苦菜中多糖类物质抗便秘作用机理研究

1、苦菜中多糖类物质抗便秘作用机理研究苦菜中多糖类物质抗便秘作用机理研究n温州人的习俗课题的由来课题的由来一、前言一、前言二、材料与方法二、材料与方法三、结果与讨论三、结果与讨论四、结论四、结论前 言n便秘现状：便秘现状：n英国英国 10n美国美国n男性占总人口男性占总人口 8 8n女性女性 20.820.8n日本日本n男性男性 9.1%9.1%n女性女性 23.5%23.5%n我国老年人（我国老年人（于普林等，于普林等，20012001年年 中华老年医学中华老年医学杂志杂志) )n平均平均 11.511.5n最高最高 19.519.5一、前一、前 言言n1. 1. Ratnaike,R.N. 1

2、997年报道便秘和腹泻交替出现年报道便秘和腹泻交替出现n2. Ramesh, 1998年；年；Daeninck 1999年报道使用鸦征年报道使用鸦征样物质会导致便秘样物质会导致便秘n3. Boige 1999年报道儿童的功能性便秘会引起大便失年报道儿童的功能性便秘会引起大便失禁禁n4. Amanda 2001年报道了膳食纤维的摄入、便秘与静年报道了膳食纤维的摄入、便秘与静脉曲张的关系脉曲张的关系n5. Shimotoyome 2000年报道便秘会诱发结肠癌年报道便秘会诱发结肠癌便秘与许多疾病有关n苦菜，学名败酱草苦菜，学名败酱草(Patrinia villosa(PV)，为败酱科植物。为败酱科

3、植物。n在我国分布很广，在浙在我国分布很广，在浙江省永嘉县苦菜已人工江省永嘉县苦菜已人工栽培成功，目前有栽培成功，目前有2500余亩余亩，平均亩产平均亩产4000多多千克千克，亩产最高可达，亩产最高可达6000千克千克，年总产达万，年总产达万吨以上。吨以上。 苦菜的研究现状苦菜的研究现状n化学成分化学成分n吕扬等吕扬等,1997.,1997.药学学报药学学报, ,白花败酱醇甙结构的白花败酱醇甙结构的修正修正n齐墩果胴酸的分离鉴定齐墩果胴酸的分离鉴定n药理研究药理研究n王瑞俭等王瑞俭等,1997 . 长春中医学院学报长春中医学院学报,黄花败酱的药理研究黄花败酱的药理研究与临床应用与临床应用n营养

4、成分营养成分n仲山民等仲山民等,1999中国野生植物资源中国野生植物资源,野生败酱的野生败酱的营养成分分析营养成分分析 n对便秘的研究还未见报道对便秘的研究还未见报道研究基础研究基础苦苦菜菜茎茎叶叶的抗便秘作用强强果胶可溶性多糖单宁苦苦菜菜汁汁的抗便秘作用小小于于前前者者抗抗便便秘秘作作用用降降脂脂作作用用降降糖糖作作用用苦苦菜菜功功能能研研究究二、材二、材 料料 与与 方方 法法材料：材料： 1.1.柑桔皮果胶柑桔皮果胶( (购买）购买）2.2.苦菜多糖（提取）苦菜多糖（提取）提取方法参见提取方法参见（朱加进朱加进. .农业工农业工程学报程学报20022002，第一期），第一期）3.3.苦菜

5、果胶（提取，待刊）苦菜果胶（提取，待刊）4.椪柑皮果胶（提取）椪柑皮果胶（提取）5. NIH品系小鼠品系小鼠灌胃液：灌胃液：苦菜果胶，按苦菜果胶，按5%5%苦菜果胶，苦菜果胶，10%10%阿拉伯胶，阿拉伯胶，5%5%墨汁与水墨汁与水混合而成；混合而成；苦菜多糖，按苦菜多糖，按5%苦菜多糖，苦菜多糖，10%阿拉伯胶，阿拉伯胶，5%墨汁墨汁与水混合而成；与水混合而成；柑桔果胶（同上）柑桔果胶（同上）椪柑皮果胶（同上）椪柑皮果胶（同上）空白对照组：按空白对照组：按10%10%阿拉伯胶，阿拉伯胶，5%5%墨汁与生理盐水混合墨汁与生理盐水混合而成。而成。方法方法:黑便排出时间和排便频度实验 原理：用含有

