课本实验简析

1、课本实验简析研讨、交流研讨、交流 合作、共赢合作、共赢实验一实验一 检测生物组织中的糖类、脂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质肪和蛋白质 实验材料实验材料 1做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含还原糖多含还原糖多，颜色为白色的白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组因为组织的颜色较浅，易于观察。织的颜色较浅，易于观察。） 2做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34小时（也可用蓖麻种子）。 50的酒精作用是洗去浮色. 需要显微镜.(若用待测组织样液,试管中鉴定,无需显微镜.) 3做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆富含蛋白质的黄豆或稀释的鸡蛋清或稀释的鸡蛋

2、清。比较项目斐林试剂双缩脲试剂组成溶液的浓度NaOH：0.1g/mlCuSO4：0.05 g/mlNaOH：0.1g/mlCuSO4：0.01 g/ml使用原理新配制的Cu（OH）2碱性环境下的Cu2+使用方法先把NaOH和 CuSO4等量混合，后立即使用，要加热先加入NaOH，后滴加CuSO4，CuSO4不能过量鉴定对象还原性糖蛋白质颜色反应砖红色沉淀紫色实验二实验二 用显微镜观察多种多样的用显微镜观察多种多样的细胞细胞 （1）为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？ 答：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低

3、倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。 （2）用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行？ 答: 不行。用高倍镜观察，只需微调即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。 （3）低倍镜如何转换成高倍镜? 顺序：移装片顺序：移装片转转换器换高倍镜转转换器换高倍镜调反光镜或光圈调反光镜或光圈调调细准焦螺旋细准焦螺旋 注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细注：换高倍物镜时只能移动转换器，换镜后，只准调节细准焦和反光镜（或光圈）。准焦和反光镜（或光圈）。实验三：通过模拟实验探究膜的实验三：通过模拟实验探究膜的透性透性 漏斗管内的液面为什么会升高？平衡时有没有水分子的运漏

4、斗管内的液面为什么会升高？平衡时有没有水分子的运动动?平衡时哪一部分的浓度高平衡时哪一部分的浓度高?答：由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量答：由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量，使得管内液面升高多于从长颈漏斗渗出的水分子数量，使得管内液面升高; 有有; 漏斗内漏斗内. 2如果用一层纱布代替玻璃纸，漏斗管内的液面还会升如果用一层纱布代替玻璃纸，漏斗管内的液面还会升高吗？高吗？答：用纱布替代玻璃纸时，因纱布的孔隙很大，蔗糖分子也答：用纱布替代玻璃纸时，因纱布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不会升高。可以自由通透，因而液面不会升高

5、。 3如果烧杯中不是清水，而是同样浓度的蔗糖溶液，结如果烧杯中不是清水，而是同样浓度的蔗糖溶液，结果会怎样？果会怎样？答：半透膜两侧溶液的浓度相等时，单位时间内透过玻璃纸答：半透膜两侧溶液的浓度相等时，单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出的水分子数量，液面进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出的水分子数量，液面也不会升高。也不会升高。实验四实验四: 观察植物细胞的质壁分离和观察植物细胞的质壁分离和复原复原 实验材料：实验材料： 紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫因为液泡呈紫色，易于观察。色，易于观察。也可用水绵代替。理论上成熟成熟植物细胞都可以,液泡无色的可染色或适当调暗视野调暗视

6、野。若用洋葱鳞片叶的内表皮，则可用胭脂红染色。 0.3g/ml的蔗糖溶的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。实验四实验四: 观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原 1.如果将表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。 2当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？答：不会。因为红细胞不具细胞壁。只有活的不会。因为红细胞不具细胞壁。只有活的/成熟的植物细成熟的植物细胞可发生胞可发生. 3. 如何操作使盖玻片下的细胞浸没在0.3g/ml的蔗糖溶的蔗糖溶

