植物细胞工程主体

1、细胞工程细胞工程细胞工程的概念 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平细胞水平或细胞器水平上的操上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。获得细胞产品的一门综合科学技术。细胞工程细胞工程植物细胞工程植物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程植物细胞工程植物细胞工程植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞工程的理论基础是：植物细胞工程的理论基础是：植物细胞工程常用的技术植物细胞工程常用的技术 植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体

2、细胞杂交 植物细胞的全能性植物细胞的全能性全能性：全能性：是指具有某种生物全部遗传信息的任何是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整个体的潜能。一个细胞，都具有发育成完整个体的潜能。原因：原因：是生物体的每一个体细胞都含有该物种所是生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质（全套基因）。特有的全套遗传物质（全套基因）。 在理论上，生物的任何一个细胞都具有在理论上，生物的任何一个细胞都具有发育成完整个体的能力。但是，在生物的个发育成完整个体的能力。但是，在生物的个体发育中，细胞并不会表现出全能性，而是体发育中，细胞并不会表现出全能性，而是分化成各种组织和器官。这是因

3、为在特定的分化成各种组织和器官。这是因为在特定的时间和空间条件下，时间和空间条件下，细胞中的基因会有选择细胞中的基因会有选择的转录翻译出各种不同的蛋白质的转录翻译出各种不同的蛋白质，从而构成，从而构成生物体的不同组织和器官。生物体的不同组织和器官。200200多种多种10101414个个 生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质（全套基因）。的全套遗传物质（全套基因）。 基因的选择性表达。基因的选择性表达。 全能性高则分化程度低。全能性高则分化程度低。全能性最高的是受精全能性最高的是受精卵，还没有分化，个体发育其实就是受精卵不断分卵，还没有分化

4、，个体发育其实就是受精卵不断分裂和分化的过程，越往后细胞的分化程度越高。体裂和分化的过程，越往后细胞的分化程度越高。体细胞是高度分化的细胞，也是全能性最低的细胞。细胞是高度分化的细胞，也是全能性最低的细胞。细胞的全能性与细胞分化程度的关系：一、植物组织培养 概念：概念：在无菌和人工控制条件下，将在无菌和人工控制条件下，将离体的离体的植植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。丛芽，最终形成完整的植株。再分化：再分化：由愈伤组织重新分化出根

5、、芽等器官，形由愈伤组织重新分化出根、芽等器官，形成完整植株的过程。成完整植株的过程。脱分化：脱分化：已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而变成未分化的细胞。脱分化的细有的结构和功能而变成未分化的细胞。脱分化的细胞成为薄壁细胞，叫胞成为薄壁细胞，叫愈伤组织愈伤组织。过程：离体的植物细胞、组织或器官（外植体）离体的植物细胞、组织或器官（外植体）脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化芽或根等器官芽或根等器官植物体植物体：愈伤组织重新分化出根、芽等器官的：愈伤组织重新分化出根、芽等器官的过程。过程。：由外植体形成愈伤组织的过程由外植体形成愈伤组织的

6、过程：由排列疏松无规则，高度液泡化、无定：由排列疏松无规则，高度液泡化、无定形状态的薄壁细胞组成的的组织。形状态的薄壁细胞组成的的组织。1 1、在植物组培过程中，为什么要强调所用器械的灭、在植物组培过程中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？菌和实验人员的无菌操作？2 2、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能培、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能培养成小植株吗？养成小植株吗？答：因为用于培养植物细胞的答：因为用于培养植物细胞的MSMS培养基也适合微生培养基也适合微生物的生长繁殖，若微生物大量繁殖则会消耗营养物物的生长繁殖，若微生物大量繁殖则会消耗营养物质，并产生对所培养的

