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文档简介

1、细胞克隆构成率实验黄波南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心目的 1.了解辐射对细胞增殖的影响了解辐射对细胞增殖的影响 2.掌握细胞培育的根本技术掌握细胞培育的根本技术 3.掌握辐照细胞的方法，细胞克隆技术掌握辐照细胞的方法，细胞克隆技术步骤 1.1.取对数生长期的细胞，用取对数生长期的细胞，用PBSPBS洗干净后胰洗干净后胰酶消化，离心。酶消化，离心。 2.2.采用血球计数板计数细胞采用血球计数板计数细胞 按一定细胞数量照射按一定细胞数量照射0 0、0.50.5、1Gy1Gy组接种组接种300300个个/ /皿，照射皿，照射2Gy2Gy接种接种60060

2、0个个/ /皿，照射皿，照射4Gy4Gy组接种组接种2 2103103个个/ /皿，照射皿，照射8Gy8Gy组接种组接种1 1104104接种于接种于60 mm60 mm培育皿，每个剂量组培育皿，每个剂量组3 3个皿个皿 照射不同剂量的照射不同剂量的60Co 60Co 射线射线细胞贴壁后分别用细胞贴壁后分别用60Co 60Co 射线照射，置射线照射，置于于37 CO237 CO2孵箱培育孵箱培育1010天；天；PBSPBS洗洗2 2次，次，7575乙醇固定乙醇固定3060min3060min；自然晾干后自然晾干后GiemsaGiemsa染色染色1h1h左右，计数细胞左右，计数细胞克隆数克隆数( (计数计数5050个细胞的单克隆个细胞的单克隆) )；

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