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文档简介
DNA聚合酶聚合酶mRNAcDNA杂化双链杂化双链PCR扩增一步法一步法ComponentsVolume(l)RNA8(1g)5xR.T.buffer4dNTPs(10mmol/L)2Primer1Rnasin(50U/l)0.4AMV-RT(10U/l)1.0DEPC-H2O3.6Total20两步法两步法ComponentsVolume(lR.T.Product5.010 xPCR buffer2.5MgCl2(25mmol/L)2.5Primer11Primer21Taq DNA polymerase1ddH2O12Total25cDNA PCR扩增扩增 cDNA第一链合成反应第一链合成反应 过程中过程中cDNA第一第一链合成反应所用的枪头、链合成反应所用的枪头、枪头盒、枪头盒、PCR管等塑料制管等塑料制品均提前用氯仿进行处理，品均提前用氯仿进行处理，高压灭菌后使用。玻璃制高压灭菌后使用。玻璃制品在品在180干烤干烤6-8小时。小时。加样过程在超净台内进行，加样过程在超净台内进行，需戴手套与口罩。需戴手套与口罩。 cDNA PCR扩增的准备工作同普扩增的准备工作同普通通PCR反应。反应。 琼脂糖凝胶
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