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文档简介
1、 复习内容血液生理、血液标本类型 、血液标本的采集方法、常用抗凝剂机制及用途、血涂片的制备与染色、瑞氏染色原理、红细胞的生理特性和功能、红细胞计数、电阻抗原理库尔特、流式细胞术、红细胞计数意义、血红蛋白组成、氰化高铁血红蛋白测定原理、红细胞形态检查、异常红细胞形态大小,形状,血红蛋白含量,结构和排列异常,红细胞比容、HCT的主要应用、红细胞平均指数、平均指数用于贫血的形态学分类、网织红细胞计数及临床意义、嗜碱性点彩红细胞计数及意义、红细胞沉降率影响因素及临床意义、白细胞计数、白细胞分类计数三分类、五分类及临床意义、中性粒细胞毒性变化、核左移、核右移、异型淋巴细胞3型血小板计数临床意义、第四章
2、尿液标本采集和处理 尿液是血液经过肾小球滤过、肾小管和集合管重吸收和排泄所产生的终末代谢产物,可反映机体的代谢状态,并受机体各系统功能状态的影响。 尿液的采集简便、无创,因此,尿液检测在临床上常作为常规检测工程之一。尿液检测的临床应用:泌尿系统疾病的诊断和疗效判断:泌尿系统炎症、结石、肿瘤、肾移植排斥等。其他系统疾病的诊断:糖尿病、胰腺炎、黄疸鉴别、MM、溶血等。用药的监护:抗菌药物如庆大、卡那、磺胺药等引起的肾损害。尿液标本采集 一.一般要求 (一)患者告知 一般患者遵医生要求留尿。 1. 收集足够尿量10ml,如收集定时尿,容器够大并 加盖,必要时加防腐剂。 2. 防止阴道分泌物、粪便、外
3、表活性剂等污染。 3. 如需培养,应清洁外阴后用无菌容器收集中段尿最 好在用抗生素前。二. 收集的容器:1. 清洁、枯燥、一次性使用,有较大开口便于收集3050ml尿杯、试管。进行细菌培养时用无菌容器。2. 有明显标记病人信息 晨尿随机尿计时尿特殊试验尿培养用尿标本尿液标本种类三、尿液标本采集种类 根据临床不同的尿液检验目的,正确、合理地采集尿液,才能为临床提供正确、有用的检验结果。1晨尿morning urine 定义:晨尿是指早晨的第一次尿液标本。 特点:晨尿浓缩程度高,常偏酸性,其中有形成 分较为完整,以及某些化学成分的浓度较高。 用途:晨尿适宜作蛋白质、细菌、有形成分的显 微镜检查及妊
4、娠试验等。2随机尿random urine 定义:随机尿是随时留取的尿液标本。 特点:随机尿不受时间限制,标本新鲜易得。 用途:随机尿适合于门诊、急诊患者的尿液筛选 试验,以及隐血、酮体、尿糖、尿淀粉酶 等的检验。 3计时尿time urine 餐后尿:一般是收集午餐后2-4h内的尿液,适用于病 理性糖尿、蛋白尿或尿胆原的检测。 3h尿:一般是收集上午69时段内的尿液,适用于尿液 有形成分排泄率检查。 12h尿:是收集晚8时至次晨8时段内的全部尿液。适用 于Addis计数。 24h尿:是收集24小时内的全部尿液,适用于检测体内 代谢产物以及用于尿浓缩沉渣或结核杆菌检查 等。4特殊试验尿 尿三杯
5、试验:一次排尿分三段收集。临床用于尿路及 生殖系统疾病定位初步判断。 导管尿中段尿耻骨上膀胱穿刺尿采集方法5培养用尿标本 对肾或尿路感染患者的尿作病原微生物培养,鉴定以及药物敏感试验,应采集无菌尿液。 四.标本保存和处理1. 尿标本收集后应及时送检,及时检查2小时内, 否那么会 影响检测结果表4-3。2. 如不能及时送检,应置冰箱4保存6小时。3. 防腐剂的应用抑制细菌生长 甲醛5ml/L :固定细胞、管型 甲苯5ml/L :24H尿蛋白、尿肌酐测定 浓盐酸*10ml/L : 24H尿钙、磷、激素代谢产物 测定五、尿液标本采集质量管理 标准化管理: SOP文件 检验的申请: 检验者、临床医护人
