给学生-综合实验-罗望子多糖的提取-wyy

1、罗望子多糖的提取一、实验目的一、实验目的掌握用有机酸萃取法或热水抽提法提取罗望子胶的原理及其方法； 了解多糖沉降的原理、基本操作及其应用。 二、实验原理二、实验原理罗望子又称酸角、酸豆, 为高大的常绿乔木,主要分布在我国云南、海南、广西、广东、福建等省区, 以及印度、孟加拉、缅甸、老挝等国, 我国罗望子资源最丰富的地区是云南省的南部、西南部和西部地区。罗望子多糖( Tamarind seed polysaccharide, 简称TSP), 又称为罗望子胶( Tamarind gum ), 它是从豆科罗望子属植物罗望子(Tamarindus indica ) 的种子中提取出来的一种带浅棕色的灰白

2、粉末。据报道, 在罗望子种子中, 非纤维碳水化合物含量为65% 73 %，蛋白质含量15% 20%，脂肪含量为6% 8%，纤维为3% 5% , 灰分为2.5% 3.2%。由此可以看出, 在罗望子种子中, 绝大多数为非纤维碳水化合物, 即多糖类物质, 所以, 它的利用价值极高。目前罗望子多糖的提取方法主要有两种目前罗望子多糖的提取方法主要有两种: 一种是热水抽提法; 另一种是有机酸萃法！实验方案一：热水抽提法工艺流程：工艺流程：罗望子种子罗望子种子去皮、粉碎去皮、粉碎三、实验仪器与药品三、实验仪器与药品 药品：药品： 罗望子种子，蒸馏水，异丙醇或乙醇罗望子种子，蒸馏水，异丙醇或乙醇仪器：仪器：天

3、平，烘箱，粉碎机，烧杯天平，烘箱，粉碎机，烧杯(锥形瓶锥形瓶)，玻璃棒，玻璃棒，电热套，温度计，离心设备，抽滤装置，恒温干燥箱电热套，温度计，离心设备，抽滤装置，恒温干燥箱1. 罗望子种仁粉的制备罗望子种仁粉的制备:(1) 将将罗望子罗望子种子直接放入恒温干燥箱中种子直接放入恒温干燥箱中, 在在140150 下烘下烘67 h, 有烤松仁香味时取出有烤松仁香味时取出, 称其量。轻敲罗望子种子仁称其量。轻敲罗望子种子仁, 去去壳壳, 得白色或米黄色的胚乳得白色或米黄色的胚乳, 称量。去壳的罗望子种子仁用粉称量。去壳的罗望子种子仁用粉碎机粉碎碎机粉碎, 过过6080目筛目筛, 备用；备用；(2) 将

4、罗望子种子用清水按质量比将罗望子种子用清水按质量比1:2 浸泡浸泡24 h后，沥干水分，后，沥干水分，烘干、冷却、剥除种皮、粉碎机粉碎，然后过烘干、冷却、剥除种皮、粉碎机粉碎，然后过6080 目筛目筛, 备用。备用。四、实验步骤四、实验步骤2. 提胶：提胶：称取称取5 g的罗望子种子仁粉的罗望子种子仁粉, 按按1:30 的质量比放入的质量比放入90 的热水中的热水中, 搅拌下保持恒温搅拌下保持恒温50 min。静置。静置24 h, 分层分层, 离心分离心分离离, 压滤；压滤；3. 沉降：沉降：在胶液中加入同体积的异丙醇在胶液中加入同体积的异丙醇(乙醇乙醇), 搅拌后静置搅拌后静置, 将沉淀物放

5、入醇中洗涤将沉淀物放入醇中洗涤23 次次, 轻压沉淀物轻压沉淀物, 去除溶剂；去除溶剂；4. 干燥：干燥：将沉淀物放入恒温干燥箱中在将沉淀物放入恒温干燥箱中在40 50 下干燥下干燥24 h 以上；以上；5. 粉碎：粉碎：将干燥的沉淀物放入搅拌机中粉碎将干燥的沉淀物放入搅拌机中粉碎, 过过100 目筛目筛, 得得到罗望子多糖粉末。到罗望子多糖粉末。实验方案二：有机酸萃取法工艺流程：工艺流程： 试剂：试剂：罗望子种仁罗望子种仁，柠檬酸，柠檬酸， NaOH 稀溶液，稀溶液， 30% 过氧化氢或少量过氧化氢或少量NaHCO3溶液；溶液；仪器：仪器：天平，烘箱，粉碎机，烧杯天平，烘箱，粉碎机，烧杯(锥

