抗肿瘤坏死因子药物和重组细胞因子副本.

1、抗肿瘤坏死因子药物抗肿瘤坏死因子药物和重组细胞因子和重组细胞因子杨春华杨春华 讲师讲师2014.5.212014.5.21抗肿瘤坏死因子药物抗肿瘤坏死因子药物重组细胞因子重组细胞因子 肿瘤坏死因子（肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor,TNF)Tumor Necrosis Factor,TNF) 19751975年由年由CarswellCarswell在研究中观察到，经卡介苗致敏的小鼠在研究中观察到，经卡介苗致敏的小鼠被注射大肠杆菌内毒素后，血清中出现一种物质，该物被注射大肠杆菌内毒素后，血清中出现一种物质，该物质在体内可以使移植肿瘤发生出血、坏死，遂将该物质质在体内可以使

2、移植肿瘤发生出血、坏死，遂将该物质命名为肿瘤坏死因子命名为肿瘤坏死因子TNFTNF。 TNF-TNF-主要由单核主要由单核巨噬细胞巨噬细胞分泌，又称为分泌，又称为恶液素恶液素； TNF-TNF-主要由活化的主要由活化的T T淋巴细胞淋巴细胞分泌。分泌。两型两型TNFTNF有不同的细胞来源有不同的细胞来源,DNA,DNA水平上也仅有水平上也仅有28%28%的核苷酸序列同的核苷酸序列同源源, ,但两者结合于相同的膜受体但两者结合于相同的膜受体, ,并且具有非常相似的生物学功能。并且具有非常相似的生物学功能。 19841984年年PennicaPennica等首次克隆了人等首次克隆了人TNF-TNF

3、-的的cDNAcDNA，并在大肠杆菌，并在大肠杆菌中表达成功。中表达成功。 2020世纪世纪8080年代末，西方国家就已批准了人年代末，西方国家就已批准了人TNFTNF治疗恶性肿瘤的治疗恶性肿瘤的临床试验，但因毒副作用太强而未能进行下去。临床试验，但因毒副作用太强而未能进行下去。 19951995年，第四军医大学研制的突变体新型人重组肿瘤坏死因子年，第四军医大学研制的突变体新型人重组肿瘤坏死因子（nrhTNFnrhTNF），其杀伤肿瘤细胞的活性是天然人），其杀伤肿瘤细胞的活性是天然人TNFTNF的的100100倍，倍，毒性降低了毒性降低了3 3倍。倍。20032003年年8 8月，正式获得新药

4、生产文号。这是目月，正式获得新药生产文号。这是目前世界上第一个被批准生产的重组改构人肿瘤坏死因子药物前世界上第一个被批准生产的重组改构人肿瘤坏死因子药物。1-71-78-P-S-D-108-P-S-D-108- R-L-R -108- R-L-R -10157L157L157P157P1 1233233 免疫免疫：TNFTNF是一种真正的多效因子，具有多种生物学效应。是一种真正的多效因子，具有多种生物学效应。它可直接作用于它可直接作用于T T细胞、细胞、B B细胞、细胞、NKNK细胞等效应细胞，细胞等效应细胞， 在细在细胞水平上发挥作用。胞水平上发挥作用。 抗肿瘤抗肿瘤：TNFTNF通过受体介

5、导对肿瘤细胞的直接杀伤作用通过受体介导对肿瘤细胞的直接杀伤作用，抑抑制细胞生长和诱导凋亡制细胞生长和诱导凋亡，通过损伤肿瘤的血供系统而导致肿通过损伤肿瘤的血供系统而导致肿瘤的坏死瘤的坏死，逆转肿瘤细胞的多药耐药，增加对化疗药物的敏逆转肿瘤细胞的多药耐药，增加对化疗药物的敏感性感性。 炎症反应炎症反应：TNFTNF诱导黏附分子表达，促进白细胞黏附于血管诱导黏附分子表达，促进白细胞黏附于血管内皮细胞，使白细胞向炎症部位渗出，诱导其他炎性细胞因内皮细胞，使白细胞向炎症部位渗出，诱导其他炎性细胞因子的合成。子的合成。 抗感染抗感染：抑制疟原虫生长、抑制病毒复制、抑制病毒蛋白合：抑制疟原虫生长、抑制病毒