6、员 患者准备: 饮食、用药、活动、局部清洁等 标本采集: 采集的时间、方法、种类、标识等 接受标本: 接收的时间、标本状况、签收 检验报告: 室内质量控制 纠正失控: 记录和保存检验结果 : 检验结果保存2年 质量控制评估: 参加室间质评第五章 尿液一般检验尿液理学检查尿液化学检查尿液有形成分检验第一节 尿液理学检查量、味、色、比重尿量(urine volume): 24小时尿总量 参考值:1000-2000ml/24h成人,约1ml/kg 儿童按每公斤体重计排尿量,约为成人的34倍。 1. 检测方法:使用量筒或其他具有刻度的容器,直接测定尿液体积。 2、检测方法及评价 直接法:一次测定24h
7、内的尿液总量。准确性较好, 但尿液需加防腐剂,否那么易变质,呈恶臭味。 累计法:分次测定24h内尿液体积,然后计其总量。 因屡次测定,误差较大,容易漏检,影响尿量准 确性. 计时法:按时分次测定24h内的尿液体积,计算出 每小时尿量。常用于危重患者排尿量的观察。3、质量控制 合格的标准量筒或具有精确刻度的液体容积 测量器具,其刻度精确至1 ml必须清晰可见,便于测定时准确读数。 尿液采集必须完全而准确,不可丧失;测定 24h 尿量时,读数误差不超过20ml。4. 临床意义 1、多尿(poliuria):多于2500 ml/24h称多尿。 见于:摄入过多; 内分泌疾病:DM高SG,尿崩症低SG;
8、 肾脏疾病:慢性肾盂肾炎,急性肾衰多尿期等; 精神性多尿: 常伴尿频; 使用利尿剂:(2)、少尿或无尿:24小时尿量少于400ml或每小时尿量持续少于17ml称少尿(oliguria);24小时少于100ml称无尿 (anuria)。原因: 肾前性:休克、严重脱水、心力衰竭等 肾性: 肾小球、肾小管功能损伤 肾后性:尿路梗阻结石、肿瘤、畸形二、尿液颜色和透明度 尿色 urine color :是尿液颜色的简称。 尿透明度:是以混浊度 turbidity 表示,尿液混浊程度取决于其含有混悬物质的种类和数量的多少。新鲜尿液呈淡黄色,清晰透明。清晰透明轻度混浊雾状混浊云雾状明显混浊透明度分为1、检测
9、原理 尿液颜色和透明度,是通过肉眼观察来判断尿液外观理学性状的结果。 尿液颜色和透明度,受观察者的主观因素而影响,带有一定的主观性和局限性。2、质量控制 使用统一标准 统一不同的操作者判断尿色 和透明度的认知能力。 使用新鲜尿液 新鲜尿液标本有助于准确判 断颜色和透明度。 防止污染 以免产生隐血假阳性。3. 临床意义1.血尿hematuria: 肉眼血尿:超过1ml/L尿,淡红色 显微镜下血尿:平均大于3个RBC/HP 见于:肾或泌尿系统结石、肿瘤、外伤、重症 肾小球疾病等;也可见于ITP、血友病等。2. 血红蛋白尿(hemoglobinuria)和肌红蛋白尿 (myoglobinuria)浓
10、茶色、酱油色: 见于PNH、输血反响、挤压综合征等。3.脓尿(pyuria)与菌尿(bacteriuria)白色浑浊或云雾状: 见于:泌尿系统感染:肾盂肾炎、膀胱炎4.乳糜尿(chyluria)和脂肪尿(lipiduria)白色乳状:乳糜实验阳性,前者见于丝虫病、 淋巴回流受阻;后者见于肾病综合征等。5. 胆红素尿(bilirubinuria)深黄:含有大量的结合胆 红素引起的,震荡后出现泡沫,见于阻塞性黄 疸及肝细胞黄疸。6. 药物性有色尿7、结晶尿 尿液中含有高浓度的盐类结晶者,称为结晶尿。 尿液可呈灰白色或粉红色混浊外观。尿酸盐:酸性尿液遇冷时,析出淡粉红色 结晶混浊或沉淀。磷酸盐和碳酸
