物置沸水中加热灭菌的方法。煮沸时间通常为3060min。该法灭菌效果较差，常用于注射器、注射针等器皿的消毒。必要时可加入适量的抑菌剂，如三氯叔丁醇、甲酚、氯甲酚等，以提高灭菌效果。

14、(4)低温间歇灭菌法指将待灭菌物置60800C的水或流通蒸气中加热60min，杀灭微生物繁殖体后，在室温条件下放置24h，让待灭菌物中的芽孢发育成繁殖体，再次加热灭菌、放置，反复多次，直至杀灭所有芽孢。该法适合于不耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌。缺点是费时、工效低、灭菌效果差，加入适量抑菌剂可提高灭菌效率。 3过滤灭菌法指采用过滤法除去微生物的方法。该法属于机械除菌方法，该机械称为涂菌过滤器。 适合于对热不稳定的药物溶液、气体、水等物品的灭菌。灭菌用过滤器应有较高的过滤效率，能有效地除尽物料中的微生物，滤材与滤液中的成分不发生相互交换，滤器易清洗，操作方便等。 滤器孔径必须小于芽孢体积(0.5

15、m)。常用的除菌过滤器有：0.22 m或0.3 m的微孔滤膜滤器和G6(号)垂熔玻璃滤器。过滤灭菌应在无菌条件下进行操作.4射线灭菌法指采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽孢的方法。 (1)辐射灭菌法系指采用放射性同位素(60Co和127Cs)放射的射线杀灭微生物和芽孢千方法，辐射灭菌剂量一般为2.5104Gy(戈瑞)。适合于热敏物料和制剂的灭菌;特点是：穿透力强，灭菌效率高；但设备费用较高，对操作人员存在潜在的危险性. (2)微波灭菌法：采用微波(频率为300MHz300kMHz)照射产生的热能杀灭微生物和手孢的方法。该法适合液体和固体物料的灭菌，且对固体物料具有干燥作用。特点是：微波能穿透

16、到介质和物料的深部，可使介质和物料表里一致地加热；高效、快速(3min)、低能耗、无污染、易操作、易维护、产品保质期长. (3)紫外线灭菌法指用紫外线(能量)照射杀灭微生物和芽孢的方法。用于紫外灭菌的波长一般为200300nm，灭菌力最强的波长为254nm。该方法属于表面灭菌。 装于容器中的药物不能用紫外线灭菌。紫外线对人体有害，产生结膜炎、红斑及皮肤烧灼等伤害. 二、化学灭菌法指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法。药品可分为气体杀菌剂和液体杀菌剂。杀菌剂仅对微生物繁殖体有效，不能杀灭芽孢。 化学灭菌的目的在于减少微生物的数目，以控制一定的无菌状态。 1气体灭菌法指采用气态杀菌剂(如环

17、氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油和过氧乙酸蒸气等)进行灭菌的方法。特别适合环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器具、设备和设施等的消毒，亦用于粉末注射剂，不适合对产品质量有损害的场合。注意残留的杀菌剂和与药物可能发生的相互作用。 2药液灭菌法系指采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法。该法常应用于其他灭菌法的辅助措施，适合于皮肤、无菌器具和设备的消毒。常用消毒液有：75乙醇、1聚维酮碘溶液、0.1一0.2苯扎溴铵(新洁尔灭)溶液、酚或煤酚皂溶液等。 (三)无菌操作法 指整个过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法。适合一些不耐热药物的注射剂、眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂的制备。按无菌操作法制备的产品，一般不再灭

18、菌，但某些特殊(耐热)品种亦可进行再灭菌(如青霉素G等)。最终采用灭菌的产品，其生产过程一般采用避菌操作(尽量避免微生物污染)，如大部分注射剂的制备等。 1无菌操作室的灭菌 (1)甲醛溶液加热熏蒸法：该方法的灭菌较彻底，是常用的方法之一。 甲醛蒸气由鼓风机吹入无菌室，关闭密熏1224h.密熏完毕后，将25的氨水加热，送入无菌室内，以清除甲醛蒸气. (2)紫外线灭菌：是无菌室灭菌的常规方法，每天工作前开启紫外灯1h左右. (3)液体灭菌：是无菌室较常用的辅助灭菌方法. 2苯扎溴铵或75乙醇喷洒或擦拭. 甲醛蒸气发生器 2无菌操作无菌操作室、层流洁净工作台和无菌操作柜是无菌操作的主要场所.无菌操作

19、所用的一切物品、器具均需灭菌，如安瓿应1501800C、2h干热灭菌，橡皮塞应121、热压灭菌等；操作人员进入无菌操作室前应洗澡，并更换已灭菌的工作服和清洁的鞋子，不得外露头发和内衣，以免污染。 (四) 灭菌参数(F值和F0值)1. D值 在一定温度下，杀灭90微生物(或残存率为10)所需的灭菌时间。 Nt为灭菌时间为t时残存的微生物数；N0为原有微生物数；K为灭菌常数。 D值随微生物的种类、灭菌条件而变。2. Z值 降低一个lgD值所需升高的温度。 当Z=100C, T1=1100C, T2=1210C时 得: D2/D1=0.079即110灭菌lmin与121灭菌0.079min的灭菌效果