7、液中?答：在盖玻片的一侧滴0.3g/ml的蔗糖溶的蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引,重复几次重复几次. 4. 本实验要不要用显微镜?要用到高倍镜吗?答：要用显微镜,但只需要低倍镜只需要低倍镜即可.实验四实验四: 观察植物细胞的质壁分离和复原观察植物细胞的质壁分离和复原 5.如果用蔗糖的质量浓度为0.5/mL的溶液再做此实验，细胞发生质壁分离后，为什么不再复原？答：细胞过度失水而死亡，原生质层失去弹性 6.如果以水绵作为实验材料进行实验，又会出现什么现象？你有何依据？答：水绵是水生植物，细胞液浓度更低，细胞质壁分离现象更明显。 7.如果用0.18mol/L的KNO3溶液做此实验，会观察到什么现象？产

8、生这一现象的生理基础是什么？答：会发生质壁自动复原现象。K离子和NO3离子通过主动运输进入细胞，细胞液浓度升高，细胞吸水，质壁复原。实验五实验五 探究影响酶活性的因素探究影响酶活性的因素 1.该实验最后结果的检测用碘液该实验最后结果的检测用碘液,能否用斐林试剂能否用斐林试剂?为什么为什么?答答:不能用不能用,因为斐林试剂的使用需要水浴加热因为斐林试剂的使用需要水浴加热,而本实验是探而本实验是探究温度对酶活性的影响究温度对酶活性的影响. 2.若用淀粉酶若用淀粉酶,蔗糖酶和淀粉来验证酶的专一性蔗糖酶和淀粉来验证酶的专一性,用什么检用什么检测试剂测试剂?答答:用斐林试剂用斐林试剂.不能用碘液的原因是

9、它只能检测淀粉是否被不能用碘液的原因是它只能检测淀粉是否被水解水解,不能检测蔗糖是否被水解不能检测蔗糖是否被水解. 3.为什么不能只用不同温度处理淀粉或酶溶液为什么不能只用不同温度处理淀粉或酶溶液 答：防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度答：防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。验结果。 实验六实验六:叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离 1滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？答：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色答：滤纸条上的滤液细线如

10、触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验会失败。素就会溶解在层析液中，实验会失败。 2提取和分离叶绿体色素的关键是什么？答：提取叶绿体色素的关键是：叶片要新鲜、浓绿；研磨要迅速、充分；滤液收集后，要及时用棉塞将试管口滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。塞紧，以免滤液挥发。分离叶绿体色素的关键是：一是滤液细线要细且直，而且要重复划几次；二是层析液不能没及滤液线。 3.实验结果怎样?答:如图 色素带的宽度代表色素的含量色素带的宽度代表色素的含量; 色素带的扩散距离代表色素的溶解度色素带的扩散距离代表色素的溶解度, 溶解度最大的是胡萝卜素溶解度最大的是胡萝卜素,最小的是

11、叶绿素最小的是叶绿素b.胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色）实验六实验六:叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离 4.若色素带出现异常情况异常情况分析原因： (1)色浅原因： 提取过程：老叶，色素少 未加SiO2，研磨不充分 无水乙醇加入过多 用滤纸过滤 放置时间过长 未及时用棉塞将试管口塞紧或未避光保存 分离过程：未重复画滤液细线，积累色素过少层析液触及滤液线未加培养皿盖 （2）色素带重叠原因：滤液线画得过粗、滤液细线画得过高、滤纸不干燥、滤纸下端未剪去两角 （3）色素带残缺不全原因：叶片枯黄、层析液波及滤液线、未加CaCO3。实验七实验七: 探究酵母菌