11、盐:碱性尿液遇冷时,尿 呈淡灰色、白色混浊。草酸盐:结晶尿加15%HCl后,混浊消失。结晶尿类型乳糜尿、脓尿、菌尿、结晶尿鉴别混浊方法乳糜尿脓尿菌尿结晶尿镜检加热加酸或加碱蛋白定性脂肪球混浊阳性白细胞、脓细胞产生沉淀混浊混浊消失细菌产生沉淀混浊阳性阳性盐类结晶混浊消失阴性三、比重specific gravity,SG:尿液在4时与同体积纯水重量之比,称为尿比重(密)。尿比重是尿液中所含溶质浓度的指标,所以尿比重大于水,可相对指示肾脏的浓缩功能。 正常情况下尿比重 晨尿: 1.0151.025; 随机尿:成人 1.0031.035 新生儿 1.0021.004 在生理情况下,尿比密与尿液排出的水
12、分,盐类 及有机物含量有关。 在病理情况下,还受尿蛋白,尿糖、细胞成分及 管型等病理成分的影响。氯化钠25%尿素25%肌酐蛋白质的代谢产物尿液中的含盐量可溶性的晶体1、检测方法 化学试带法:精度差,但广泛用作筛选试验尿比重计法:操作繁,精度差,目前已淘汰超声波法:易自动化、标准化,但需特殊仪器称重法:准确性高,但操作繁,易受温度影响折射计法:参考方法NCCLS和CCCLS推荐检测方法2、质量控制 使用与仪器匹配,合格有效的试带每天用标准色带进行校准如尿PH7.0,测定值应增高0.005试带法对过高或过低的尿比密不敏感应进行连续屡次测定化学试带法折射计法:仪器要用去离子水和的标准溶液进行校 准。
13、测尿前要按操作时室温进行温度补偿调校。3. 临床意义1SG增高:见于高热、脱水;糖尿病;急性肾小球肾炎、 放射性造影剂也可引起。2SG降低:见于急性肾小管坏死、慢性肾衰竭少尿期或 多尿期,尿崩症等。 可粗略判断肾小管的浓缩稀释功能。四、尿渗量osmolality 尿渗量又称尿渗透量,是指尿液内全部溶质颗粒的总数量。尿渗量能较好地反映肾脏对溶质和水的相对排泄 速度,更确切反映肾脏脓缩和稀释功能,因此,是评价肾脏浓缩功能较好的指标。 需用特殊仪器进行测定。在临床上可用尿比重粗略代替 渗透量有两种表示方法:质量渗摩尔Osm/kgH2O和体积渗 摩尔Osm/L。 正常尿渗量:6001000mOsm/k
14、gH2O,尿渗量/血浆渗量之比为 3.04.71。五、尿气味odor 气味是通过鼻子可以闻到的味儿。正常尿液的气味是由肾脏不断产生的酯类和尿内含有挥发酸共同组成,人的嗅觉不能分辨这些有机酸和酯类。 新鲜尿液具有特殊微弱的芳香气味。 假设有:氨味:说明有尿潴留或慢性膀胱炎; 粪臭味:要考虑膀胱-直肠瘘; 烂苹果的甜味:可能是糖尿病酮症酸中毒; 大蒜臭味:可能有机磷农药中毒第二节 尿液化学检查 一般包括尿酸碱度、蛋白、糖、酮体、胆红素、尿胆原、隐血、亚硝酸盐、白细胞酯酶、维生素C等,多采用尿干化学分析仪测定。干化学尿液分析仪一、 原理:1、 试纸条上的各个模块与尿中的相应成分进行独立的反响而显示不
15、同的颜色,颜色的深浅与尿中的某种成分的含量呈正比关系。2、 用一光源照射已吸附尿液并产生化学反响的模块,其发射光被一球面积分析仪接受后再进行一系列处理对照、参比计算出结果。 干扰本实验的药物1奎宁、磺胺嘧啶致pH大于9,易导致尿蛋白假阳性。2大剂量青霉素480万5小时易导致尿蛋白假阴性,3大剂量的维生素C易导致尿糖、潜血及酮体假阳性4吩噻嗪易导致尿胆红素及尿胆元假阳性5呋喃坦叮易导致尿白细胞假阳性。 因此检查前应停药1-2天或告知检验科有关应用药物情况特别是内肾科的病人,假设遇到无法解释的阳性结果时应停药一、尿液的酸碱度测定 尿液酸碱度是反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平衡能力的重要指标之一,常