7、植物细胞有害的代谢废物，质，并产生对所培养的植物细胞有害的代谢废物，导致实验失败。导致实验失败。答：形成层细胞具有旺盛的分裂能力，容易诱导形答：形成层细胞具有旺盛的分裂能力，容易诱导形成愈伤组织。其他部分的细胞当然也能培养成小植成愈伤组织。其他部分的细胞当然也能培养成小植株，不过培养起来要困难一点。株，不过培养起来要困难一点。激素：激素：细胞分裂素细胞分裂素和和生长素生长素。两者用量的比例影响。两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。植物细胞的发育方向。营养成分：营养成分：大量元素、微量元素、有机物大量元素、微量元素、有机物（氨基酸、维生素、蔗糖等）、水（氨基酸、维生素、蔗糖等）、水 光照：光照

8、：脱分化无光、再分化需光脱分化无光、再分化需光 3.3.影响植物组织培养的因素有哪些影响植物组织培养的因素有哪些？生长素生长素/ /细胞分裂素细胞分裂素: :比值高时，有利于根的分化；比值高时，有利于根的分化；生长素生长素/ /细胞分裂素细胞分裂素: :比值低时，有利于芽的分化；比值低时，有利于芽的分化；生长素生长素/ /细胞分裂素细胞分裂素: :比值适中，促进愈伤组织的形成。比值适中，促进愈伤组织的形成。二、植物体细胞杂交 概念：概念：将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的

9、植物体的技术。1 1、要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起，、要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起，遇到的第一个障碍是什么？遇到的第一个障碍是什么？ 如何温和的消除这一如何温和的消除这一障碍？障碍？纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶细胞壁细胞壁原生质体原生质体物理物理 ：离心、振动、：离心、振动、电刺激电刺激 化学化学: : 聚乙二醇聚乙二醇(PEG)(PEG)2 2、两个原生质体发生融合，首先是什么融合？利、两个原生质体发生融合，首先是什么融合？利用了什么原理？什么方法？用了什么原理？什么方法？ 细胞膜细胞膜细胞膜的流动性细胞膜的流动性3 3、植物细胞融合、植物细胞融合成功标志是成功标

10、志是什么？什么？杂种细胞产生了新的细胞壁杂种细胞产生了新的细胞壁植物组织培养植物组织培养4 4、形成了杂种细胞后，如何才能得到杂种植株？、形成了杂种细胞后，如何才能得到杂种植株？2脱分化脱分化再分化再分化杂杂种种植植株株融合的融合的原生质原生质体体ABAB再再生生出出细细胞胞壁壁脱脱分分化化愈愈伤伤组组织织再再分分化化植物细胞的融合植物细胞的融合植物组织培养植物组织培养植物细胞植物细胞A A原生质体原生质体B B原生质体原生质体A A杂种杂种细胞细胞ABAB去去 壁壁去去 壁壁人人工工诱诱导导方法？方法？促进融合促进融合的方法？的方法？植物细胞植物细胞B B(1)(1)(2)(3)(4)(5)

11、标志标志AB问题：问题：为什么为什么“番茄番茄马铃薯马铃薯”超级杂种植超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄地下结马铃薯？地下结马铃薯？主要原因：主要原因：生物基因的表达不是孤立的，它们之生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯番茄杂番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，所以杂薯或番茄植株中的遗传物质一样

12、有序表达，所以杂交植株不能地上长番茄地下结马铃薯。交植株不能地上长番茄地下结马铃薯。意义：意义：打破了植物远缘杂交不亲和的障碍，扩大打破了植物远缘杂交不亲和的障碍，扩大了用于杂交的亲本组合范围。了用于杂交的亲本组合范围。三、植物细胞工程的实际应用 繁殖植物的新途径繁殖植物的新途径 微型繁殖微型繁殖 作物脱毒作物脱毒 人工种子人工种子 育种新方法育种新方法 单倍体育种单倍体育种 诱导突变体诱导突变体 细胞产物的工厂化生产细胞产物的工厂化生产 微型繁殖概念：概念：利用植物组织培养技术，快速繁殖植物优利用植物组织培养技术，快速繁殖植物优良品种（也叫快速繁殖技术）良品种（也叫快速繁殖技术）原理：原理：