12、的呼吸方式探究酵母菌的呼吸方式需要注意的几个问题需要注意的几个问题1）各装置的连通管尽量不漏气）各装置的连通管尽量不漏气 2）检测酒精生成时，配药后要马上检）检测酒精生成时，配药后要马上检测测3）由于装置简单，不可能形成完全的有氧或无氧条件，因此不排除装）由于装置简单，不可能形成完全的有氧或无氧条件，因此不排除装置置1中有酒精生成。检测酒精生成，装置中有酒精生成。检测酒精生成，装置1可能出现少许的灰绿色可能出现少许的灰绿色4）最好设置对照装置：）最好设置对照装置： 同装置同装置1或装置或装置2，但要将酵母液换成葡萄糖液，但要将酵母液换成葡萄糖液。 5)装置装置1间歇性通气目的是什么间歇性通气目

13、的是什么?答答: 为了保证为了保证NaOH能充分吸收无菌空气中的能充分吸收无菌空气中的CO2,又能保证酵母菌充分又能保证酵母菌充分进行有氧呼吸进行有氧呼吸6)装置装置2锥形瓶先封口放置一段时间再连通澄清石灰水锥形瓶先封口放置一段时间再连通澄清石灰水,为什么为什么?答答: 让酵母菌充分消耗掉瓶中的让酵母菌充分消耗掉瓶中的O2,排除酵母菌因有氧呼吸产生的排除酵母菌因有氧呼吸产生的CO2的的干扰干扰实验八实验八 观察细胞的有丝分裂观察细胞的有丝分裂 （1）为什么洋葱根尖培养至5cm，但制作装片时仅切取23mm的根尖？ （2）为什么取材时间通常选择上午10时至下午2时？试分析影响细胞分裂的可能生态因素

14、。 （3）为什么要用盐酸对根尖进行解离？解离时间不足会怎样影响实验观察？ （4）解离后为什么要用清水进行漂洗？不漂洗或漂洗时间不足会怎样影响实验观察？ （5）为什么要用龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）进行染色？主要染色结构是什么？ （6）制装片时为什么要把根尖弄碎和压片？ （7）视野中哪个时期的细胞数目最多？为什么？ （8）视野中观察到的是活细胞还是死细胞？实验九实验九 观察细胞的减数分裂观察细胞的减数分裂 观察减数分裂的材料最好是雄性个体雄性个体的精母细胞。不可用哺乳动物的卵巢观察的原因是：一是细胞少，二是看不全完整的分裂时期。实验十实验十 调查常见的人类遗传病调查常见的人类遗传病 调查时，最好选

15、取群体中发病率较高的单调查时，最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病，如红绿色盲、白化病、高度基因遗传病，如红绿色盲、白化病、高度近视（近视（600度以上）等度以上）等。 调查调查发病率发病率应在应在足够大足够大的群体中的群体中随机随机调查调查 调查调查遗传方式遗传方式应在患者家系中逐个应在患者家系中逐个调查 实验十一探究植物生长调节剂对扦插枝实验十一探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用条生根的作用 设置生长素类似物的浓度梯度设置生长素类似物的浓度梯度：用容量瓶将母液分别配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5 mg/mL的溶液，分别放入小磨口瓶，及时贴上相应标签。再设置一个蒸

16、馏水再设置一个蒸馏水的空白对照组的空白对照组. 选择插条：以以1年生苗木为最好（年生苗木为最好（1年或年或2年生枝条形成层年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活）。细胞分裂能力强、发育快、易成活）。 处理插条：枝条的形态学上端为平面，下端要削成斜面，下端要削成斜面，这样在扦插后可增加吸收水分的面积，促进成活。这样在扦插后可增加吸收水分的面积，促进成活。每一枝条留3-4个芽（不可太多）个芽（不可太多），所选枝条的芽数尽量一样多一样多。 误差分析误差分析：（1）不生根：生长素浓度过高、枝条倒插、）不生根：生长素浓度过高、枝条倒插、 枝条上没有芽枝条上没有芽 （2）都能生出不定根：芽过多，产生

