综合项目一不同蔬菜水果中基本营养成分分析报告

1、综合项目一不同蔬菜水果中基本营养成分分析实验一 总糖含量的测定（3,5-二硝基水酸法）、实验目的1、掌握总糖的测定原理。2、学习用比色法测定还原糖的方法。、实验原理三、实验试剂1、2mol/L氢氧化钠溶液：称取4g氢氧化钠，加少量的蒸馏水溶解后，定 容至50mL2、 3,5-二硝基水酸试剂：称取0.325g 3,5-二硝基水酸溶于15mL热蒸馏水 中，溶解后移入50ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液16.25mL,再加入 2.25ml丙三醇，摇匀，冷却后定容至 50mL3、2mg/mL葡萄糖标准溶液：称取0.04g葡萄糖，加少量的蒸馏水溶解后， 定容至20mL4、6mol/L盐酸：取2

2、5mL浓盐酸用蒸馏水稀释至50mL5、6mol/L氢氧化钠：称取12g氢氧化钠，加少量的蒸馏水溶解后，定容至50mL四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的制作取6支试管，按下表加入2mg/mL葡萄糖标准溶液和蒸馏水：AvV 口吕号2mg/mL葡萄糖标准溶液/mL蒸馏水/mL葡萄糖浓度mg/mLOD540101020.20.80.430.40.60.840.60.41.250.80.21.66102在上述试管中分别加入 3,5-二硝基水酸试剂2mL摇匀后于沸水浴中加入 2min进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水9mL摇匀，在540nm波长处测定光吸收值。以葡萄糖含量(mg/mL为横坐标，光

3、吸收值为纵坐标， 绘制葡萄糖标准曲线，得出回归方程。2、总糖的提取称取1g实验材料(如新鲜果蔬)，充分研磨后，放在锥形瓶中，加入6mol/L 盐酸10mL蒸馏水15mL在沸水浴中加热30min。水解完毕后，冷却至室温后， 加入8mL 6mol/L氢氧化钠，最终用蒸馏水定容至 50mL此为总糖水解液，用于 总糖测定。3、总糖含量的测定取4支试管，按下表加入不同溶液：AvV 口吕号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基 水酸试剂/mLOD5401102201230124012加完试剂后，摇匀后于沸水浴中加入 2min进行显色，取出后用流动水迅速 冷却，各加入蒸馏水9mL摇匀，在540nm波长处

4、测定光吸收值。测定后，取样 品的光吸收值平均值在标准曲线上查出相应的糖含量( mg/mL。4、计算总糖的百分含量总糖=(Cx V / m x 1000)x 稀释倍数x 0.9 x 100%式中,C为总糖提取液的浓度 mg/mL V为总糖提取液的总体积mL m为样品 质量g五、实验结果1、葡萄糖标准曲线的绘制(1)光吸收值测得结果AvV 口吕号2mg/mL葡萄糖蒸馏水/mL葡萄糖浓度OD540标准溶液/mLmg/mL101020.20.80.430.40.60.840.60.41.250.80.21.66102(2)葡萄糖标准曲线图:(3)回归方程为：2、样品总糖含量的测定(1) 材料总糖含量的

5、测定AvV 口吕号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基 水酸试剂/mLOD5401102201230124012样品的光吸收值平均值为 。根据标准曲线的回归方程计算得出总糖浓度为 请说明具体计算过程：从而得出样品总糖的百分含量为。请说明具 体计算过程:AvV 口吕号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基 水酸试剂/mLOD5401102201230124012样品的光吸收值平均值为 。根据标准曲线的回归方程计算得出总糖浓度为 请说明具体计算过程：从而得出样品总糖的百分含量为。请说明具体计算过程：(3)材料总糖含量的测定AvV 口吕号蒸馏水/mL总糖水解液/mL3,5-二硝基 水酸试剂

6、/mLOD5401102201230124012样品的光吸收值平均值为 。根据标准曲线的回归方程计算得出总糖浓度为 请说明具体计算过程：体计算过程：3、对比分析不同样品总糖含量实验二 蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法）、实验目的1、学习用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的基本原理与方法2、了解考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的优缺点。、实验原理三、实验试剂1、0.15mol/L 氯化钠溶液：称取 0.2633g 氯化钠，加少量的蒸馏水溶解后， 定容至 30mL。2、0.1mg/mL牛血清白蛋白标准溶液：（ 1 ）母液：称取 0.01g 牛血清白蛋白溶于 10mL 0.15mol/L 氯化钠溶液中， 配成浓度