16、称尿液酸度。 正常晨尿多偏弱酸性,pH 5.56.5平均pH 6.0;随机尿 pH 4.58.0;尿可滴定酸度 2040 mmol/24h尿。可滴定酸度:相当于尿液酸度总量真酸度:用氢离子浓度的负对数pH值表示。尿液酸度1、检测方法 指示剂法:方法简单,变色范围窄pH 6.07.6, 准确性差,易受干扰。pH试带法:操作简单,变色范围宽pH5.09.0, 但易吸潮变质。常用作筛选方法。滴定法:尿液酸度的总量。动态监测,操作繁。电极法:精确度高,但需特殊仪器,操作繁。包括2、检测原理 指示剂法indicator:用0.4 g/L溴麝香草酚蓝溶液滴于 尿液中,黄色为酸性尿,蓝色为碱性尿,绿色为中性
17、尿。 pH试带法:pH试剂块含有甲基红和溴麝香草酚蓝两种酸 碱指示剂,在pH 4.59.0内,颜色有橙红经黄绿到蓝色变化。 滴定法titration:用0.1mol/L NaOH将尿液标本滴定至 pH 7.4时,根据NaOH消耗量求得尿液可滴定酸度。 pH计法:用pH电极直接精确地测定尿液的pH值。3、质量控制 标本必须新鲜 否那么造成pH增高或减低。 指示剂法:指示剂的解离状态不同所呈现的颜色不同。 pH试带法:变化范围宽,定期检查试带灵敏度。 滴定法: 氢氧化钠浓度必须标准,定期重配。 pH计法: 定期校准pH计,确保仪器状态良好。4、临床意义 生理性尿液pH易受食物影响肉类,水果进餐后尿
18、pH增高。一过性增高碱潮生理活动及药物等的影响病理性尿pH减低:酸中毒,低血钾性碱中毒尿pH增高:碱中毒,肾小管性酸中毒药物包括二、尿液蛋白质检查正 常: 0-80mg/24小时尿,定性实验是阴性。各种原因造成尿液内蛋白质超过150mg/24h或100mg/L,蛋白定性试验呈阳性者,称为蛋白尿proteinuria, PRO 。检验蛋白尿的重要性在于:蛋白尿主要反映肾小球或肾小管损害。持续性蛋白尿是肾脏病的重要指征。 肾小球性蛋白尿glomerular proteinuria肾小管性蛋白尿tubular proteinuria混合性蛋白尿mixed proteinuria溢出性蛋白尿overf
19、low proteinuria组织性蛋白尿histic proteinuria生理性蛋白尿physiological proteinuria偶然性假性蛋白尿accidental proteinuria 尿蛋白分类 (尿常规方法不能区分)1、检测方法 试带法:对清蛋白敏感性高0.07g/L,球蛋白敏感性差,本周蛋白不敏感。测定迅速、简便,易于标准化,宜作筛选试验。加热乙酸法:对清蛋白和球蛋白都敏感,但敏感性低0.15g/L。特异性强、干扰少,宜作鉴别试验。磺基水杨酸法:对清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白的敏感性高0.050.1g/L。操作简便、反响灵敏、结果显示快,宜作确证试验。定性试验2、检测
20、原理 试带法:pH指示剂的蛋白误差protein error 各种指示剂都有一定的 pH变化范围,在一定的pH缓冲液中颜色比较稳定,当尿液中含有蛋白质时,由于蛋白质离子对指示剂如四溴酚蓝离子相反电荷的吸引而生成复合物,引起指示剂的进一步电离,超越了缓冲作用,指示剂发生颜色改变。 加热乙酸法: 加热煮沸使蛋白变性、凝固本周蛋白那么溶解,然后加酸使尿液pH接近尿蛋白等电点pH 4.7时,有利于变性蛋白沉淀。在含有适量无机盐存在的条件下,蛋白质更易于凝固沉淀,而无机盐结晶溶解消失。 磺基水杨酸法SSA: 在略低于蛋白质等电点的酸性环境中,尿蛋白的氨基带正电荷,能与带负电荷的磺基水杨酸根结合,形成不溶