17、的生长素就多。）都能生出不定根：芽过多，产生的生长素就多。实验十二实验十二: 探究培养液中酵母种群数量探究培养液中酵母种群数量的变化的变化 1.怎样进行酵母菌的计数? 答: 1)方法: 抽样检测抽样检测. 2)加样品:先将盖玻片血球计数先将盖玻片血球计数板的计数室上板的计数室上，然后用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，然后用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，多余培养液滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，多余培养液可用滤纸吸去可用滤纸吸去； 3)计数:稍待片刻（约稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后计数室底部后，将计数板放在

18、载物台的中央，先在低低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高高倍镜观察、计数并记录。 4)公式:实验十二实验十二: 探究培养液中酵母种群数量探究培养液中酵母种群数量的变化的变化 2.从试管中吸出培养液计数之前,应怎么做?为什么?答:要将试管轻轻震荡几次要将试管轻轻震荡几次,目的是使培养液中酵母分布均匀目的是使培养液中酵母分布均匀,减少误差。若未曾摇匀，吸管在上部取样，则数据偏小，减少误差。若未曾摇匀，吸管在上部取样，则数据偏小，在下部取样，则数据偏大。在下部取样，则数据偏大。 3.本实验要不要设置对照?为使实验结果更准确,该怎么办?答答:不需设对照不需设对照,自身前后形成对照自身前后形成对照.需

19、要做重复实验需要做重复实验. 4.记录结果时,要不要计数起始数目?每天计数时间一样吗?答答:要计数起始数目要计数起始数目. 每天计数时间要固定每天计数时间要固定. 5.如果一个方格内酵母菌过多,怎么办?计数时,应数一个小方格内的哪些酵母菌?答答:应适当稀释。应适当稀释。 计数小方格内和左、上边及其顶角的酵计数小方格内和左、上边及其顶角的酵母菌母菌.实验十三实验十三 果酒、果醋和腐乳的制作果酒、果醋和腐乳的制作 果酒、果醋和腐乳的制作过程中有哪些措施能防止杂菌污染?果酒果醋发酵果酒果醋发酵- -装置要清洗、用装置要清洗、用70的酒精消毒或用的酒精消毒或用洗洁精洗涤洗洁精洗涤;葡萄要先冲洗后去枝梗

20、葡萄要先冲洗后去枝梗;简易装置果酒发酵时简易装置果酒发酵时只每隔只每隔12h拧松而非拧开一次拧松而非拧开一次,果醋发酵时打开瓶塞要盖上果醋发酵时打开瓶塞要盖上一层纱布一层纱布, 另一装置排气管要长而弯曲另一装置排气管要长而弯曲(若较短若较短,则需要用夹则需要用夹子夹住子夹住,然后定期排气然后定期排气),而充气管要用夹子夹住而充气管要用夹子夹住,果醋发酵时果醋发酵时通入无菌空气通入无菌空气;果酒发酵时果酒发酵时,在缺氧、呈酸性的发酵液中酵在缺氧、呈酸性的发酵液中酵母菌可以生长母菌可以生长; 腐乳制作腐乳制作-玻璃瓶洗净后用沸水消毒玻璃瓶洗净后用沸水消毒;装瓶时要迅速小心装瓶时要迅速小心,封瓶时封

21、瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的火焰最好将瓶口通过酒精灯的火焰,防止瓶口被污染防止瓶口被污染;加加盐、酒精和香辛料都有防腐杀菌作用盐、酒精和香辛料都有防腐杀菌作用;加盐时要逐层加盐加盐时要逐层加盐,随层数的加高而增加盐量随层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面要铺厚一些接近瓶口表面要铺厚一些.实验十三实验十三 果酒、果醋和腐乳的制作果酒、果醋和腐乳的制作 果酒选用的微生物主要来源于何处？冲洗的要求是什么？答:酵母菌来自葡萄皮;不能反复冲洗，冲洗后再去枝梗，防止污染。 充气口、排气口和出料口分别有哪些作用？答:充气口-果醋发酵时通入空气 排气口-排出CO2 出料口-用于取样检测 如何检验酒精的产生？试设