6、复制、抑制病毒蛋白合成、抑制病毒颗粒产生和感染性以及杀伤病毒感染细胞。成、抑制病毒颗粒产生和感染性以及杀伤病毒感染细胞。 其他其他 感染性休克感染性休克 ：目前认为革兰氏阴性杆菌或脑膜炎球菌引起的弥漫：目前认为革兰氏阴性杆菌或脑膜炎球菌引起的弥漫性血管内凝血、中毒性休克是由于细菌内毒素刺激机体产生过量性血管内凝血、中毒性休克是由于细菌内毒素刺激机体产生过量T TNF-NF-，引起发热，心脏、肾上腺严重损害，呼吸循环衰竭，甚至，引起发热，心脏、肾上腺严重损害，呼吸循环衰竭，甚至引起死亡，其引起死亡，其TNFTNF水平与病死率正相关。水平与病死率正相关。 恶液质恶液质 ：TNF-TNF-又称恶液素

7、（又称恶液素（cachectin)cachectin)，可诱发机体发生恶液质。，可诱发机体发生恶液质。 TNFTNF与病毒复制的关系与病毒复制的关系 ：TNFTNF还具有类似还具有类似IFNIFN抗病毒作用，阻止病毒早抗病毒作用，阻止病毒早期蛋白质的合成期蛋白质的合成，从而抑制病毒的复制，并与，从而抑制病毒的复制，并与TNF-TNF-等协同抗病毒作用。等协同抗病毒作用。另一方面，另一方面，TNFTNF诱导诱导HIV-HIV-基因在基因在T T细胞中表达。细胞中表达。TNFTNF和和HIVHIV感染的感染的CD4CD4+ +细胞中活化或诱导细胞中活化或诱导NF-kBNF-kB，NF-kBNF-k

8、B结合于结合于HIVHIV的长末端重复序列（的长末端重复序列（LTRLTR）的增强子部位，活化的增强子部位，活化HIVHIV基因，可能与艾滋病发病有关。艾滋病患者单基因，可能与艾滋病发病有关。艾滋病患者单核细胞核细胞TNF-TNF-产生增加，血清中产生增加，血清中TNF-TNF-水平升高。水平升高。TNFTNF与类风湿疾病与类风湿疾病类风湿性关节炎类风湿性关节炎( ( RARA) ) 是一种以关节疼痛、肿胀、僵直、变形为主要是一种以关节疼痛、肿胀、僵直、变形为主要临床表现的慢性全身性自身免疫性疾病。早期表现为关节游走性疼临床表现的慢性全身性自身免疫性疾病。早期表现为关节游走性疼痛和功能障碍痛和

9、功能障碍, , 晚期则表现为关节僵硬、畸形、废而不用。晚期则表现为关节僵硬、畸形、废而不用。类风湿的发生部位及机理类风湿的发生部位及机理雷公藤： 消炎痛、布洛芬、阿司匹林、美舒宁等环氧化酶抑制剂消炎痛、布洛芬、阿司匹林、美舒宁等环氧化酶抑制剂柳氮磺吡啶、甲氨蝶呤（柳氮磺吡啶、甲氨蝶呤（MTXMTX）、氯喹及青霉胺、金制剂等）、氯喹及青霉胺、金制剂等糖皮质激素糖皮质激素肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子(TNF)-(TNF)- 拮抗剂，包括依那拮抗剂，包括依那西普单抗西普单抗(etanercept)(etanercept)、英夫利西单抗、英夫利西单抗(inflixi(infliximab)mab)和阿达木

10、单抗和阿达木单抗(adalimumab)(adalimumab)亦可使用雷公藤、白芍总苷、青藤碱等植物制剂缓解关节疼痛或采用手术亦可使用雷公藤、白芍总苷、青藤碱等植物制剂缓解关节疼痛或采用手术商品名商品名类克类克RemicadeRemicade修美乐修美乐HumiraHumira恩利恩利EnbrelEnbrel通用名通用名Infliximab Infliximab 英夫利西单抗英夫利西单抗AdalimumabAdalimumab阿达木单抗阿达木单抗EtanerceptEtanercept依那西普依那西普研发公司研发公司Johnson&JohnsonJohnson&JohnsonAbbott/C

11、ATAbbott/CAT ImmunexImmunex来源来源人鼠嵌合人鼠嵌合IgG1IgG1单克单克隆抗体隆抗体人源化人源化单单克隆克隆抗抗全人源全人源抗抗体体上市时间上市时间199919992002200219981998半衰期半衰期8.09.5d8.09.5d16d16d45d45d对鼠蛋白质产生过对鼠蛋白质产生过敏者禁用敏者禁用较低的免疫原性较低的免疫原性除了可与除了可与TNF-TNF- 结结合外还可以与合外还可以与TNF-TNF- 高效结合高效结合抗肿瘤坏死因子药物抗肿瘤坏死因子药物重组细胞因子重组细胞因子牛奶中添加牛奶中添加OMPOMP，即造骨牛奶蛋白（，即造骨牛奶蛋白（OstOs