6、指示剂的抗便秘药给动物灌服，观原理：用含有指示剂的抗便秘药给动物灌服，观察抗便秘药的起效时间）（即排出含指示剂粪便的时察抗便秘药的起效时间）（即排出含指示剂粪便的时间），粪便性状，排便数量，并与对照组相互比较，间），粪便性状，排便数量，并与对照组相互比较，判断抗便秘药的药效。判断抗便秘药的药效。取禁食取禁食20小时的体重相近的小鼠小时的体重相近的小鼠50只（腹泻者剔除），随机只（腹泻者剔除），随机分成分成5组，苦味酸标记。各组分别灌服上述组，苦味酸标记。各组分别灌服上述5种墨汁混悬液种墨汁混悬液（0.2ml/10g）。各鼠分置于铺有滤纸的钟罩内进行观察，记录）。各鼠分置于铺有滤纸的钟罩内进行观

7、察，记录小鼠排黑便的时间、粪便性状和数目，以及粪便沾染肛门情况。小鼠排黑便的时间、粪便性状和数目，以及粪便沾染肛门情况。连续观察连续观察6小时，每组取平均值进行比较。小时，每组取平均值进行比较。 小肠推进实验小肠推进实验 ：原理：以墨汁为标记的抗便秘药给动物灌服，观原理：以墨汁为标记的抗便秘药给动物灌服，观察色素在肠道推进的距离，反映抗便秘药对肠道运动察色素在肠道推进的距离，反映抗便秘药对肠道运动的影响。的影响。方法：取禁食方法：取禁食2424小时的体重相近的小鼠小时的体重相近的小鼠5050只，随只，随机分成机分成5 5组，每组组，每组1010只，用苦味酸标记。分别用上述只，用苦味酸标记。分别

8、用上述5 5种墨汁液种墨汁液0.2ml/10g0.2ml/10g体重灌胃。给药后体重灌胃。给药后3030分钟脱颈椎分钟脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻地将小肠拉成直至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻地将小肠拉成直线，测量肠管长度作为线，测量肠管长度作为“小肠总长度小肠总长度”。从幽门至墨。从幽门至墨汁前沿的距离作为汁前沿的距离作为“墨汁在肠内推进距离墨汁在肠内推进距离”。用公式。用公式计算墨汁的推进百分率。计算墨汁的推进百分率。墨汁推进率（墨汁推进率（% %）= =墨汁在肠内的推进距离（墨汁在肠内的

9、推进距离（cmcm）/ /小肠全长（小肠全长（cmcm）100%100%三、结三、结 果果 与与 讨讨 论论 苦菜果胶、苦菜多糖，椪柑果胶的得率苦菜果胶、苦菜多糖，椪柑果胶的得率 ：苦菜多糖提取的最佳工艺条件苦菜多糖提取的最佳工艺条件( (料液比料液比1 20、提取、提取温度温度100、提取时间、提取时间4小时小时)经经L9(33)正交试验而获正交试验而获得，此时得，此时得率为得率为2.58%2.58%，苦菜果胶得率为苦菜果胶得率为6.33%6.33%比比椪椪柑果胶得率柑果胶得率(5.86%)还高，说明苦菜含有较多的多还高，说明苦菜含有较多的多糖类物质糖类物质。 不同处理对小鼠排便时间的影响不

10、同处理对小鼠排便时间的影响 表表1柑桔、椪柑柑桔、椪柑 、苦菜果胶及苦菜多糖对小鼠排粪便的影响（、苦菜果胶及苦菜多糖对小鼠排粪便的影响（xSD，n=10）处理处理开始排黑开始排黑粪时间粪时间/min/min6 6小时内排小时内排黑便次数黑便次数黑便性状黑便性状生理盐水生理盐水206.542.33.81.8干燥成形干燥成形苦菜果胶苦菜果胶230.339.52.91.0湿润成形湿润成形苦菜多糖苦菜多糖195.035.63.21.9湿润成形湿润成形柑桔果胶柑桔果胶158.964.35.92.6湿润成形湿润成形椪柑果胶椪柑果胶191.655.53.72.1湿润成形湿润成形表表2 2 不同处理间排便时间