13、植物细胞的全能性植物细胞的全能性优点：优点：取材少，培养周期短取材少，培养周期短 繁殖速度快，可大批量生产繁殖速度快，可大批量生产 无性生殖，保持优良性状无性生殖，保持优良性状试 管 苗 大 规 模 培 养试 管 苗 大 规 模 培 养有性生殖：有性生殖：经过两性生殖细胞结合成受精卵，再经过两性生殖细胞结合成受精卵，再由受精卵发育成新个体的生殖方式。由受精卵发育成新个体的生殖方式。无性生殖：无性生殖：不经过两性生殖细胞结合，直接由母不经过两性生殖细胞结合，直接由母体的一部分发育成新个体的生殖方式。体的一部分发育成新个体的生殖方式。如：细菌的分裂生殖，酵母菌的出芽生殖，植物如：细菌的分裂生殖，酵

14、母菌的出芽生殖，植物的扦插、嫁接。的扦插、嫁接。 作物脱毒长期进行无性繁殖的作物，易积累感染长期进行无性繁殖的作物，易积累感染的病毒，导致产量降低，品质变差。的病毒，导致产量降低，品质变差。脱毒的原因脱毒的原因: :植物茎尖、根尖的分生区组织植物茎尖、根尖的分生区组织利用植物的分生区组织进行组织培养利用植物的分生区组织进行组织培养人工种子天然种子的局限：天然种子的局限：培育周期长培育周期长优良杂种的后代会发生性状分离而丧失其优良特性优良杂种的后代会发生性状分离而丧失其优良特性生产会受到季节、气候和地域的限制，并且需要占用大生产会受到季节、气候和地域的限制，并且需要占用大量的土地实现制种。量的土

15、地实现制种。人工薄膜，透气透水人工薄膜，透气透水胚状体，不定芽胚状体，不定芽营养基质营养基质+植物激素植物激素+ +抗生素抗生素种皮种皮 胚胚胚乳胚乳 在植物组织培养的过程中，由于培养的在植物组织培养的过程中，由于培养的细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响而产生突变。通过筛选，得到对等）的影响而产生突变。通过筛选，得到对人类有利的突变体，从而培育出新品种。人类有利的突变体，从而培育出新品种。突变体的利用产物的种类：产物的种类：蛋白质、脂肪、糖类、药物、蛋白质、脂肪、糖类

16、、药物、香料、生物碱、香料、生物碱、人参皂甙人参皂甙、紫杉醇紫杉醇、奎宁、奎宁、茉莉花油等。茉莉花油等。技术：技术：植物的组织培养植物的组织培养 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。 1 1、植物组织培养过程可以归纳为：、植物组织培养过程可以归纳为：相关叙述中错误的是（相关叙述中错误的是（ ）A.A.从理论上讲，从理论上讲，可以是植物体的每一个活细胞可以是植物体的每一个活细胞B.B.将

17、将经脱分化培养成经脱分化培养成时，再植上人工种皮可获得人时，再植上人工种皮可获得人工种子工种子C.C.的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂D.D.的培养过程中，应在培养基中加入水、无机盐、的培养过程中，应在培养基中加入水、无机盐、蔗糖、氨基酸、植物激素等蔗糖、氨基酸、植物激素等B2.2.将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（的是（ ）A.A.具有完整细胞核的细胞具有完整细胞核的细胞 B.B.一定的营养物质和植物激素一定的营养物质和植物激素C.C.离体状态离体状态 D.D.导入指示基因导入

18、指示基因【解析】【解析】选选D D。植物细胞具有全能性的原因是每一个细胞中。植物细胞具有全能性的原因是每一个细胞中都含有本物种体细胞的全套遗传物质。在进行组织培养时，都含有本物种体细胞的全套遗传物质。在进行组织培养时，需要离体的组织或细胞（具有完整细胞核），若不离体，需要离体的组织或细胞（具有完整细胞核），若不离体，只能选择性表达为不同的组织、器官，培养时还需要一定只能选择性表达为不同的组织、器官，培养时还需要一定的营养物质和植物激素（细胞分裂素、生长素），不需要的营养物质和植物激素（细胞分裂素、生长素），不需要导入指示基因。导入指示基因。3.3.在下列各育种方式中，与组织培养技术无关的是（在