12、teoblasts Milk Proteineoblasts Milk Protein），一种微量存在于），一种微量存在于牛乳中的天然活性蛋白，在有效提高人牛乳中的天然活性蛋白，在有效提高人体骨密度方面。体骨密度方面。OMPOMP实际上是国外研究很多的一种生长实际上是国外研究很多的一种生长因子因子IGF-1(insulin-like growth factors -1,IGF-1(insulin-like growth factors -1,类类胰岛素生长因子胰岛素生长因子) )，不仅不能造骨，还有，不仅不能造骨，还有致癌风险。致癌风险。鉴于目前我国未对OMP的安全性做出明确规定，IGF-1物

13、质不是传统食品原料，也未列入食品添加剂使用标准，如人为添加上述物质，不符合现有法律法规的规定。 国家质检总局 细胞因子（细胞因子（cytokinecytokine）是由由）是由由免疫细胞（如单核、巨噬细免疫细胞（如单核、巨噬细胞、胞、T T细胞、细胞、B B细胞、细胞、NKNK细胞等）细胞等）和某些和某些非免疫细胞（内非免疫细胞（内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）产生的一类调节细产生的一类调节细胞功能的高活性、多功能的多肽分子，不包括免疫球蛋胞功能的高活性、多功能的多肽分子，不包括免疫球蛋白、补体和一般生理性的细胞产物。白、补体和一般生理性的细胞产物。14细胞因

14、子的特点：细胞因子的特点： 可溶性（可溶性（solublesoluble），胞外蛋白（），胞外蛋白（extracellularextracellular） 大小为大小为150150氨基酸左右氨基酸左右 可由许多细胞产生，主要由淋巴细胞、白细胞和上皮细胞产可由许多细胞产生，主要由淋巴细胞、白细胞和上皮细胞产生生 细胞受伤害或感染时诱导细胞受伤害或感染时诱导 靶细胞可为多种类型靶细胞可为多种类型 与靶细胞上的受体结合后起作用与靶细胞上的受体结合后起作用 调控免疫系统调控免疫系统 调节细胞生长、分化、死亡以及血管生成调节细胞生长、分化、死亡以及血管生成 重组细胞因子是利用重组细胞因子是利用基因工程基

15、因工程技术生产的细胞因子产品技术生产的细胞因子产品，作为药物用于治疗肿瘤、感染、造血障碍等，可收到，作为药物用于治疗肿瘤、感染、造血障碍等，可收到良好的疗效。近十多年来，重组细胞因子类药物的研制良好的疗效。近十多年来，重组细胞因子类药物的研制有较快发展，相关的新药陆续上市。有较快发展，相关的新药陆续上市。细胞因子根据功能可大致分为六大类：细胞因子根据功能可大致分为六大类： 肿瘤坏死因子（肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNFtumor necrosis factor, TNF） 干扰素（干扰素（interferon, IFNinterferon, IFN） 白细胞介

16、素（白细胞介素（interleukinsinterleukins，ILsILs） 集落刺激因子集落刺激因子(colony- stimulating factor(colony- stimulating factor，CSF)CSF) 趋化因子（趋化因子（chemokineschemokines） 生长因子（生长因子（growth factorgrowth factor，GFGF）干扰素干扰素 干扰素是由病毒和其他种类的干扰素诱导剂，刺激网状内皮干扰素是由病毒和其他种类的干扰素诱导剂，刺激网状内皮系统（人体免疫系统的一种）、巨噬细胞、淋巴细胞以及体系统（人体免疫系统的一种）、巨噬细胞、淋巴细胞以

17、及体细胞所产生的一种糖蛋白。这种蛋白具有多种生物活性，包细胞所产生的一种糖蛋白。这种蛋白具有多种生物活性，包括抗增殖、免疫调节、抗病毒和诱导分化作用。括抗增殖、免疫调节、抗病毒和诱导分化作用。 干扰素种类繁多，分子量也不同，亦有不同的抗原性。目前了解由人的不干扰素种类繁多，分子量也不同，亦有不同的抗原性。目前了解由人的不同细胞产生的干扰素至少有三种不同的抗原成分：同细胞产生的干扰素至少有三种不同的抗原成分： 白细胞干扰素抗原白细胞干扰素抗原(Le)- (Le)- IFN-IFN- 人成纤维细胞干扰素抗原（人成纤维细胞干扰素抗原（F F）- - IFN-IFN- T T淋巴细胞干扰素抗原（淋巴细