11、差异显著性不同处理间排便时间差异显著性SSRSSR检验检验 处理处理5%显著水平显著水平1%极显著水平极显著水平苦菜果胶苦菜果胶aA生理盐水生理盐水bB苦菜多糖苦菜多糖bcB椪柑果胶椪柑果胶cB柑桔果胶柑桔果胶dC从表从表1和表和表2的的Duncans新复极差测验的多重比较新复极差测验的多重比较结果表明：结果表明：苦菜果胶开始排黑便时间最长，和其他任苦菜果胶开始排黑便时间最长，和其他任何一组都存在极显著差异何一组都存在极显著差异( (P0.01) )，并且比空白对照，并且比空白对照组组( (生理盐水生理盐水) )时间还长，说明了良好的抗腹泻能力，时间还长，说明了良好的抗腹泻能力，然而从表然而从

12、表1 1和表和表3 3 还可以进一步看出苦菜果胶在还可以进一步看出苦菜果胶在6 6小时小时内的排黑便次数明显少于其他各组内的排黑便次数明显少于其他各组( (P0.01) )因此与上因此与上述结论一致，尤其应该指出的是，虽然都是果胶物质，述结论一致，尤其应该指出的是，虽然都是果胶物质，但它与但它与椪椪柑果胶和柑桔果胶存在极显著差异柑果胶和柑桔果胶存在极显著差异( (P0.05) )； 而比椪柑果胶和柑桔果胶开始排黑便时间长，且与椪而比椪柑果胶和柑桔果胶开始排黑便时间长，且与椪柑果胶无显著性差异柑果胶无显著性差异(P0.05)(P0.05)，与柑桔果胶存在极显，与柑桔果胶存在极显著差异著差异(P0

13、.01)(P0.01)。 因此从防腹泻的角度来看，苦菜果胶优于苦菜多糖，因此从防腹泻的角度来看，苦菜果胶优于苦菜多糖，而苦菜多糖优于柑桔皮果胶；苦菜多糖与生理盐水和而苦菜多糖优于柑桔皮果胶；苦菜多糖与生理盐水和椪柑果胶无统计学差异椪柑果胶无统计学差异 表表4 4不同处理对小鼠小肠蠕动的影响（不同处理对小鼠小肠蠕动的影响（x xSD, n=10SD, n=10）处理处理小肠总长小肠总长度度/cm墨汁推进墨汁推进距离距离/cm墨汁推进墨汁推进率率/%生理盐水生理盐水43.22.428.13.964.97.4苦菜果胶苦菜果胶39.52.828.71.973.14.5苦菜多糖苦菜多糖37.91.827

14、.92.174.06.3柑桔果胶柑桔果胶43.43.730.02.069.57.3椪柑果胶椪柑果胶39.62.228.63.372.16.3表表5 5 不同处理间小鼠小肠蠕动差异显著性不同处理间小鼠小肠蠕动差异显著性SSRSSR检验检验处理处理5%显著水平显著水平1%极显著水平极显著水平苦菜多糖苦菜多糖aA苦菜果胶苦菜果胶abA椪柑果胶椪柑果胶bA柑桔果胶柑桔果胶cB生理盐水生理盐水dC表表4 4和表和表5 5可以显示，每组多糖物质都能显著促进可以显示，每组多糖物质都能显著促进小肠的蠕动，与生理盐水组有极显著差异小肠的蠕动，与生理盐水组有极显著差异( (P0.05) )，苦菜多糖与苦菜多糖与椪柑果胶存在显椪柑果胶存在显著差异著差异(P0.05)，与柑桔果胶存在极显著差异，与柑桔果胶存在极显著差异(P0.05)(P0.05)，说明在双向作用方面，说明在双向作用方面，苦菜果胶的作用更好。苦菜果胶的作用更好。n苦菜多糖和苦菜果胶能够较强地促进小鼠小肠的蠕动，苦菜多糖和苦菜果胶能够较强地促进小鼠小肠的蠕动，提示它们可能是降脂、降糖、减肥的良好食物。提示它们可能是降脂、降糖、减肥的良好食物。 人有了知识，就会具备各种分析能力，人有了知识，就会具备各种分析能力，明辨是非的能力。明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书，广泛阅读，所以我们要勤恳读书，广泛阅读，古人说古人说“书中自有黄金