19、下列各育种方式中，与组织培养技术无关的是（ ）A.A.利用花药离体培养得到单倍体植株利用花药离体培养得到单倍体植株B.B.秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株C.C.通过组织培养培育人工种子通过组织培养培育人工种子D.D.通过体细胞杂交培养通过体细胞杂交培养“番茄番茄马铃薯马铃薯”杂种植株杂种植株【解析】【解析】选选B B。花药离体培养实质是将花粉培育为新个。花药离体培养实质是将花粉培育为新个体，人工种子是将植物细胞经组织培养形成胚状体再包体，人工种子是将植物细胞经组织培养形成胚状体再包装成人工种子，体细胞杂交形成的杂种细胞培育成杂种装成人工种子，体细胞

20、杂交形成的杂种细胞培育成杂种植株，也采用了组织培养技术。而秋水仙素处理二倍体植株，也采用了组织培养技术。而秋水仙素处理二倍体幼苗获得四倍体植株，是利用了染色体变异的原理。幼苗获得四倍体植株，是利用了染色体变异的原理。4 4下列有关植物细胞与组织培养的叙述中下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是，错误的是( () )A A花药、胚不能作为组织培养的材料花药、胚不能作为组织培养的材料B B植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性C C外植体是指用于培养的植物组织或器官外植体是指用于培养的植物组织或器官D D外植体可诱导出愈伤组织外植体可诱导出愈伤组织解析解析：考查植物组织培养的过程和原理。植物的

21、器：考查植物组织培养的过程和原理。植物的器官、组织和细胞以及花药均可做为组织培养的外植官、组织和细胞以及花药均可做为组织培养的外植体。故体。故A A不对。不对。答案答案：A A5 5(2008(2008江苏生物江苏生物) )某组织培养实验室的愈伤某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4 4个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是( (多选多选)()() )A A污染主要不是培养基灭菌时间短造成的污染主要不是培养基

22、灭菌时间短造成的B B污染主要来源于组织培养所用的离体组织污染主要来源于组织培养所用的离体组织C C调节培养基调节培养基pHpH不能解决污染问题不能解决污染问题D D调节培养温度不能解决污染问题调节培养温度不能解决污染问题ABCDABCD6 6(2008(2008年江苏生物年江苏生物) )下列关于植物组织培养下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是的叙述中，错误的是( () )A A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压节渗透压B B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化组织的生长和分化C C离体器官或组

23、织的细胞都必须通过脱分化离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织才能形成愈伤组织D D同一株绿色开花植物不同部分的细胞经培同一株绿色开花植物不同部分的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同养获得的愈伤组织基因相同解析解析：同一株绿色开花植物的细胞分体细胞和生殖：同一株绿色开花植物的细胞分体细胞和生殖细胞两类，自然这两类细胞经培养获得的愈伤组织细胞两类，自然这两类细胞经培养获得的愈伤组织细胞的遗传物质细胞的遗传物质( (基因基因) )亦不相同。亦不相同。答案答案：D D7.7.用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱蚊香草，使有驱

24、蚊作用的香茅醛随着天竺葵的蒸腾作用散发蚊香草，使有驱蚊作用的香茅醛随着天竺葵的蒸腾作用散发到空气中，达到驱蚊的效果。下面有关培育过程的叙述，不到空气中，达到驱蚊的效果。下面有关培育过程的叙述，不正确的是（正确的是（ ）A.A.原生质体的融合常用原生质体的融合常用PEGPEG作为诱导剂作为诱导剂B.B.形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型C.C.由杂种细胞由杂种细胞杂种植株，要通过有丝分裂和细胞的分化杂种植株，要通过有丝分裂和细胞的分化D.D.该项生物工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍该项生物工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍【解析】【解析】选选B B。杂种细