20、相当。 3F值: 在一定灭菌温度(T)下给定的Z值所产生的灭菌效果与在参比温度(T0)下给定的Z值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间: t是被灭菌物料温度的时间间隔，一般为0.5-1min.F值常用于干热灭菌，以min为单位 ZTTtF0104F0值：在一定灭菌温度(T)、Z值为100C所产生的灭菌效果与121、Z值为10 0C所产生的死菌效果相同时所相当的时间(min)； F0值目前仅限于热压灭菌。生物F0值生物F0值可认为是以相当于121热压灭菌时，杀灭容器中全部微生物所需要的时间。考虑增强安全因素，一般增加50，如规定F0为8min,实际超作应控制F0为12min。 例44分钟内一系列温

21、度下的灭菌效果相当于1210C灭菌8.49分钟。时间(min) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9-39 40 41 42 43 45 温度（0C）100 102 104 106 108 110 112 115 114 115 110 108 106 102 100(min)49. 8.30)10.()10()10(11012111510121102101211000F影响F0值的因素主要有： 容器大小、形状及热穿透性等灭菌产品溶液性质、充填量等容器在灭菌器内的数量及分布等 三、空气净化技术（一） 概述 空气净化指以创造洁净空气为目的的空气调节措施。可分为工业净化和生物净化；空气净化技术系

22、指为达到某种净化要求所采用的净化方法。 工业净化指除去空气中悬浮的尘埃粒子，以创造洁净的空气环境，如电子工业等。生物净化指除去空气中悬浮的尘埃粒子和除去微生物等以创洁净的空气环境。如制药工业、生物学实验室、医院手术室等。 （二）洁净室空气净化标准 1含尘浓度： 单位体积空气中所含粉尘的个数(计数浓度)或毫克量(重量浓度)。2净化方法 常见的可分为三大类： (1)一般净化：以温度、湿度为主要指标的空气调节；可采用初效过滤器。 (2)中等净化：除对温度、湿度有要求外，对含尘量和尘埃粒子也有一定指标(如允许含尘量为0.150.25mgm3，尘埃粒子不得1.0m)。可采用初、中效二级过滤。(3)超净净

23、化：除对温、湿度有要求外，对含尘量和尘埃粒子有严格要求，含尘量采用计数浓度。该类空气净化必须经过初、中、高效过滤器才能满足要求。 3洁净室的净化度标准 目前世界各国在净化度标准方面尚未统一。我国药品生产管理规范中净化度标准和美国联邦洁净室标准 药品生产管理规范中净化度标准 洁净级别尘粒数(粒升) 粒径0.5m尘粒数(粒英尺3) 粒径0.5m温度( 0C)相邻级别室间压差湿度%菌落数100 (A级)3.510018-26正压40-60110,000 (B)35010,000 3100,000(C)3,500100,000 100,000(D)35,0001,000,000 /1英尺=30.48c

24、m(三) 浮尘浓度测定方法和无菌检查法 (1)光散射式粒子计数法：当含尘气流以细流束通过强光照射的测量区时，空气中的尘粒发生光散射，形成光脉冲信号，并转化为相应的电脉冲信号。根据散射光的强度与尘面积成正比，脉冲信号次数与尘粒个数相对应，最后由数码管显示粒径和粒子数目。 (2)滤膜显微镜计数法：采用微孔滤膜真空过滤含尘空气，捕集尘粒于微孔滤膜表面丙酮蒸气熏蒸至滤膜呈透明状，置显微镜下计数。根据空气采样量和粒子数计算含尘量 (3)光电比色计数法：采用滤纸真空过滤含尘空气，捕集尘粒于滤纸表面，测定过滤的透光度。根据透光度与积尘量成反比，计算含尘量. 2无菌检查法 系指检查药品与辅料是否无菌的方法，包

25、括:(1)直接接种法：将供试品溶液接种于培养基上，培养数日后观察培养基上是否出现或沉淀，与阳性和阴性对照品比较或直接用显微镜观察。 (2)薄膜过滤法：取规定量供试品经薄膜过滤器过滤后，取出滤膜在培养基上培养费观察结果，并进行阴性和阳性对照试验。 (四)空气净化技术 一般采用空气过滤法: 1过滤方式 空气过滤属于介质过滤，可分为表面过滤和深层过滤。 (1)表面过滤：指大于过滤介质微孔的粒子截留在介质表面，使其与空气得到分离的方法.常用醋酸纤维素、硝酸纤维素等微孔滤膜。(2)深层过滤:指小于过滤介质微孔的粒子吸附在介质内部，使其与空气得到分离。常用天然纤维、合成纤维、粒状活性炭、发泡性滤材等。 2