21、性蛋白盐而沉淀。3、质量控制试带法: 必须使用标准、合格的试带,操作标准。加热乙酸法:控制加酸量及盐类浓度。磺基水杨酸法:注意鉴别假阳性反响煮沸。 两种检测方法互相对照。4、临床意义 尿液蛋白尿检查,除了主要用于肾脏疾病的诊断、治疗观察、预后监测之外,还用于全身性疾病及其他疾病的筛选试验。生理性蛋白尿(轻度)病理性蛋白尿蛋白尿包括 生理性蛋白尿:尿蛋白定性+,定量0.5g/24h。功能性蛋白尿直立性蛋白尿偶然性蛋白尿老年性蛋白尿妊娠性蛋白尿生理性蛋白尿包括 肾性蛋白尿肾前性蛋白尿浆细胞病血管内溶血性疾病大面积肌肉损伤酶类增高肾小球性蛋白尿肾小管性蛋白尿肾后性蛋白尿泌尿、生殖系炎症反响泌尿系结石
22、、肿瘤等泌尿系邻近器官疾病刺激病理性蛋白尿尿蛋白电泳(按分子量大小排列)1.非选择性肾小球性蛋白尿伴游离轻链2.肾小管性蛋白尿3.生理性蛋白尿4.混合性蛋白尿5.局部选择性肾小球性蛋白尿三、尿糖检查 生理情况下,肾小球滤过液的葡萄糖浓度几乎与血浆相同,但当滤液流经肾小管近曲小管时,葡萄糖可全部被重吸收回到血液中。因此,正常人尿液几乎不含或仅含微量葡萄糖。临床上,把尿液中开始出现葡萄糖时的血糖浓度,称为肾糖阈。 尿液内尿糖定性试验呈阳性者,称为糖尿。 糖尿一般是指葡萄糖(glucose, Glu)尿,葡萄糖是尿糖的主要成分,偶尔可见乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等。1、检测方法 班氏法:方法简便,特异
23、性差,干扰因素多。试带法:简便快速,特异性高,灵敏度高。薄层层析法:操作复杂,费时,本钱高。包括2、检测原理 班氏法:具有复原剂性质的糖类在热碱性溶液中能将 Cu2+复原成Cu,形成黄色的CuOH沉淀和红 色的Cu2O沉淀。 试带法:采用葡萄糖氧化酶法GOD。葡萄糖在 GOD的作用下,生成葡萄糖酸和H2O2, H2O2在过氧化物酶催化下氧化色素原而呈现 颜色变化。3、临床意义 尿糖检查,主要是作为糖尿病诊断、病情判断、治疗效果观察及预后监测的重要指标之一。尿糖检查时,应同时检测血糖,以提高诊断准确性。 尿糖可分为血糖正常性糖尿(肾性糖尿),血糖增高性糖尿和其他 糖尿三种形式。 糖尿病是由于胰岛
24、素分泌量绝对或相对缺乏,使体内各组织对葡萄糖的利用率减低,葡萄糖在血液内浓度过高,从尿中排出。摄入性糖尿:输入增多或输入性增多应激性糖尿:暂时性或一过性糖尿代谢性糖尿:糖尿病等内分泌性糖尿:甲状腺功能亢进等血糖增高性糖尿 血液中除了葡萄糖外,其他糖类有:乳糖、半乳糖、果 糖、戊糖、蔗糖等,这些糖经肾滤过后,也是通过肾小管重 吸收,在尿液中含量极微。如果进食过多或受遗传因素影响, 体内代谢失调后,可使血液中浓度增高,易出现相应的糖尿。乳糖尿:妊娠或哺乳期妇女半乳糖尿:先天性半乳糖血症果糖尿:原发性果糖尿、果糖不耐受症其他糖尿四、尿酮体ketone bodies, KET: -羟丁酸、乙酰乙酸、丙
25、酮方法: 试带法 (与乙酰乙酸、丙酮起显色反响) 正常阴性临床意义: 糖尿病性酮尿:酮症酸中毒 非糖尿病性酮尿:高热、饥饿、严重呕吐、 腹泻、妊娠反响等五、尿胆红素bilirubin,BIL及尿胆元urobilinogen, URO : 尿胆红素是血液中直接胆红素增高,超过肾阈值后从尿中排出。 尿胆元是直接胆红素经肠道分解后产物,重吸收入血再经尿液排出。 试带法测定尿胆红素BIL:正常阴性 尿胆元URO :正常阴性弱阳性。 临床用于黄疸的鉴别诊断 类型尿胆红素尿胆原肝细胞性黄疸阳性阳性溶血性黄疸阴性强阳性阻塞性黄疸强阳性阴性六、尿隐血BLD、尿血红蛋白 试带法检测的尿隐血是指尿液中红细胞或和红