25、胞经组织培养形成的愈伤组织，自身不含。杂种细胞经组织培养形成的愈伤组织，自身不含叶绿素无法进行光合作用，其营养物质来自培养基，代谢类型叶绿素无法进行光合作用，其营养物质来自培养基，代谢类型是异养需氧型。是异养需氧型。组织培养组织培养无性无性单倍体单倍体有丝有丝8 8、几乎不含病毒几乎不含病毒不会不会无菌无菌脱毒苗脱毒苗极少极少缩短育种年限缩短育种年限工程工程基因基因诱变诱变植物体细胞杂交植物体细胞杂交9.9.科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了的原生质体融合，成功地培育出了“番茄番茄马铃薯马铃薯”杂种

26、植杂种植株，如图，其中表示过程，英文字母表示细胞、组织株，如图，其中表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：或植株。据图回答下列问题：(1)(1)实现过程实现过程的技术是的技术是_，在此之前使用，在此之前使用_处理细胞以除去细胞壁。如果将已除去处理细胞以除去细胞壁。如果将已除去壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？_。过程。过程如放在神舟七号飞船上更易进行，如放在神舟七号飞船上更易进行，这是因为这是因为_ _ 。与过程。与过程密切相关的具有密切相关的具有单层膜结构的细胞器是单层膜结构的细胞器是_。诱导原生质体融合诱导原生质体融合圆

27、球状圆球状纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶高尔基体高尔基体失去重力的影响失去重力的影响（2 2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是原理是_，其中过程，其中过程相当于相当于_过过程，程，涉及的分裂方式为涉及的分裂方式为_。若利用此技术生。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物产治疗癌症的抗癌药物紫杉醇，培养将进行到紫杉醇，培养将进行到_（填字母编号）。（填字母编号）。有丝分裂有丝分裂植物细胞的全能性植物细胞的全能性脱分化脱分化e（3 3）若番茄细胞内有）若番茄细胞内有m m条染色体，马铃薯细胞内含条染色体，马铃薯细胞内含n n条染色条

28、染色体，则体，则“番茄番茄马铃薯马铃薯”细胞内含细胞内含_条染色体；若杂种条染色体；若杂种细胞培育成的细胞培育成的“番茄番茄马铃薯马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？_。（4 4）如果形成）如果形成c c细胞的细胞的a a、b b细胞都是番茄细胞，那么更简细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株单的得到番茄植株f f的处理方法的处理方法_。m+n单倍体单倍体秋水仙素处理萌发的秋水仙素处理萌发的番茄种子或幼苗番茄种子或幼苗 （5 5）用传统的方法能否得到上述杂种植株？）用传统的方法能否得

29、到上述杂种植株？_理由：理由：_这项研究对于培育作物新品种有何重大意义：这项研究对于培育作物新品种有何重大意义：_。不同种生物之间存在生殖隔离不同种生物之间存在生殖隔离不能不能克服了远缘杂交不亲和的障碍，扩大了用于杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍，扩大了用于杂交的亲本组合范围的亲本组合范围10.10.（20072007广东高考）香蕉原产热带地区，是我国南方重广东高考）香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTVBBTV，单链

30、环状，单链环状DNADNA病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种植水平，具有重要意义。手段提高其种植水平，具有重要意义。请根据上述材料，回答下列问题：请根据上述材料，回答下列问题：（1 1）简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。）简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。（2 2）脱毒香蕉苗的获得，可采用）脱毒香蕉苗的获得，可采

31、用_的方法，此方法的依据是的方法，此方法的依据是_和和_。 选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组选取香蕉外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导形成大量胚状体，根，获得大量试管苗（或通过诱导形成大量胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。 茎尖的组织培养茎尖的组织培养 植物细胞的全能性植物细胞的全能性 茎尖分生组织不带病毒茎尖分生组织不带病毒（3 3）建立可靠的）建立可靠的BBTVBBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，检测方法可以