26、. 空气过滤机理及影响因素 (1)空气过滤机理 拦截作用吸附作用(2)影响空气过滤的因素粒径过滤风速介质纤维直径和密实性附尘3.空气过滤器 (a)板式滤过器 (b)契式滤过器 (c)袋式滤过器 (d)折叠式滤过器 板式滤过器:最常用的初效过滤器，过滤粒径大于5m的浮尘.契式和袋式滤过器:主要用于滤除大于1m的浮尘，一般置于高效过滤器之前。折叠式滤过器: 用于高效过滤，主要滤除小于1m的浮尘，对粒径0.3m的尘粒的过滤效率在99.97以上，一般装于通风系统的末端，必须在中效过滤器保护下使用. (五)洁净室的设计 生产厂区合理划分区域，常可分为一般生产区、控制区、洁净区、无菌区。生产区无洁要求；控

27、制区为10万级；洁净区为1万级（亦称一般无菌工作区）；无菌区的洁净度为100级。 1. 洁净区基本布局 洁净区一般由洁净室、风淋、缓冲室、更衣室、洗澡室和厕所等区域构成： 2洁净室对人员、物件及内部结构的要求 (1)人员要求：操作人员进入洁净室之前须水洗(洗手、洗脸、淋浴等)，更换衣、鞋、帽、风淋。服饰应专用，头发不得外露，尽量减少皮肤外露。衣料采用发尘少、不易吸附、不易脱落的紧密尼龙、涤纶等化纤织物。(2)物件要求：物件包括原料、仪器、设备等，这些物件在进入洁净室前均需洁净处理。原料从传递窗传递。（3)内部结构要求：地面和墙壁所用材料应具备防湿、 防霉，不易块裂、燃烧、耐磨性、导电性好，经济

28、实用等性质，设计应满足不易染尘、便洗等。3空气净化系统设计及要求高效空气净化系统采用三级过滤装置： 初效过滤 中效过滤 高效过滤中效空气系统采用二级过滤装置： 初效过滤 中效过滤 洁净室常采用侧面和顶部的送风方式。 高效空气净化系统中效空气系统洁净度为100级的区域（如输液和注射剂的灌封、滴眼剂和粉针的分装），一般采用超净工作台、生物安全柜和无菌小室等，安装在10000级洁净区内。气流要求：由高效过滤器送出的洁净空气进入洁净室后，其流向的安排直接影响室洁净度。气流形式有层流和乱流。层流：常用于100级洁净区。乱流：可得到1,000-100,000级的空气.第二节 注射剂一、概述 注射剂俗称针剂

29、，是指专供注入机体内的一种制剂。注射剂由药物、溶剂、附加剂及特制的容器所组成。 脂质体、微球、微囊等新型注射给药系统已实现商品化。 （一）注射剂的分类，特点和给药途径1.注射剂的分类 (1)溶液型：包括水溶液和油溶液，如安乃近注射液、二巯丙醇注射液等。 (2)混悬型：水难溶性或要求延效给药的药物，可制成水或油的混悬液。如醋酸可的松注射液、鱼精蛋白胰岛素注射液、喜树碱静脉注射液等。 (3)乳剂型：水不溶性药物，可制成乳剂型注射液，如静脉营养脂肪乳注射液等。 (4)注射用无菌粉末：亦称粉针，是指采用无菌操作法或冻干技术制成的注射用无菌粉末或块状制剂，如青霉素、阿奇霉素、蛋白酶类粉针剂等。 2给药途

30、径 (1)皮内注射(intradermal(1D) route)：注射于表皮与真皮之间，常用于过敏性试验或疾病诊断，如青霉素皮试液等。(2)皮下注射(subcutaneous(SC) route)：注射于真皮与肌肉之间的松软组织内。皮下注射剂主要是水溶液，药物吸收速度稍慢。(3)肌内注射(intramuscular(1M) route)注射于肌肉组织中。油溶液、混悬液及乳浊液具有一定的延效作用，且乳浊液有一定的淋巴靶向性。 (4)静脉注射(intravenous(IV) route): 注入静脉内，多为水溶液。lm的乳浊液可作静脉注射。凡能导致红细胞溶解或使蛋白质沉淀的药液，均不宜给药。 (5

31、)脊椎腔注射(vertebra caval route): 注入脊椎四周蜘蛛膜下腔内。脊椎腔注射剂必需等渗，pH值在5.08.0之间。(6)动脉内注射(intra-arterial route)：注入靶区动脉末端，如诊断用动脉造影剂、肝栓塞剂等。(7)其他：包括心内注射、关节内注射、滑膜腔内注射.椎管及其内容物横断面(二)注射剂的特点和一般质量要求 1注射剂的特点 (1)药效迅速、作用可靠 (2)可用于不宜口服给药的患者 (3)可用于不宜口服的药物 (4)发挥局部定位作用 (5)注射给药不方便且注射时疼痛 (6)制造过程复杂，生产费用较大，价格较高 2一般质量要求 (1)无菌：注射剂成品中不得