7、为1mg/mL的溶液。（2）标准液：取母液1mL用0.15mol/L 氯化钠溶液定容至10mL配成 0.1mg/mL的牛血清白蛋白标准溶液。3、考马斯亮蓝G-250试剂：称取0.005g考马斯亮蓝G-250溶于2.5mL 95%乙醇，加蒸馏水40mL加5mL 85%磷酸，最后加蒸馏水定容至 50mL四、实验步骤1、绘制标准曲线取6支试管，按下表加入各种试剂。试剂加完后混匀，室温静置 3min,以1 号管为空白调零，在595nm处测定其吸光值。以蛋白质含量（mg/mL为横坐标， 对应的吸光值为纵坐标，绘制蛋白质含量标准曲线，得出回归方程。试剂/mLAvV 口吕号1234560.1mg/mL牛血清

8、白蛋白标准溶液00.20.40.60.81.00.15mol/L氯化钠溶液1.00.80.60.40.20考马斯亮蓝G-250试剂555555蛋白质浓度（ug/mL）020406080100OD952、总蛋白的提取称取1g实验材料（如新鲜果蔬），加5mL蒸馏水研磨，过滤后将滤液用蒸馏 水定容至10mL3、总蛋白测定取3支试管，分别加O.ImL未知浓度的蛋白质样品液，加0.9mL 0.15mol/L 氯化钠溶液，再加入5mL考马斯亮蓝G-250试剂，摇匀，室温静置3min,以1 号管为空白管调零，在595nm处测其吸光值。测定后，取样品的光吸收值平均值 在标准曲线上查出相应的蛋白浓度（ug/mL

9、）。4、蛋白质含量（mg/g）蛋白质含量（mg/g） = （Cx VT） / （1000X VSX W）式中，C为蛋白质提取液的浓度ug/mL； VT为提取液总体积mL Vs为测定时 加样量mL WF为样品鲜重g。五、实验结果1、牛血清白蛋白标准曲线的绘制（1）光吸收值测得结果试剂/mLAvV 口吕号1234560.1mg/mL牛血清白蛋白标准溶液00.20.40.60.81.00.15mol/L氯化钠溶液1.00.80.60.40.20考马斯亮蓝G-250试剂555555蛋白质浓度（ug/mL）020406080100OD952）标准曲线图：（3）回归方程为：2、样品蛋白质含量的测定（ 1）

10、样品 的光吸收值分别为 、 、，其平均值为 。根据标准曲线的回归方程计算得出蛋白质浓度为 。请说明具体计算过程：从而得出样品 蛋白质的含量为 。请说明具体计算过程：（ 2）样品 的光吸收值分别为 、 、，其平均值为 。根据标准曲线的回归方程计算得出蛋白质浓度为 。请说明具体计算过程：从而得出样品 蛋白质的含量为 。请说明具体 计算过程：（ 3）样品 的光吸收值分别为 、 、，其平均值为 。根据标准曲线的回归方程计算得出蛋白质浓度为 。请说明具体计算过程：从而得出样品 蛋白质的含量为 。请说明具体计算过程：3、对比分析不同样品蛋白质含量实验三 维生素 C 含量的测定（ 2,6- 二氯酚靛酚滴定法

11、）、实验目的1、学习并掌握2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素 C的原理与方法。2、了解水果与蔬菜中维生素 C的含量情况。、实验原理三、实验试剂1、2%草酸：称取 1g 草酸，加少量的蒸馏水溶解后，定容至 50mL。2、1%草酸：称取 0.5g 草酸，加少量的蒸馏水溶解后，定容至 50mL。3、0.1mg/mL标准抗坏血酸溶液：称取0.0025g抗坏血酸溶于少量1%草酸溶 液中，最终加1%草酸定容至25mL用棕色试剂瓶保存于4C。最好临用前配制4、0.05% 2,6-二氯酚靛酚溶液：称取 0.025g 2,6-二氯酚靛酚溶于15mL含 有0.0052g碳酸氢钠的热水中，冷却后加水定容至 50mL