32、监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法检测病毒的存在？（列举两种方法）请问可用哪些方法检测病毒的存在？（列举两种方法）10.10.（20072007广东高考）香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作广东高考）香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（由香蕉束顶病毒（BBTVBBTV，单链环状，单链环状DNADNA病毒）引起的香蕉束顶病，对香病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖蕉生产的危害十分严重。当前

33、香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种植水平，具有重要意义。技手段提高其种植水平，具有重要意义。用一小段单链用一小段单链BBTVBBTV病毒的病毒的DNADNA作探针进行检测（作探针进行检测（DNADNA分子分子杂交技术）；杂交技术）；用用BBTVBBTV病毒蛋白注射动物，从动物血清重分离相应抗体，病毒蛋白注射动物，从动物血清重分离相应抗体，并用荧光标记，利用抗原并用荧光标记，利用抗原抗体的杂交反应，判断病毒是抗体的杂交反应，判断病毒是否存在）。否存在）。（4

34、 4）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afpafp对提高农作对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的物的抗寒能力有较好的应用价值，该基因可以从这些鱼的DNADNA中扩增得到。中扩增得到。如何利用如何利用afpafp基因，通过转基因技术获基因，通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株？得抗寒能力提高的香蕉植株？ 将将afpafp基因插入土壤农杆菌的质粒中，构建表达载体，基因插入土壤农杆菌的质粒中，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。胞通过组织培

35、养形成植株。11.11.玉米是雌雄同株异花的单子叶植物，是生产和科研的好玉米是雌雄同株异花的单子叶植物，是生产和科研的好材料。现有两个玉米品种，其基因型分别为材料。现有两个玉米品种，其基因型分别为yyRryyRr和和YyrrYyrr。科学家将它们的花粉除去细胞壁后进行原生质体融合，再科学家将它们的花粉除去细胞壁后进行原生质体融合，再把这些融合细胞进行组织培养，培育出了玉米新品种。把这些融合细胞进行组织培养，培育出了玉米新品种。（1 1）上述育种方法采用了）上述育种方法采用了_技术，技术，其生物学原理是其生物学原理是_。（2 2）在组织培养的培养基中除了必要的营养物质外，还必）在组织培养的培养基

36、中除了必要的营养物质外，还必须添加须添加_。培养过程中，融合细胞首先通过细胞。培养过程中，融合细胞首先通过细胞分裂形成分裂形成_，这个过程叫，这个过程叫_。植物激素植物激素生物膜的流动性、细胞的全能性生物膜的流动性、细胞的全能性植物体细胞杂交植物体细胞杂交愈伤组织愈伤组织脱分化脱分化（3 3）在植物组织培养一段时间后，发现不同细胞所）在植物组织培养一段时间后，发现不同细胞所含蛋白质种类和数量有明显差异，其原因是含蛋白质种类和数量有明显差异，其原因是_。（4 4）两个品种的花粉进行原生质体融合后，可产生）两个品种的花粉进行原生质体融合后，可产生_种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），种基因型的融

37、合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞再经过组织培养可以得到这些融合细胞再经过组织培养可以得到_种种不同于亲本表现型的玉米新品种。不同于亲本表现型的玉米新品种。6基因的选择性表达基因的选择性表达2yyRR、yyrr、YYrr、yyRr、YyRr、Yyrr1212、（、（20092009上海卷上海卷.36).36)回答下列有关植物组织培养的问题。回答下列有关植物组织培养的问题。 (1)(1)用于植物组织培养的植物材料称为用于植物组织培养的植物材料称为_。 (2)(2)组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为过程称为_。 (3)在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：外植体外植体脱分化脱分化当植物激素当植物激素X X与植物激素与植物激素Y Y的浓度比等于的浓度比等于1 1时，时，_；_；_。未分化细胞群经分裂形成愈伤组织未分化细胞群经分裂形成愈伤组织当植物激素当植物激素X X与植物激素与植物激素Y Y的浓度比大于的浓度比大于1 1时，未分化细胞时，未分化细胞群分化形成芽群分化