32、含有任何活的微生物和芽孢。 (2)无热原：无热原是注射剂的重要质量指标，特别是供静脉及脊椎注射的制剂。(3)澄明度：不得有肉眼可见的浑浊或异物。 (4)安全性：注射剂不能引起对组织的刺激性或发生毒性反应。(5)渗透压：其渗透压要求与血浆的渗透压相等或接近。供静脉注射的大剂量注射剂需有等张性。 (6) pH：要求与血液相等或接近(血液pH约7.4)，一般控制在49的范围内。(7)稳定性：具有必要的物理和化学稳定性。(8)降压物质：有些注射液，如复方氨基酸注射液，其降压物质必须符合规定。 二、注射剂的处方组成（一）注射用原料 注射用原料必须符合药典或国家药品质量标准。生产前需做小样试制，各项检验合

33、格后方可使用。 （二）注射用溶剂 1. 注射用水 中国药典规定：注射用水为纯化水经蒸馏所得的蒸馏水；灭菌注射用水经灭菌后的注射用水；纯化水为原水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的供药用的水。 2. 注射用油 (1)植物油：是通过压榨植物的种子或果实制得。常用的注射用油为麻油、茶油等。其他植物油如花生油、玉米油、橄榄车油、豆油、蓖麻油及桃仁油等，经精制后也可供注射用。 质量要求为：无异臭，无酸败味；色泽不得深于黄色6号标准比色液；在100C时应保持澄明；碘值为79128；皂化值为185200；酸值不得大于0.56。 碘值:脂肪、脂肪油或其他类似物质100g，当充分卤化时所需的碘

34、量（g）。碘值说明油中不饱和键的多少。碘值高，则不饱和键多，容易被氧化而引起油脂的酸败变质；碘值低，则油脂熔点高，常温接近固体，难以注射和吸收。所以注射用油需规定一定的碘值范围。 皂化值:KOH（mg）/油脂（g），可以反映油脂的量. 酸值：KOH（mg）/油脂（g），可以反映油脂的新鲜程度。 (2)油酸乙酯(aethylis oleas)：浅黄色油状液体，能与脂肪油混溶，性质与脂肪油相似而粘度较小。但贮藏会变色，故常加抗氧剂，如含37.5没食子酸丙酯、37.5BHT(二叔丁对甲酚)及25BHA(叔丁对甲氧酚)的混合抗氧剂用量为0.03(WV)效果最佳，可于1500C1h灭菌。 (3)苯甲酸苄

35、酯(ascabin)：无色油状或结晶，能与乙醇、脂肪油混溶。如二巯丙醇(BAL)虽可制成水溶液，但不稳定，又不溶于油，使用苯甲酸苄酯可制成BAL油溶液供使用。苯甲酸苄酯不仅可作为溶剂，还有助溶剂的作用，且能够增加二巯丙醇的稳定性。 油性注射剂只能供肌内注射。 3其他注射用非水溶剂:(1)乙醇：本品与水、甘油、挥发油等可任意混溶，可供静脉或肌内注射。 (2)丙二醇(propylene glyco1，PG)：常用量为1060，用做皮下或肌注时有局部刺激性。供静注或肌注。 (3)聚乙二醇(polyethylene PEG)：常用PEG400.(4)甘油(glycerin)：与水或醇可任意混合，常用浓

36、度150.(5)二甲基乙酰胺(dimethylacetamide DMA)：与水、乙醇任意混合，对药物的溶解范围大，常用浓度0.01。 (三)注射剂主要附加剂 除主药和溶剂外还可加入其他物质，这些物质统称为附加剂。 其主要作用是：增加药物的理化稳定性；增加主药的溶解度；抑制微生物生长；减轻疼痛或对组织的刺激性等。 常用附加剂主要有：1. 缓冲剂：醋酸钠、枸橼酸钠、酒石酸钠等 2. 抑菌剂: 苯甲醇、苯酚、三氯叔丁醇等3. 局麻剂：利多卡因、盐酸普鲁卡因等4. 等渗调节剂：氯化钠、葡萄糖等5. 抗氧剂：亚硫酸钠、硫代硫酸钠等6. 螯合剂：EDTA2Na7. 增溶剂润湿剂乳化剂：聚山梨酯等8. 助

37、悬剂：明胶、甲基纤维素等9. 填充剂：乳糖、甘露醇等10.稳定剂：肌酐等 11.保护剂：蔗糖等(四)注射剂的等渗与等张调节 1定义 (1)等渗溶液(isoosmotic solution)：指与血浆渗透压相等的溶液，属于物理化学概念。 0.9的氯化钠溶液、5的葡萄糖溶液与血浆具有相同的渗透压，为等渗溶液。注入机体内的液体一般要求等渗，否则易产生刺激性或溶血. (2)等张溶液(isotonic solution)：指渗透压与红细胞膜张力相等的溶液，属于生物学概念。 2渗透压的测定与调节(P.180)(1)冰点降低数据法：血浆冰点值为一0.520C,任何溶液其冰点降低到一0.520C，即与血浆等渗

