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文档简介

1、医学微生物学医学微生物学实验一实验一 细菌形状学细菌形状学本次实验内容本次实验内容一、实验室规那么一、实验室规那么二、细菌的根本形状和特二、细菌的根本形状和特殊殊 构造的察看构造的察看三、革兰染色法三、革兰染色法四、油镜的运用四、油镜的运用 一实验前要做好实验预习,进一实验前要做好实验预习,进实验室只带必要的文具、讲义,并穿实验室只带必要的文具、讲义,并穿任务服。任务服。 二实验室内应坚持清洁、安静,二实验室内应坚持清洁、安静,实验时要仔细严肃,制止抽烟、饮食实验时要仔细严肃,制止抽烟、饮食和开玩笑。和开玩笑。一、实一、实 验验 室室 规规 那那么么 三维护实验器材,留意节约三维护实验器材,留

2、意节约实验资料,实验室内任何物品不得带实验资料,实验室内任何物品不得带出室外。出室外。 四留意平安,假设带菌资料四留意平安,假设带菌资料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口,应立刻报告教师进展处置。入口,应立刻报告教师进展处置。 五实验中待培育的资料五实验中待培育的资料应放在培育区;实验用过的带菌应放在培育区;实验用过的带菌资料如吸管、玻片等应放在消毒资料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区,不得放在缸、消毒箱等消毒区,不得放在桌上或冲洗于水槽内。桌上或冲洗于水槽内。 六实验终了,桌面应六实验终了,桌面应整理清洁整理清洁 ,洗手后方可离室。,洗手后方可离室

3、。值日同窗担任湿性清扫实验室,值日同窗担任湿性清扫实验室,并关好水、电、门窗。并关好水、电、门窗。 细菌的根本形状可分为细菌的根本形状可分为球菌、杆菌、螺形菌包括球菌、杆菌、螺形菌包括弧菌三类。弧菌三类。 二、细菌根本形状的察看二、细菌根本形状的察看1 1球菌:球菌: 如葡萄球菌经结晶紫如葡萄球菌经结晶紫染色后为球状,常堆集成染色后为球状,常堆集成葡萄串状,呈紫色。葡萄串状,呈紫色。 金黄色葡萄球菌血涂片金黄色葡萄球菌血涂片葡葡 萄萄 球球 菌菌肺炎球菌肺炎球菌肺肺 炎炎 球球 菌菌链链 球球 菌菌2 2杆菌:杆菌: 如大肠杆菌经番红染如大肠杆菌经番红染色后呈淡红色杆状,两端钝色后呈淡红色杆状

4、,两端钝圆,散在陈列。圆,散在陈列。大大 肠肠 杆杆 菌菌 3螺形菌: 如霍乱弧菌经稀释复红液染色后呈红色弧形,菌体微弯,如逗点状,或呈眉毛状,散在陈列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。幽幽门门螺螺杆杆菌菌 三、细菌的特殊构造:三、细菌的特殊构造: 1 1、鞭毛、鞭毛 2 2、荚膜、荚膜 3 3、芽胞、芽胞 4 4、菌毛、菌毛 鞭鞭 毛毛Flagellum化学组成:化学组成:功能:功能:鞭毛蛋白鞭毛蛋白运动器官运动器官与致病有关与致病有关鉴定分类细菌鉴定分类细菌变形杆菌鞭毛荚荚 膜膜化学组成:化学组成:功能:功能:Capsule多糖或多肽多糖或多肽抗吞噬作用抗吞噬作用粘附作用粘附作

5、用抗有害物质损伤作用抗有害物质损伤作用芽芽 胞胞功能与医学上意义:功能与医学上意义:Spore对外界的抵抗力添加对外界的抵抗力添加可发芽成繁衍体有致病性可发芽成繁衍体有致病性有鉴别作用有鉴别作用应以杀死芽胞为灭菌效果的目应以杀死芽胞为灭菌效果的目的的 四、革兰染色四、革兰染色一细菌涂片的制造一细菌涂片的制造二染色:二染色: 单染色法单染色法 革兰染色法革兰染色法 抗酸染色法抗酸染色法 复染色法复染色法一细菌涂片标本的制造一细菌涂片标本的制造 1 1涂片:涂片: 取清洁无油载玻片一张,将取清洁无油载玻片一张,将接种环用火焰烧红灭菌,待冷后接种环用火焰烧红灭菌,待冷后取一环菌液悄然涂抹在玻片上,取