6、形瓶锥形瓶)，玻璃，玻璃棒，电热套，温度计，离心设备，抽滤装置，恒温棒，电热套，温度计，离心设备，抽滤装置，恒温干燥箱，干燥箱，pH试纸试纸(或或pH 计计)。三、实验仪器与药品三、实验仪器与药品1. 罗望子种仁粉的制备罗望子种仁粉的制备:(1) 将将罗望子罗望子种子直接放入恒温干燥箱中种子直接放入恒温干燥箱中, 在在140150 下烘下烘67 h, 有烤松仁香味时取出有烤松仁香味时取出, 称其量。轻敲罗望子种子仁称其量。轻敲罗望子种子仁, 去去壳壳, 得白色或米黄色的胚乳得白色或米黄色的胚乳, 称量。去壳的罗望子种子仁用粉称量。去壳的罗望子种子仁用粉碎机粉碎碎机粉碎, 过过6080目筛目筛,

7、 备用；备用；(2) 将罗望子种子用清水按质量比将罗望子种子用清水按质量比1:2 浸泡浸泡24 h后，沥干水分，后，沥干水分，烘干、冷却、剥除种皮、粉碎机粉碎，然后过烘干、冷却、剥除种皮、粉碎机粉碎，然后过6080 目筛目筛, 备用。备用。四、实验步骤四、实验步骤2. 煮沸煮沸: 取取5 g 种仁粉，加入种仁粉，加入2540 倍的清水，充分搅拌均匀，倍的清水，充分搅拌均匀，用柠檬酸调节用柠檬酸调节pH，使水溶液的，使水溶液的pH 控制在控制在4.25.6 之间，加热之间，加热搅拌，煮沸搅拌，煮沸2030 min，得到粘稠的浆状液；，得到粘稠的浆状液；3. 静置沉降静置沉降: 在浆状液中加入原体

8、积在浆状液中加入原体积50%的热水稀释浆状液，的热水稀释浆状液，然后搅拌均匀，静置沉降然后搅拌均匀，静置沉降8 12 h，让浆状液中的蛋白质、固，让浆状液中的蛋白质、固体颗粒等杂质充分沉降；体颗粒等杂质充分沉降；4. 分离过滤分离过滤: 将上清液分离，即为罗望子胶将上清液分离，即为罗望子胶 (抽出静置沉降后上抽出静置沉降后上清液清液, 下层混悬浆状液用离心或压滤的方法分离除去沉降物下层混悬浆状液用离心或压滤的方法分离除去沉降物, 而而获滤液。合并上清液和滤液获滤液。合并上清液和滤液, 得到乳白色的浆状液得到乳白色的浆状液)；5. 浓缩浓缩: 在乳白色浆液中加入少量在乳白色浆液中加入少量NaOH

9、 稀溶液，将其稀溶液，将其pH 调至中性，然后加热浓缩至半流体状时停止，加入调至中性，然后加热浓缩至半流体状时停止，加入30%过氧过氧化氢化氢1 mL(或少量或少量NaHCO3溶液溶液)；6. 烘干粉碎烘干粉碎: 将粘稠的半流体浆状液倒入白色浅瓷盘中，将粘稠的半流体浆状液倒入白色浅瓷盘中，在在7080 的温度下进行热风干燥，得到片状罗望子多糖。的温度下进行热风干燥，得到片状罗望子多糖。最后将片状罗望子胶粉碎，即可得到灰白色或浅黄色的粉末最后将片状罗望子胶粉碎，即可得到灰白色或浅黄色的粉末状罗望子胶。状罗望子胶。五、注意事项五、注意事项 烘烤温度要控制好，不可以太高；去皮时要充分，尽量不烘烤温度要控制好，不可以太高；去皮时要充分，尽量不能含有皮。能含有皮。 提胶时要注意控制好温度，并不断搅拌，加热期间人绝对提胶时要注意控制好温度，并不断搅拌，加热期间人绝对不可离开。不可离开。 沉降后的沉淀物不能用水洗，会形成胶液堵塞滤纸，而无沉降后的沉淀物不能用水洗，会形成胶液堵塞滤纸，而无法过滤。法过滤。 加热浓缩时，注意温度的控制，并不断搅拌，加热浓缩时，注意温度的控制，并不断搅拌， 防止焦糊。防止焦糊。 六