38、。等渗调节剂的用量 W一配制等渗溶液需加入的等渗调节剂的百分含量；a一药物溶液的冰点下降度数；b一用以调节的等渗剂1溶液的冰点下降度数。 baW52. 0例2：配制2盐酸普鲁卡因溶液100ml，用氯化钠调节等渗，求所需氯化钠的加入量。 解:由10-2表可知：2盐酸普鲁卡因溶液的冰点下降度(a)为0.1220.240C，1氯化钠溶液的冰点下降度(b)为0.580C，即配制2盐酸普鲁卡因溶液lOOml需加入氯化钠0.48g。 baW52. 0%48. 058. 024. 052. 0(2)氯化钠等渗当量法：氯化钠等渗当量系指与1g药物呈等渗的氯化钠质量。例4：配制2盐酸麻黄碱溶液200ml，欲使其

39、等渗，需加人多少克氯化钠或无水葡萄糖。 解:1g盐酸麻黄碱的氯化钠等渗当量为0.28，无水葡萄糖的氯化钠等渗当量为0.18。设所需加入的氯化钠和葡萄糖量分别为X和y。 X(0.90.282)200100=0.68g y0.680.183.78g 例5：欲配制以下处方的溶液1000ml，分别采用冰点降低法和氯化钠等渗当量法计算所需氯化钠的量。处方： 1%溶液冰点下降值 氯化钠等渗当量硼酸 0.67g 0.28 0.47氯化钾 0.33g 0.44 0.78 冰点降低法:氯化钠等渗当量法:0.52(0.28 0.670.44 0.33)10003.230.58100Wg0.9(0.47 0.670

40、.78 0.33) 10003.28100Wg(3)等张调节：红细胞膜对很多药物水溶液来说可视为理想的半透膜，它可让溶剂分子通过，而不让溶质分子通过，因此它们的等渗和等张浓度相等，如0.9的氯化钠溶液。但还有一些药物如盐酸普鲁卡因、甘油、丙二醇等，即使根据等渗浓度计算出来而配制的等渗溶液注入体内，还会发生不同程度的溶血现象。 等渗和等张溶液定义不同，等渗溶液不一定等张，等张溶液亦不一定等渗。需进行溶血试验，必要时加入葡萄糖、氯化钠等调节成等张溶液。 注射剂的制备一、注射剂的工艺流程 包括： 原辅料和容器的前处理、称量、配制、过滤、灌封、灭菌、量检查、包装等步骤。 二、注射用水的质量要求及制备

41、（一）注射用水的质量要求 注射用水为蒸馏水或去离子水经蒸馏所得的水，故又称重蒸馏水。 需满足药典规定：氯化物、硫酸盐、钙盐、硝酸盐、亚硝酸盐、二氧化碳、易氧化物、挥发物与重金属、pH应为5.07.0、氨含量不超0.00002、热原、并应于制备后12h内使用。 （二）注射用水的制备 原水处理 蒸馏法制备 1原水处理： 原水处理方法有离子交换法、电渗析法及反渗透法。(1)离子交换法：本法利用离子交换树脂可以除去绝大部分阴、阳离子，对热原、细菌也有一定的清除作用。 (2)电渗析法：电渗析是依据在电场作用下离子定向迁移及交换膜的选择性透过，即阳离子交换膜装在阴极端，只允许阳离子通过；阴离子交换膜装在阳

42、极端，只允许阴离子通过。(3)反渗透法(reverse osmosis) ：渗透是由半透膜两侧不同溶液的渗透压差所致，低浓度一侧的水向高浓度一侧转移。如果在盐溶液上施加一个大于该盐溶液渗透压的压力，则盐溶液中的水将向纯水一侧渗透，从而盐、水分离，这一过程称为反(逆)渗透。 用于反渗透法制备注射用水膜材有：醋酸纤维膜(如三醋酸纤维膜)和聚酰胺膜。 2. 蒸馏法： 是制备注射用水最经典的方法。主要有塔式蒸馏水器、重蒸馏水器、多效蒸馏水器。 三、热原 (pyrogen) 1定义 注射后能引起人体特殊致热反应的物质，称为热原。热原是微生物的一种内毒素，存在于细菌的细胞膜和固体膜之间，是磷脂、脂多糖和蛋

43、白质的复合物。分子量一般为1106左右。含有热原的注射液注人体内后，大约半小时就能产生发冷、寒战、体温升高、恶心呕吐等反应，严重者出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。 2热原的性质 （1) 耐热性：热原在600C加热1h不受影响，1000C加热也不降解，但在2500C、30min；2000C、60min或1800C、34h可使热原彻底破坏。（2) 过滤性：热原体积小，约为15nm，一般的滤器均可通过，但可被活性炭吸附。（3)水溶性：由于磷脂结构上连接有多糖，能溶于水。（4）不挥发性：热原本身不挥发，但在蒸馏时，可随水蒸气中的雾滴带人蒸馏水。（5）其他：热原能被强酸强碱破坏，也能被强氧化剂破坏。 3