22、计实验。答:两支试管1号2号,1号加2ml发酵液,2号加2ml白酒(对照),然后1号2号均滴入3滴硫酸,混匀后再滴加重铬酸钾3滴,观察颜色变化. 果酒、果醋和腐乳的制作所涉及的酶从分布看有什么不同?答: 果酒、果醋发酵相关的酶是胞内酶,而腐乳制作涉及的是蛋白酶脂肪酶等以大分子为底物的酶,故为胞外酶.实验十四实验十四:酵母细胞的固定化酵母细胞的固定化 固定化酵母细胞固定化酵母细胞,酵母细胞活化用蒸馏水还是清水酵母细胞活化用蒸馏水还是清水?答答:蒸馏水蒸馏水,可排除杂菌和其他杂质的污染可排除杂菌和其他杂质的污染. 实验的关键步骤是什么实验的关键步骤是什么?要注意什么要注意什么?答答: 关键步骤是配

23、制海藻酸钠溶液关键步骤是配制海藻酸钠溶液.注意点：注意点： (1)要边加热边搅拌要边加热边搅拌,用小火或间断加热用小火或间断加热,最后定容到最后定容到10ml. (2)浓度不能过高或过低浓度不能过高或过低,过高过高-不易形成凝胶珠不易形成凝胶珠,过过低低-形成的凝胶珠包埋的酵母细胞少形成的凝胶珠包埋的酵母细胞少, 凝胶珠颜凝胶珠颜色过浅，影响实验结果色过浅，影响实验结果. (3)要等冷却至室温才可加入活化的酵母菌要等冷却至室温才可加入活化的酵母菌. 实验十四实验十四:酵母细胞的固定化酵母细胞的固定化 CaCl2的作用是什么？的作用是什么？答答: CaCl2溶液中形成稳定的凝胶珠溶液中形成稳定的

24、凝胶珠,凝胶珠在凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡溶液中浸泡30min,是为了形成稳定的结构是为了形成稳定的结构. 固定化酵母细胞时固定化酵母细胞时,应注意哪些应注意哪些?答答:要以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到要以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中溶液中. 固定好的凝胶珠可以直接使用吗固定好的凝胶珠可以直接使用吗?答答:不可以不可以,要用蒸馏水冲洗要用蒸馏水冲洗2-3次次. 为什么选择配制为什么选择配制10%的葡萄糖溶液，若浓度较高的葡萄糖溶液，若浓度较高对实验有什么影响？对实验有什么影响？答答: 10%是比较合适的是比较合适的,若过高若过高,会使酵母细胞失水过会使酵母

25、细胞失水过多而死亡多而死亡.实验十五实验十五 DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 提取DNA可利用DNA的哪些特性?答答: DNA在在NaCl溶液中的溶解性溶液中的溶解性, DNA不溶于不溶于95的冷酒精的冷酒精; DNA对蛋白酶、高温对蛋白酶、高温(60-75)和洗涤剂和洗涤剂(破坏细胞膜破坏细胞膜)的耐的耐受性受性. 提取DNA可用哪些材料?答答:理论上含提取理论上含提取DNA的材料均可的材料均可,动物植物微生物均可动物植物微生物均可,但哺但哺乳动物成熟红细胞不行乳动物成熟红细胞不行,而鸡的红细胞比较理想而鸡的红细胞比较理想,注意加柠注意加柠檬酸钠檬酸钠. 实验步骤怎样?答: 选材破碎细胞