26、细胞变形裂解后溢出的血红蛋白,因此尿BLD阳性包括血尿和血红蛋白尿,BLD报告的阳性程度往往高于显微镜检查的红细胞数。 正常为阴性。 试带法检测原理:利用血红素的过氧化酶活性,催化过氧化氢 作为电子受体使色原氧化呈色。 临床意义:各种原因的血尿 血管内溶血所致的血红蛋白尿 肌红蛋白尿也阳性七.尿亚硝酸盐nitrite,NIT 尿亚硝酸盐主要来自尿液中细菌对尿硝酸盐的复原反响,是提示菌尿的指标。 八. 尿白细胞WBC、 leucocyte,LEU,白细胞酯酶 试带法检测尿白细胞是检测粒细胞的酯酶活性,主要用于泌尿系感染的诊断。正常阴性,阳性时结合镜检.九. 尿维生素C主要用于判断试带法结果的准确
27、性,当尿维生素C强阳性时,尿隐血、胆红素、亚硝酸盐、葡萄糖可能出现假阴性结果。 十一. 其他化学成分 (一) 人绒毛膜促性腺激素hCG,是由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素。 HCG存在于孕妇的血液、尿液、羊水及初乳中。 尿液HCG浓度略低于血液浓度,且呈平行关系。 正常情况下,尿HCG 定性试验:阴性; 半定量试验:2ng/L; 妊娠期血清hCG水平12妊娠时间(周)hCG(ng/L)1233445566823(月)0.44.04.040.040.0800.080.04000.0800.08000.08.0400.01200.016000.0800.08000.0检测方
28、法 胶乳凝集抑制试验(LAIT)酶联免疫吸附法(ELISA)单克隆抗体胶体金试验放射免疫法(RIA)电化学发光免疫法(ECLIA)包括 单克隆抗体胶体金试验: 在含有均匀分布的胶体金标记的鼠抗人-hCG单克隆抗体(McAb)和无关的金标记鼠IgG试带上,将羊抗人hCG抗血清多抗线固定在试带下方为测定线,羊抗鼠IgG线固定在试带上方为阴性对照。检测时,将试带浸入被检尿液中液面低于两条抗体线后迅速取出,尿液沿试带继续上行,尿液中hCG在上行过程中与金标记的McAb 结合,当上行至羊抗人hCG多抗线时,形成金标记的McAb -尿hCG-羊抗人hCG多抗复合物(双抗体夹心),在试带上显示紫红色线条,为
29、HCG阳性。试带上无关的金标记鼠IgG随尿继续上行至羊抗鼠IgG线时,与之形成金标记抗原-羊抗鼠IgG复合物,在试带上显示紫红色线条,为阴性对照。 两条紫红色为阳性,一条紫红色为阴性临床意义 早期妊娠诊断流产诊断和监察:先兆流产,不全流产异位妊娠诊断:宫外孕妊娠滋养细胞疾病的诊断与病情观察作为肿瘤标志物时,须结合临床表现和其他检查结果综合分析包括(二)乳糜尿检查 乳糜液或淋巴液进入尿液中,尿液呈乳白色混浊,称为乳糜尿。 假设同时混有血称乳糜血尿,假设合并泌尿道感染,那么可出现乳糜脓尿。 乳糜尿形成机制: 泌尿系统淋巴管破裂:从肠道吸收的乳糜液未经正常的淋巴道引流入血而逆流至泌尿系淋巴管中,引起该处淋巴管内压力增高、曲张破裂,乳糜液流入尿液中所致; 深部淋巴管阻塞:乳糜液不能流入乳糜池,而逆流到泌尿系统淋巴管中。 乳糜尿的外观取决于尿中淋巴液含
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