44、热原的主要污染途径：注射用水：是热原污染的主要来源。 原辅料 容器、用具、管道与设备等 制备过程与生产环境输液器具 4热原的去除方法 (1)高温法：凡能经受高温加热处理的容器与用具，如针头、针筒或其他玻璃器皿，净后，于2500C加热30min以上，可破坏热原。(2)酸碱法：玻璃容器、用具可用重铬酸钾硫酸清洗液或稀氢氧化钠液处理，可将其破坏。热原亦能被强氧化剂破坏。 (3)吸附法：注射液常用优质针剂用活性炭处理，用量为0.050.5(WV)。将0.2活性炭与0.2硅藻土合用于处理20甘露醇注射液，除热原效果较好。 (4)离子交换法：国内有用#301弱碱性阴离子交换树脂10与#122弱酸性阳离子树

45、脂8，成功地除去丙种胎盘球蛋白注射液中的热原。(5)凝胶过滤法：用二乙氨基乙基葡聚糖凝胶(分子筛)制备无热原去离子水。 (6)反渗透法：用反渗透法通过三醋酸纤维膜除去热原。(7)超滤法：一般用3.015nm超滤膜除去热原。(8)其他方法：采用二次以上湿热灭菌法，或适当提高灭菌温度和时间。微波也可破坏热原。 四、注射剂的制备（一）原辅料的准备 原辅料必须符合中国药典所规定的各项杂质检查与含量限度。投料量可按下式计算： 量原料（附加剂）实际含成品标示量百分数量原料（附加剂）理论用量原料（附加剂）实际用（二）注射容器的处理 1安瓿的种类和式样： 由硬质中性玻璃制成的安瓿或容器(如青霉素小瓶等)，亦有

46、塑料容器。积通常为1、2、5、10、20ml等几种规格。 易折安瓿有两种，色环易折安瓿和点刻痕易折安瓿。 2安瓿的质量与注射剂稳定性的关系 质量要求：应无色透明，以利于检查药液的澄明度、杂质以及变质情况；应具有低的膨胀系数、优良的耐热性，不易冷爆破裂；熔点低，易于熔封；不得有气泡、麻点及砂粒；足够的物理强度，能耐受热压灭菌时产生的较高压力差，并避免在生产、装运和保存过程中造成的破损；具有高度的化学稳定性，不与注射液发生物质交换。 3安瓶的检查： 物理检查内容主要包括：安瓿外观、尺寸、应力、清洁度，热稳定性等化学检查内容主要有容器的耐酸、碱性和中性检查等 4. 安瓿的切割与圆口: 安瓿需先经过切

47、割，使安瓿颈具有一定的长度，便于灌药与安装。切割后的安瓿应瓶口整齐，无缺口、裂口、双线，长短符合要求。 5安瓿的洗涤： 安瓿一般使用离子交换水灌瓶蒸煮，质量较差的安瓿须用0.5的醋酸溶液，灌瓶蒸煮(1000C、30min)热处理。6安瓿的干燥与灭菌: 安瓿洗涤后，一般置于1201400C烘箱内干燥。需无菌操作或灭菌的安瓿在1800C干热灭菌1.5h。 (三)注射液的配制与过滤 1注射液的配制(1)配制用具的选择与处理：常用装有搅拌器的夹层锅配液，以便加热或冷却。配制用具用前要用硫酸清洁液或其他洗涤剂洗净，并用新鲜注射用水荡洗或灭菌后备用。操作完毕后立即刷洗干净。(2)配制方法：浓配法: 将全部

48、药物加入部分溶剂中配成浓溶液，加热或冷藏后过滤，然后稀释至所需浓度.稀配法: 将全部药物加入所需溶剂中，一次配成所需浓度，再行过滤.(3)注意事项：配制注射液时应在洁净的环境中进行，一般不要求无菌，但所用器具及原料和附加剂尽可能无菌，以减少污染；配制剧毒药品注射液时，严格称量与校核，并谨防交叉污染;对不稳定的药物更应注意调配顺序(先加稳定剂或通惰性气体等), 有时要控制温度与避光操作；对于不易滤清的药液可加0.10.3活性炭处理. 配制油性注射液，常将注射用油先经1500C干热灭菌12h，冷却至适宜温度(一般在主药熔点以下2030 0C)，趁热配制、过滤。溶液应进行半成品质量检查(如pH值、含

49、量等)，合格后方可过滤。 2注射液的过滤：在注射剂生产中，一般采用二级过滤，先将药液用常规的滤器如砂滤棒、垂熔玻璃漏斗、板框压滤器或加预滤膜等办法进行预滤后才能使用滤膜过滤，可将膜滤器串联在常规滤器后作末端过滤之用。不能达到除菌的目的，过滤后还需灭菌。 (1)影响过滤的因素：液体流过致密滤渣层，液体的流动遵循Poiseuile公式V是过滤容量，P是操作压力，r是流过层中毛细管半径，L是毛细管长度，是液体粘度，t是过滤时间。影响过滤速度的因素有： 操作压力越大，滤速越快；孔径越窄，阻力越大，滤速越慢；过滤速度与滤器的表面积成正比(这是在过滤初期)；黏度愈大，滤速愈慢；滤速与毛细管长度成反比，沉积