26、，释放DNA(鸡血用蒸馏水+搅拌+过滤；洋葱用洗涤剂洗涤剂(瓦解细胞膜瓦解细胞膜)和食盐(溶解DNA)+研磨+搅拌+过滤)溶解DNA(用2mol/L的NaCl溶液)析出DNA(加蒸馏水稀释至0.14mol/L)再溶解(2mol/L的NaCl溶液)和提纯(95的冷酒精)实验十五实验十五 DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 实验过程中的搅拌要注意什么?过滤要注意什么?答答:搅拌搅拌-沿一个方向沿一个方向,第一次快速第一次快速,其余的都是轻缓其余的都是轻缓,以免加以免加剧剧DNA分子的断裂分子的断裂. 过滤过滤-用纱布用纱布,不能用滤纸不能用滤纸. 鉴定DNA时怎么设置对照?答答:取取1号号2号两支

27、试管号两支试管,均加入均加入2mol/L的的NaCl溶液溶液5ml,1号加号加DNA,2号不加号不加,然后都加入然后都加入4ml的二苯胺试剂的二苯胺试剂,并沸水浴并沸水浴5min,观察比较结果是否变蓝观察比较结果是否变蓝. 从细胞中提取DNA与提取蛋白质相比,哪个更容易?为什么?答答: 提取提取DNA更容易更容易,因为因为DNA相对较稳定相对较稳定,而蛋白质对温度、而蛋白质对温度、PH、盐度等较敏感、盐度等较敏感,易失活易失活,且空间结构多种多样且空间结构多种多样,理化理化性质各不相同性质各不相同,使提取蛋白质没有一种统一的方法使提取蛋白质没有一种统一的方法,特定的特定的蛋白质提取需特定的方法

28、蛋白质提取需特定的方法.实验十六实验十六:血红蛋白的提取与分离血红蛋白的提取与分离 分离蛋白质的依据有哪些?答:分子的形状和大小,所带电荷的性质和多少,溶解度,吸附性质和对其他分子的亲和力等. 电泳的依据什么?答答:电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁使带电分子产生不同的迁移速度移速度. 电泳带电泳带只代表样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小，不代表蛋白质的肽链条数。 透析的原理是什么?答答:利用透析袋的半透性利用透析袋的半透性,让小分子杂质进入外面

29、的缓冲液中让小分子杂质进入外面的缓冲液中,而大分子的蛋白质留在透析袋内而大分子的蛋白质留在透析袋内.注意只能出去小分子杂注意只能出去小分子杂质质,大分子如大分子如DNA通过透析无法除掉通过透析无法除掉,可以依靠电泳等其他可以依靠电泳等其他方法方法. 提高透析效果的措施有哪些？答：增大透析液（缓冲液，维持答：增大透析液（缓冲液，维持pH的相对稳定）的量、更的相对稳定）的量、更换缓冲液。换缓冲液。消毒与灭菌消毒与灭菌消毒：指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌：指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。灭菌与消毒技术是

30、微生物有关工作中最普灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。通也是最重要的技术。微生物培养技术微生物培养技术消毒的方法：消毒的方法：1、煮沸消毒法、煮沸消毒法:100煮沸煮沸5-6min2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 下煮下煮30min或或 80 下煮下煮15min3、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法:用用75%酒精、新洁尔酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源氯气消毒水源4、紫外线或化学药物消毒、紫外线或化学药物消毒灭菌的方法：灭菌的方法：1、灼烧灭菌、灼烧灭菌2、干热灭菌：、干热灭菌：160-170 下加热下加热1-2h。3、高压蒸汽灭菌：、高压

31、蒸汽灭菌：100kPa、121 下维持下维持15-30min.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 如何倒平板？ 1. 1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到50 50 左右左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？基的温度？ 答：答：可以用手触摸盛有培养基的锥形可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。时，就可以进行倒平板了。2.2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微答：通过灼

32、烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。生物污染培养基。3.3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4.4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培

33、养基，造成污染。防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。培养微生物。纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌接种方法有：接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法平板划线法: :通过接种环在琼脂固体培通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作养基表面连续画线的操作, ,将聚集的菌钟将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面逐步稀释分散到培养基的表面. . 在数次画线后在数次画线后, ,可以分离到由一个细胞可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体, ,这就这就是菌落是菌落. . 1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线