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文档简介

1、第1页/共34页第2页/共34页水生耐热细菌Taq耐高温的Taq DNA聚合酶在微生物学中,将在微生物学中,将允许允许特定种类的微生特定种类的微生物生长,同时物生长,同时抑制或阻止抑制或阻止其他种类微生其他种类微生物生长的培养基。物生长的培养基。第3页/共34页第4页/共34页第5页/共34页第6页/共34页思考书思考书本本2222页页问题:问题:第一位同学第一位同学只涂布了一个平板,只涂布了一个平板,没有设置重复组,没有设置重复组,因此因此结果不具有说服力。结果不具有说服力。第二位同学第二位同学考虑到设置重复组考虑到设置重复组的问的问题,涂布了题,涂布了3 3个平板,但是,个平板,但是,其中

2、其中1 1个平板的计数结果与个平板的计数结果与另另2 2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将因此,不能简单地将3 3个平板的计数值用来求平均值。个平板的计数值用来求平均值。这个实例启示学生,这个实例启示学生,在设计实验时,一定要涂布至在设计实验时,一定要涂布至少少3 3个平板,作为重复组,才能增强实验的说服个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性力与准确性。在分析实验结果时,一定要考虑所设置在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作

3、有误,需要重新实验。误,需要重新实验。第7页/共34页第8页/共34页 )第9页/共34页第10页/共34页第11页/共34页 制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。第12页/共34页第13页/共34页思考:思考:为什么分离不同的微生物要采用不同的稀为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?第14页/共34页实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。第15页/共34页第16页/共34页实验设计步骤: 第17页/

4、共34页第18页/共34页1 1、结合对照,分析培养物中是否有杂菌污染结合对照,分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。以及选择培养基是否筛选出一些菌落。2 2、是否获得了某一稀释度下,菌落数目在是否获得了某一稀释度下,菌落数目在3030030300的平板。在这稀释度下,是否至少的平板。在这稀释度下,是否至少有两个平板的菌落数相近?有两个平板的菌落数相近?3 3、你统计的每克土壤中含有能分解尿素的细你统计的每克土壤中含有能分解尿素的细菌的菌落数是多少?与其他同学的结果接近吗?菌的菌落数是多少?与其他同学的结果接近吗?如果差异很大,可能是什么原因引起的?如果差异很大,可能是什

5、么原因引起的?对照的培养皿在培养中无菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显大于选择培养基,说明选择培养基具有选择作用。第19页/共34页第20页/共34页第21页/共34页第22页/共34页第23页/共34页例例2 2在微生物群体生长规律的测定中,种内在微生物群体生长规律的测定中,种内斗争最显著最激烈的时期是斗争最显著最激烈的时期是A A调整期调整期 B B对数期对数期 C C稳定期稳定期 DD衰亡期衰亡期解析:种内斗争是一种生态因素。种内斗争反应了种内生物解析:种内斗争是一种生态因素。种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕,营养充足的时

6、对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕,营养充足的时候,种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加,候,种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加,每个个体的生存空间越来越少,营养物质也越来越少,每个个体每个个体的生存空间越来越少,营养物质也越来越少,每个个体对生存空间和资源的争夺也越来越激烈,种内斗争就越来越激烈。对生存空间和资源的争夺也越来越激烈,种内斗争就越来越激烈。由此可知,在由此可知,在稳定期稳定期的种内斗争最激烈。在衰亡期,微生物的数的种内斗争最激烈。在衰亡期,微生物的数目已经开始减少,目已经开始减少,pHpH已经极度不适于微生物的生存,次级代谢产已经极度不适于

7、微生物的生存,次级代谢产物积累到很高的程度,这时的微生物的生存斗争主要是与无机环物积累到很高的程度,这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。境的斗争。答案:答案:C C第24页/共34页3.3.使用选择培养基的目的是( ) A.A.培养细菌 B.B.培养真菌 C.C.使需要的微生物大量繁殖 D.D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别4.4.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )( ) A.CO A.CO2 2和N N2 2 B. B.葡萄糖和NHNH3 3 C.COC.CO2 2和尿素 D.D.葡萄糖和尿素C CD D第25页/共34页5.5.下列说法不正确的是( )

8、A.A.科学家从70708080度热泉中分离到耐高温的TaqDNATaqDNA聚合酶 B.B.统计某一稀释度的5 5个平板的菌落数依次为M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5,以M3M3作为该样品菌落数的估计值 C.C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度 D.D.同其他生物环境相比,土壤中的微生物数量最大,种类最多。6.6.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌,常在培养基中加入() A.A.较多的氮源物质 B.B.较多的碳源物质 C.C.青霉素类药物 D.D.高浓度食盐B BC C第26页/共34页利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶的

9、常用菌种分别是( )A酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 B酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌 C酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌 D黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌C C第27页/共34页 测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释,其原因是() A细菌个体小,真菌个体大 B细菌易稀释,真菌不易稀释 C细菌在土壤中数量比真菌多 D随机的,没有原因C第28页/共34页 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是() A未接种的选择培养基 B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C接种了的牛肉膏蛋白胨培养

10、基 D接种了的选择培养基C选C。将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,应选牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的是单一变量原则,所以与选择培养基一样接种、培养。第29页/共34页 分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是() 加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐 A B C DC土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶,将尿素分解生成氨,利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长;分离微生物要用固体培养基;土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物,需要加葡萄糖作为碳源。第30页

11、/共34页根据实验原理和材料用具,设计实验确定细菌质粒的抗根据实验原理和材料用具,设计实验确定细菌质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素的类别。菌素基因所抗的抗菌素的类别。实验原理:作为运载体的质粒带有标记基因,这一标记实验原理:作为运载体的质粒带有标记基因,这一标记基因是抗菌素抗性基因,即有抗性基因的质粒可用做运基因是抗菌素抗性基因,即有抗性基因的质粒可用做运载体。载体。材料用具:青霉素、四环素各材料用具:青霉素、四环素各1010万单位溶液、菌种试管、万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、无菌水、恒温箱。性注射器

12、、无菌水、恒温箱。方法步骤:方法步骤:第一步:分组。第一步:分组。_,用三只注射器分别向用三只注射器分别向3 3个培养基中注入个培养基中注入1 mL1 mL无菌水无菌水_、_,并使之均匀分布在整个培,并使之均匀分布在整个培养基表面。养基表面。第二步:接种。将接种环在第二步:接种。将接种环在_,_接接种于三个培养基。种于三个培养基。第三步:培养。将第三步:培养。将_。答案:方法步骤:答案:方法步骤:第一步:取三个含培养基的培养皿,分别编号为第一步:取三个含培养基的培养皿,分别编号为1 1、2 2、3 3青霉素液四环素液青霉素液四环素液第二步:酒精灯上灼烧并在酒精灯旁取菌种第二步:酒精灯上灼烧并在酒精灯旁取菌种第三步:接种后的培养基放在第三步:接种后的培养基放在37 37 的恒温箱中培养的恒温箱中培养2424小时小时预期结果及结论:预期结果及结论:第31页/共

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