基因表达与蛋白质纯化技术探讨

1、 遗传背景清楚，基因工程操遗传背景清楚，基因工程操作方便，商品化表达载体种作方便，商品化表达载体种类齐全，表达效率高；类齐全，表达效率高； 根本不分泌，易形成包含体根本不分泌，易形成包含体(无正确折叠的立体结构无正确折叠的立体结构)，无，无加糖等修饰加糖等修饰 分泌蛋白质能力强，一般有天然分泌蛋白质能力强，一般有天然立体结构；立体结构； 无加糖修饰功能，培养液中蛋白无加糖修饰功能，培养液中蛋白酶活性高，重组蛋白易受蛋白酶酶活性高，重组蛋白易受蛋白酶的水解；的水解； 质粒不稳定，尚无商品化的表达质粒不稳定，尚无商品化的表达载体载体乳酸菌乳酸菌 (Lactic acid bacteria)沙门氏菌

2、沙门氏菌 (Salmonella typhimurium)苏云金杆菌苏云金杆菌 (Bacillus thuringiensis) 可生产分泌型蛋白；有天然立体结构，可生产分泌型蛋白；有天然立体结构，有加糖修饰功能；可进行染色体整合型有加糖修饰功能；可进行染色体整合型基因表达基因表达; 糖链与哺乳动物加工的不一致，培养上糖链与哺乳动物加工的不一致，培养上清多糖浓度高清多糖浓度高; 商品化表达体系：商品化表达体系： 酿 酒 酵 母 酿 酒 酵 母 S a c c h a r o m y c e cerevisiae; 毕氏酵母毕氏酵母 (Pichia pastoris); 裂殖酵母裂殖酵母Schi

3、zosaccharomyce pombe 可以病毒感染的型式在成虫中生产，可以病毒感染的型式在成虫中生产，也可在体外培养细胞中生产蛋白也可在体外培养细胞中生产蛋白; 适合分泌型和膜蛋白的表达，有加适合分泌型和膜蛋白的表达，有加糖修饰；糖修饰； 糖链有所区别，表达量有限；糖链有所区别，表达量有限； 作为药物宿主细胞未被作为药物宿主细胞未被FDA认可认可 可进行分泌表达，有天然可进行分泌表达，有天然立体结构，加糖方式与人立体结构，加糖方式与人体蛋白质完全一致；体蛋白质完全一致； 表达量不够高，培养本钱表达量不够高，培养本钱较高较高 植物可大面积种植，可以廉植物可大面积种植，可以廉价大规模生产；价大

4、规模生产； 转基因植物制作费时，表达转基因植物制作费时，表达的组织特异性较难控制；的组织特异性较难控制； 表达量较难提高，别离纯化表达量较难提高，别离纯化不方便不方便 分泌生产有天然立体结构和分泌生产有天然立体结构和活性的蛋白质至乳汁，产量活性的蛋白质至乳汁，产量高，别离纯化方便，特别适高，别离纯化方便，特别适合药用蛋白的生产；合药用蛋白的生产； 转基因动物制作花费巨大，转基因动物制作花费巨大，实验周期长实验周期长分泌生产有天然立体结构的分泌生产有天然立体结构的蛋白质到蛋清，产量高，容蛋白质到蛋清，产量高，容易贮存和运输，别离纯化方易贮存和运输，别离纯化方便；便；实验本钱低，饲养费用低；实验本

5、钱低，饲养费用低；加糖方式可能与人有所不同加糖方式可能与人有所不同帮助可溶化帮助可溶化帮助分泌到周质帮助分泌到周质可用亲和层析纯化可用亲和层析纯化纯化方便纯化方便: 先用先用 溶液处理溶液处理, 然后然后 洗出洗出9、静夜四无邻，荒居旧业贫。4月-224月-22Thursday, April 21, 202210、雨中黄叶树，灯下白头人。18:03:0918:03:0918:034/21/2022 6:03:09 PM11、以我独沈久，愧君相见频。4月-2218:03:0918:03Apr-2221-Apr-2212、故人江海别，几度隔山川。18:03:0918:03:0918:03Thurs

6、day, April 21, 202213、乍见翻疑梦，相悲各问年。4月-224月-2218:03:0918:03:09April 21, 202214、他乡生白发，旧国见青山。21 四月 20226:03:09 下午18:03:094月-2215、比不了得就不比，得不到的就不要。四月 226:03 下午4月-2218:03April 21, 202216、行动出成果，工作出财富。2022/4/21 18:03:0918:03:0921 April 202217、做前，能够环视四周；做时，你只能或者最好沿着以脚为起点的射线向前。6:03:09 下午6:03 下午18:03:094月-229、没

7、有失败，只有暂时停止成功！。4月-224月-22Thursday, April 21, 202210、很多事情努力了未必有结果，但是不努力却什么改变也没有。18:03:0918:03:0918:034/21/2022 6:03:09 PM11、成功就是日复一日那一点点小小努力的积累。4月-2218:03:0918:03Apr-2221-Apr-2212、世间成事，不求其绝对圆满，留一份缺乏，可得无限完美。18:03:0918:03:0918:03Thursday, April 21, 202213、不知香积寺，数里入云峰。4月-224月-2218:03:0918:03:09April 21,

8、202214、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。21 四月 20226:03:09 下午18:03:094月-2215、楚塞三湘接，荆门九派通。四月 226:03 下午4月-2218:03April 21, 202216、少年十五二十时，步行夺得胡马骑。2022/4/21 18:03:0918:03:0921 April 202217、空山新雨后，天气晚来秋。6:03:09 下午6:03 下午18:03:094月-229、杨柳散和风，青山澹吾虑。4月-224月-22Thursday, April 21, 202210、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。18:03:0918:0

9、3:0918:034/21/2022 6:03:09 PM11、越是没有本领的就越加自命非凡。4月-2218:03:0918:03Apr-2221-Apr-2212、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。18:03:0918:03:0918:03Thursday, April 21, 202213、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。4月-224月-2218:03:0918:03:09April 21, 202214、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。21 四月 20226:03:09 下午18:03:094月-2215、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。四月 226:03 下午4月-2218:03April 21, 202216、业余生活要有意义，不要越轨。2022/4/21 18:03:0918:03:0921 April 202217、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。6:03:09 下午6:03 下午18:03:094月-22MOMODA POWERPOINTLorem ipsum dolor sit amet, consectet