18、胞干扰素抗原（T T）- - IFN-IFN- 根据来源、基因序列和氨基酸组成分类根据来源、基因序列和氨基酸组成分类I I 型干扰素：型干扰素： IFNIFN、IFNIFN、IFN IFN 、IFN IFN 来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能功能 ：抗病毒感染、抗肿瘤生长：抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调节免疫调节( (较弱）较弱）其中其中IFN-IFN-为多基因产物，有为多基因产物，有2323种以上的亚型。种以上的亚型。 II II 型干扰素：干扰素型干扰素：干扰素 （IFNIFN ) ) 来源：活化的来源：活化的T T细胞和细胞

19、和NKNK细胞产生细胞产生 功能：免疫调节功能：免疫调节 干扰素不能直接灭活病毒，而是通过诱导细胞干扰素不能直接灭活病毒，而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（合成抗病毒蛋白（AVPAVP）发挥效应，实现对病毒的抑制作用。发挥效应，实现对病毒的抑制作用。 免疫调节作用表现在对宿主免疫细胞活性的影响，如对巨噬细胞、免疫调节作用表现在对宿主免疫细胞活性的影响，如对巨噬细胞、T T细胞、细胞、B B细胞和细胞和NKNK细胞等均有一定作用。细胞等均有一定作用。干扰素不杀死病毒，只是阻碍病毒合成干扰素不杀死病毒，只是阻碍病毒合成天然干扰素天然干扰素 人体淋巴母细胞样多亚型天然干扰素（IFN-N1），葛兰素威康

20、公司（英国）生产，商品名为惠福仁。重组干扰素重组干扰素IFN1bIFN1b：世界上第一个采用中国人干扰素基因克隆和表达的IFN1b型干扰素，商品名为赛若金，深圳科兴生物制品有限公司生产，有300万U/支和500万U/支两种剂量。 IFN-2aIFN-2a：罗氏公司（瑞士）生产的罗扰素，有300万U/支和450万U/支两种剂量；沈阳三生公司生产的因特芬，每支300万U；辽宁卫星生物研究所生产的迪恩安，每支300万U和500万U两种剂型。 IFN2bIFN2b：先灵葆雅（美国）公司生产的干扰能300万U/支和500万U/支；天津华立达公司生产的安福隆，300万U/支；安徽安科公司生产的安达芬，10

21、0万U/支、300万U/支、500万U/支；合肥兆峰科大药业有限公司，尤靖安，1.0*105IU/g 。l 干扰素在临床上广泛应用于慢性乙型肝炎、丙型肝炎以及肾干扰素在临床上广泛应用于慢性乙型肝炎、丙型肝炎以及肾癌、表浅膀胱癌、黑色素瘤、尖锐湿疣、血液系统疾病、艾癌、表浅膀胱癌、黑色素瘤、尖锐湿疣、血液系统疾病、艾滋病相关的卡波济肉瘤等的治疗。滋病相关的卡波济肉瘤等的治疗。l 在国内重组人干扰素和重组人生长激素市场，呈现国产药品在国内重组人干扰素和重组人生长激素市场，呈现国产药品和进口药品并存的格局。进口重组人干扰素为和进口药品并存的格局。进口重组人干扰素为长效干扰素长效干扰素，价格偏高，单价

22、均在价格偏高，单价均在10001000元左右。国产重组人干扰素为元左右。国产重组人干扰素为普通普通干扰素干扰素，最高剂量的单价只在，最高剂量的单价只在100100元左右，普通干扰素市场元左右，普通干扰素市场竞争也主要集中在国内生产企业之间。竞争也主要集中在国内生产企业之间。 l19721972年发现第一个成员年发现第一个成员IL-1IL-1。19831983年发现年发现IL-2IL-2，其在免疫系统中发挥核心调节作用。，其在免疫系统中发挥核心调节作用。到到20012001年，已有年，已有2323个成员，从个成员，从IL-1IL-1到到IL-23IL-23。只有只有IL-2IL-2和和IL-11

23、IL-11成功开发为基因工程药物。成功开发为基因工程药物。IL-3IL-3、IL-6IL-6、IL-10IL-10、IL-12IL-12、IL-15IL-15正在研究开发，有的已进入临床二期试验。正在研究开发，有的已进入临床二期试验。 白细胞介素是由多种白细胞介素是由多种细胞细胞产生并作用于多种细胞的一类产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由细胞因子。由于最初是由白细胞白细胞产生又在白细胞间发挥产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。作用，所以由此得名，现仍一直沿用。 白细胞介素白细胞介素( (i inter nter l leukineukin) )缩写为缩写为ILI