12、滤去不溶物，用棕色 试剂瓶保存于4C。约可保存1周。四、实验步骤1、样品的制备称取 10g 实验材料（如新鲜果蔬） ，加入 5-10mL 2%草酸，研磨成浆状，过 滤后，将滤液定容至 25mL。2、标准液滴定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置于50mL锥形瓶中，加9mL1%草酸，以0.05% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡粉色，并保持15s不褪色，即达到终点；取10mL1% 草酸作空白对照，按以上方法滴定。记录所用染料溶液的体积（mQ,计算出1mL 染料溶液所能氧化抗坏血酸的量（ mg）。3、样品滴定准备吸取样品滤液2份，每份为10mL分别放入2个锥形瓶，另取10mL1% 草酸作空白对照滴定；按

13、上面的操作滴定并记录所用染料溶液的体积（mL）。4、维生素C含量的计算取2份样品滴定所用染料体积平均值，代入下列公式中计算100g样品还原型抗坏血酸含量。维生素 C含量（mg/100g 样品）=（VA-Vb）x Cx TX 100/ （ D x W式中，VA为滴定样品所好用的染料的平均用量 mL VB为滴定空白对照所用 的染料的平均用量mL C为样品提取液的总体积 mL D为滴定时所取的样品提取 液体积mL T为1mL染料能氧化抗坏血酸质量 mg （由操作2计算出）；W为待测 样品的质量 g。五、实验结果1、标准抗坏血酸溶液滴定时， 所用染料溶液的体积为 ，从而计算出1mL染料溶液所能氧化抗坏

14、血酸的量为。2、样品维生素C含量的测定（1）样品滴定时所用染料溶液的体积分别为 和。其平均用量为。则样品维生素C含量为。请说明具体计算过程。（2）样品 滴定时所用染料溶液的体积分别为 和。其平均用量为。则样品维生素C含量为。请说明具体计算过程。（3）样品 滴定时所用染料溶液的体积分别为 和。其平均用量为。则样品维生素C含量为。请说明具体计算过程。3、对比分析不同样品维生素C含量实验四 纤维素含量的测定（比色法）、实验目的1、学习并掌握比色法测定纤维素的原理与方法2、了解水果与蔬菜中纤维素的含量情况。、实验原理、实验试剂1、60僦酸：量取30mL浓硫酸，缓慢倒入15mL蒸馏水中，最终加水定容至5

15、0mL2、浓硫酸3、2泌酮试剂：将1g蒽酮溶解于50mL乙酸乙酯中，存放在棕色试剂瓶中。4、100ug/mL纤维素标准液：（1）母液：称取25mg纤维素，放入烧杯中，将烧杯放入冰浴中，然后加冷的60%酸15-17mL，在冷的条件下消化处理 20-30min，用60佩酸定容至25mL（2）吸取母液5mL放入另一个容量瓶中，将容量瓶放入冰浴中，加蒸馏水定容至50mL四、实验步骤1、纤维素标准曲线的绘制取6支试管，按下表加入不同试剂:试剂/ mLAvV 口吕号123456100ug/ mL纤维素标准液00.40.81.21.62蒸馏水21.61.20.80.40纤维素含量ug/ mL02040608

16、0100OD20将各管摇匀后，向每管加入 0.5mL 2%蒽酮，再沿管壁加入5mL浓硫酸，缓 慢摇匀后，静置1min。然后在620nm下，测得不同含量纤维素溶液的吸光值。 以测得的吸光值为丫值，以对应的纤维素含量为x值，绘制标准曲线，得出回归 方程。2、样品纤维素含量的测定（1）称取1g实验材料（如新鲜果蔬）置于烧杯中，将烧杯置于冷水浴中， 加入60%酸15mL并消化30min,然后将消化好的纤维素溶液转入 25mL容量 瓶中，并用60%硫酸定容至25mL然后用布氏漏斗过滤于另一个烧杯中。（2） 取上述溶液2mL于试管中，加入0.5mL 2%蒽酮试剂，并沿管壁加5mL 浓硫酸，缓慢摇匀后，静置12min，然后在620nm波长下测定光吸收值。3、纤维素百分含量纤维素百分含量=（XX 10-6 x a / W ）x 100%式中，X为按按回归方程计算出的纤维素含量 ug； W为样品重量g; 10-6为微克换算成克的系数；a为样品稀释倍数五、实验结果1、纤维素标准曲线的绘制(1)光吸收值测得结果试剂/ mLAvV 口吕号123456100ug/ mL纤维素标准液00.40.81.21.62蒸馏水21.61.20.80.40纤维素含量ug/ mL020