50、的滤饼量愈多，滤速愈慢。 （2)过滤介质与助滤剂：过滤介质亦称滤材，为滤渣的支持物。常用的过滤介质有： 滤纸：分为普通滤纸和分析用滤纸，其致密性与孔径大小相差较大。普通滤纸孔径为17m。脱脂棉：过滤用的脱脂棉应为长纤维。织物介质：包括棉织品(纱布、帆布等)常用于精滤前的预滤；丝织品(绢布)既可用于一般液体的过滤，也可用于注射剂的脱碳过滤；合成纤维类（尼龙、聚酯等），常用做板框压滤机的滤布。烧结金属过滤介质：将金属粉末烧结成多孔过滤介质，用于过滤较细的微粒。 多孔塑料过滤介质：将聚乙烯、聚丙烯等用饶结法制备的管状滤材，优点是化学性质稳定、耐酸碱、耐腐蚀；缺点是不耐热。垂熔玻璃过滤介质：将中性硬质

51、玻璃烧结而成的孔隙错综交叉的多孔型滤材。广泛用于注射剂的过滤。多孔陶瓷：用白陶土或硅藻土等烧结而成的筒式滤材，有多种规格，主要用于注射剂的精滤。 微孔滤膜：是高分子薄膜过滤材料，包括醋酸纤维素酯膜，硝酸纤维素酯膜、醋酸纤维酯和硝酸纤维酯的混合膜、聚氧乙烯膜、聚酰胺膜、聚碳酸酯膜和聚四氟乙烯膜等。微孔滤膜主要用于注射剂的精滤和除菌过滤。 常用的助滤剂有：硅藻土：有较高的惰性和不溶性，最常用；活性炭：常用于注射剂的过滤，注意其对药物的吸附作用；滑石粉：吸附性小，粉很细，不易滤清；纸浆：有助滤和脱色作用，适用于处理某些难以滤清的药液。 (3) 过滤装置： a. 普通漏斗：常用的有玻璃漏斗和布氏漏斗，

52、常用滤纸、长纤维的脱脂棉以及绢布匀过滤介质，适用于少量液体制剂的预滤。b. 垂熔玻璃滤器：分为垂熔玻璃漏斗、滤器及滤棒三种。按过滤介质的孔径分为1-6号，生产厂家不同代号亦有差异。 3号和G2号多用于常压过滤，4号和G3号多用于减压或加压过滤，6号以及G5、G6号用于无菌过滤用。 垂熔漏斗使用后用水抽洗，并以12硝酸钠硫酸溶液浸泡处理。 c. 砂滤棒：国产的主要有两种，一种是硅藻土滤棒，另一种是多孔素瓷滤棒。 硅藻土滤棒适用于粘度高、浓度大的药液。注射剂生产常用中号(500300mlmin) 。 多孔素瓷滤棒质地致密，滤速比硅藻土滤棒慢，适用于低粘度的药液.d. 板框式压滤机：由多个中空滤框和

53、实心滤板交替排列在支架上组成，特别适用于含少量微粒的待滤液，多用于预滤用。 缺点是装配和清洗麻烦，容易滴漏。 e. 微孔滤膜过滤器：以微孔滤膜作过滤介质的过滤装置称为微孔滤膜过滤器。优点： 微孔孔径小，截留能力强：，有利于提高注射剂的橙明度； 孔径大小均匀，即使加快速度，加大压力差也不易出现微粒泄漏现象； 滤速比其他滤器快40倍； 缺点：易堵塞f. 其他；另外还有超滤装置、钛滤器、多孔聚乙烯烧结管过滤器等。 （四）注射液的灌封 滤液经检查合格后进行灌装和封口；即灌封。封口有拉封与顶封两种。目前多用拉封。 灌封操作分为手工灌封和机械灌封两种。手工灌封常用于小试，药厂多采用全自动灌封机。 安瓿灌装

54、封口机安瓿灌装封口机 （五 ）注射剂的灭菌与检漏1灭菌：除采用无菌操作生产的注射剂外，一般注射液在灌封后必须尽快进行灭菌保证产品的无菌。 灭菌温度高、时间长易把微生物杀灭，但却不利于药液的稳定。15ml安瓿多采用流通蒸气1000C、30min；1020ml安瓿常用1000C、45min灭菌；2检漏： 灭菌后的安瓿应立即进行漏气检查。 五、注射剂的质量检查1澄明度检查 2热原检查：鲎（hou)试验法: 这是一种检查细菌内毒素的试验方法，亦称细菌内毒素检查法。利用一种低温海洋动物鲎的血液变形细胞溶解物（简称AC）与微量细菌内毒素产生凝集反应，从而检出微量细菌内毒素的存在。一般认为是变形细胞中的凝固