24、L。白细胞介素白细胞介素23白细胞介素白细胞介素IL-2IL-2和和IL-11IL-11IL-2IL-2IL-11IL-11位置位置4 4 号号19 19 号号基因产物大小基因产物大小133 Aa133 Aa199 Aa199 Aa主要产生细胞主要产生细胞激活的激活的T T细胞、细胞、NKNK细细胞胞成纤维细胞、骨髓基成纤维细胞、骨髓基质细胞质细胞别名别名T T细胞生长因子细胞生长因子脂肪细胞生长抑制因脂肪细胞生长抑制因子子对热稳定性对热稳定性对热不稳定对热不稳定对热稳定对热稳定24白细胞介素白细胞介素IL-2IL-2处于调节机体免疫应答的细胞因子网络的处于调节机体免疫应答的细胞因子网络的中心

25、环节，诱导和激活免疫活性细胞中心环节，诱导和激活免疫活性细胞 通过自分泌活化通过自分泌活化T T细胞，促细胞因子产生；刺激细胞，促细胞因子产生；刺激NKNK细胞增殖，增强细胞增殖，增强N NK K杀伤活性及产生细胞因子，诱导杀伤活性及产生细胞因子，诱导LAKLAK细胞产生；促细胞产生；促B B细胞增殖和分细胞增殖和分泌抗体。泌抗体。 肿瘤治疗，批准治疗的有肾细胞癌、血管肉瘤和黑色素瘤；抗感染治肿瘤治疗，批准治疗的有肾细胞癌、血管肉瘤和黑色素瘤；抗感染治疗，对病毒性、细菌性和细胞内寄生虫等疾病具有疗效；对先天性和疗，对病毒性、细菌性和细胞内寄生虫等疾病具有疗效；对先天性和后天性免疫缺陷症有一定疗

26、效后天性免疫缺陷症有一定疗效25白细胞介素白细胞介素IL-11IL-11是造血微环境中一个多功能的调节因子。是造血微环境中一个多功能的调节因子。促进血小板生成；诱导促进血小板生成；诱导T T细胞、细胞、B B细胞的发育、分化并对特异性抗原细胞的发育、分化并对特异性抗原反应产生免疫球蛋白；调节肝细胞血浆蛋白基因的表达，诱导急性反应产生免疫球蛋白；调节肝细胞血浆蛋白基因的表达，诱导急性期蛋白生成期蛋白生成 实体瘤、非髓性白血病化疗后实体瘤、非髓性白血病化疗后、度血小板减少症的治疗；骨髓造度血小板减少症的治疗；骨髓造血功能障碍性血小板减少症的治疗，可缩短血小板减少的持续时间血功能障碍性血小板减少症的

27、治疗，可缩短血小板减少的持续时间集落刺激因子集落刺激因子集落刺激因子集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)(colony stimulating factor, CSF)可刺激骨髓未成熟细胞分化成熟并在体外刺激集落形成的可刺激骨髓未成熟细胞分化成熟并在体外刺激集落形成的细胞因子。细胞因子。用集落培养方法发现的造血细胞生长因子用集落培养方法发现的造血细胞生长因子不同的不同的CSFCSF刺激生成由不同细胞系组成的细胞集落刺激生成由不同细胞系组成的细胞集落 根据细胞因子刺激不同造血细胞系或不同分化阶段的细胞在根据细胞因子刺激不同造血细胞系或不同分化阶段的细胞在半

28、固体培养基中形成不同细胞集落，分别半固体培养基中形成不同细胞集落，分别命名命名: :粒细胞集落刺激因子（粒细胞集落刺激因子（granulocyte CSF, G-CSFgranulocyte CSF, G-CSF）粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage CSF, GM-CSF)granulocyte-macrophage CSF, GM-CSF)巨噬细胞集落刺激因子（巨噬细胞集落刺激因子（macrophage CSF, M-CSF)macrophage CSF, M-CSF)多能集落刺激因子（多能集落刺激因子（mutimuti-CS

29、F-CSF）红细胞生成素（红细胞生成素（erythropoietin, EPO)erythropoietin, EPO)血小板生成素（血小板生成素（thrombopoietinthrombopoietin, TPO, TPO）干细胞因子（干细胞因子（stem cell factor, SCF)stem cell factor, SCF)粒细胞集落刺激因子粒细胞集落刺激因子(G-CSF) (G-CSF) 促进骨髓造血细胞增殖分化；形成粒细胞集落；诱导中性促进骨髓造血细胞增殖分化；形成粒细胞集落；诱导中性粒细胞终末分化；增强中性粒细胞的功能粒细胞终末分化；增强中性粒细胞的功能肿瘤病人放、化疗后的辅助用药，自体骨髓移植