6、一环菌液悄然涂抹在玻片上,制成直径约制成直径约1cm1cm大小薄层,然后将大小薄层,然后将接种环灭菌。接种环灭菌。 2 2枯燥:枯燥: 涂片置室温自然枯燥,涂片置室温自然枯燥,必要时可将标本面朝上,必要时可将标本面朝上,放在离火焰较高处悄然烘放在离火焰较高处悄然烘干,但切勿在火焰上直烤。干,但切勿在火焰上直烤。3 3固定:固定: 标本面朝上,用钟摆标本面朝上,用钟摆样速度来回经过火焰三次。样速度来回经过火焰三次。二革兰染色法步骤二革兰染色法步骤 1 1初染:在上述已固定的涂片初染:在上述已固定的涂片 上,滴加结晶紫染液,染色上,滴加结晶紫染液,染色1 1分钟,分钟,水洗。水洗。 2 2媒染:滴

7、加革兰碘液,作用媒染:滴加革兰碘液,作用1313分钟,水洗。分钟,水洗。 3 3脱色:滴加脱色:滴加 9595酒精,并频酒精,并频频摇动玻片,至无紫色脱出为止频摇动玻片,至无紫色脱出为止约约2020秒,水洗。秒,水洗。 4 4复染:加番红染液,复染半复染:加番红染液,复染半分钟,水洗,用吸水纸印干后,油分钟,水洗,用吸水纸印干后,油镜检查。镜检查。1 1 初染初染: : 结晶紫染色液结晶紫染色液, 1, 1分钟分钟 媒染媒染: : 革兰碘液革兰碘液, 1, 1分钟分钟 脱色脱色: 95%: 95%酒精酒精, 15-20, 15-20秒秒 复染复染: : 番红染色液番红染色液, 30, 30秒秒

8、涂片涂片- -枯燥枯燥- -固定固定二革兰染色法步骤二革兰染色法步骤三革兰染色法三革兰染色法 1、结果察看:、结果察看: 革兰阳性菌革兰阳性菌-兰紫色兰紫色 革兰阴性菌革兰阴性菌-红色红色 2、原理、原理 3、意义、意义五、油镜的运用五、油镜的运用( (一一) )油镜头的识别油镜头的识别 显微镜的接物镜有低倍镜头,显微镜的接物镜有低倍镜头,高倍镜头和油镜头,其中油镜头的高倍镜头和油镜头,其中油镜头的放大倍数最大。放大倍数最大。 油镜头的下缘,标有油油镜头的下缘,标有油 100100、oeloel、oiloil等字样。等字样。 (二油镜的原理:二油镜的原理: 滴镜油后可滴镜油后可以添加油镜视以添

9、加油镜视野的亮度。野的亮度。 三镜检要领三镜检要领 把载玻片固定于载物台上,使把载玻片固定于载物台上,使油镜头对准镜筒。于载玻片上滴一油镜头对准镜筒。于载玻片上滴一小滴液体石蜡,眼睛从镜筒侧面看,小滴液体石蜡,眼睛从镜筒侧面看,旋转粗调理器,使镜筒下降浸入镜旋转粗调理器,使镜筒下降浸入镜油并贴近标本,但勿触及玻片。油并贴近标本,但勿触及玻片。 镜检终了后,把镜筒升镜检终了后,把镜筒升高,用擦镜纸把油镜头上的高,用擦镜纸把油镜头上的镜油擦净。镜油擦净。 四油镜的维护方法四油镜的维护方法作业:画图作业:画图 1 1、混合细菌革兰染色结果。、混合细菌革兰染色结果。 标题:实验一、细菌形状学标题:实验一、细菌形状学 标注:细菌称号、染色法、放大标注:细菌称号、染色法、放大倍数倍数作业:画图作业:画图 1 1、混合细菌革兰染色结果。、混合细菌革兰染色结果。 2 2、细菌特殊构造示教片之一。、细菌特殊构造示教片之一。 标题:实验一、细菌形状学标题:实验一、细菌形状学 标注:细菌称号、染色法、放大标注:细菌称号、染色法、放大倍数倍数*制片:制片:* 标志标志 涂片涂片 枯燥枯燥 固固定定*

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