55、酶原经内毒素激活转化成具有活性的凝固酶。在凝固酶的作用下，变形细胞中的凝固蛋白原转变成凝固蛋白，凝固蛋白相互聚合形成凝胶。 家兔法(药典): 静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。 在初试3只家兔中,体温升高0.6或0.6以上的兔数超过1只；或在复试的5只家兔中，体温升高0.6或0.6以上的兔数超过1只；或在初试、复试合并8只家兔的体温升高总数超过3.5，均认为供试品的热原检查不符合规定。3无菌检查 4. 其他检查 装量检查、有关物质、降压物质检查、异常毒性检查、pH测定、刺激性、过敏试验等例1：维生素C注射液(vitamin C i

56、njection)抗坏血酸注射液 处方 维生素C(主药) 104g 依地酸二钠(络合剂) 0.05g 碳酸氢钠(pH调节剂) 49.0g 亚硫酸氢钠(抗氧剂) 2.0g 注射用水 加至 1000ml 制备 在配制容器中，加处方量80的注射用水，通二氧化碳至饱和，加维生素C溶解后，分次缓缓加入碳酸氢钠，搅拌使完全溶解，加入预先配制好的依地酸二钠和亚硫酸氢钠溶液，搅拌均匀，调节药液pH6.0-6.2，添加二氧化碳饱和的注射用水至足量用垂熔玻璃漏斗与膜滤器过滤，溶液中通二氧化碳，并在二氧化碳气流下灌封，最后于100 0C流通蒸汽灭菌15min。 处方及工艺分析 (1)维生素C分子中有烯二醇式结构，显

57、强酸性，注射时刺激性大，产生疼痛，故用碳酸氢钠(或碳酸钠)调节pH，以避免疼痛，并增强本品的稳定性。 (2)本品易氧化水解，原辅料的质量，特别是维生素C原料和碳酸氢钠，是影响维生素C注射液的关键。空气中的氧气、溶液pH和金属离子(特别是铜离子)对其稳定性影响较大。 处方中加入抗氧剂(亚硫酸氢钠)、金属离子络合剂及pH调节剂，工艺中采用充惰性气体等措施，以提高产品的稳定性。 (3)本品稳定性与温度有关。实验表明，用100 0C流通蒸汽灭菌30min后含量降低3；而100 0C流通蒸汽灭菌15min后含量仅降低2，故用100 0C流通蒸汽灭菌15min为宜。 临床上用于预防及治疗坏血病，并用于出血

58、性疾病,鼻、肺、肾、子宫及其他器官的出血。肌注或静脉注射，一次0.1-0.25g，一日0.250.5g第四节 输液(infusion solution) 一、概述 输液是由静脉滴注输人体内的大剂量注射液。不含防腐剂或抑菌剂。 二、输液的分类与质量要求 1. 输液的分类电解质输液：用以补充体内水分、电解质，纠正体内酸碱平衡等。营养输液: 用于不能口服吸收营养的患者。有糖类输液、氨基酸输液、脂肪乳输液等。胶体输液: 用于调节体内渗透压。胶体输液有多糖类、明胶类。含药输液：含有治疗药物的输液。 2. 输液的质量要求 无菌、无热原澄明度 pH等渗 含量无异常反应三、输液的制备 四、输液的质量检查澄明度

59、与微粒检查：10m以上,12粒/ml； 25m以上,2粒/ml.热原与无菌检查 含量与pH及渗透压检查 五、主要存在的问题澄明度染菌热原例 ：葡萄糖输液(5、10、25、50） 处方 注射用葡萄糖 50g l00g 250g 500g 盐酸 适量 注射用水 加至1000ml 制备 取处方量葡萄糖投入煮沸的注射用水中，使其成50一70浓溶液，用盐酸调节pH值至3.8-4.0，同时加0.1(gmL)的活性炭混匀，煮沸约20min，趁热过滤脱炭，滤液加注射用水至所需量。测pH值及含量，合格后滤至澄明，即可灌装封口，1150C、30min灭菌。例 静脉注射用脂肪乳(intravenous fat em

60、ulsion) 处方 精制大豆油(油相) 150g, 精制大豆磷脂(乳化剂) 15g, 注射用甘油(等渗调节剂) 25g, 注射用水加至1000ml制备 称取豆磷脂15g，高速组织捣碎机内捣碎后，加甘油25g及注射用水400ml，在氮气流下搅拌至形成半透明状的磷脂分散体系；放入二步高压匀化机，加入精制豆油与注射用水，在氮气流下匀化多次，收集于乳剂收集器内；将乳剂冷却后，于氮气流下经垂熔玻璃过滤器过滤，分装于玻璃瓶内，充氮气，瓶口中加盖涤纶薄膜、橡胶塞密封后，加轧铝盖；水浴预热90 0C左右，于121 0C灭菌15min。浸入热水中，缓慢冲人冷水逐渐冷却，置于410下贮存。 注射用乳剂除应符合注