临床生化实验方法的选择和评价

1、 临床生化实验方临床生化实验方法的选择和评价法的选择和评价 definitive method reference method （routine method ） （recommended method ）。）。项目项目决定性方法决定性方法参考方法参考方法钙钙ID-MS原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法氯氯电量滴定法、中子活化法电量滴定法、中子活化法电流滴定法电流滴定法镁镁ID-MS原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法磷磷ID-MS钾钾ID-MS、中子活化法、中子活化法火焰光度法火焰光度法钠钠重量分析法、中子活化法重量分析法、中子活化法火焰光度法火焰光度法白蛋白白蛋白免疫化学法免疫化学法总

2、蛋白总蛋白双缩脲法双缩脲法肌酐肌酐ID-MS、离子交换层析法、离子交换层析法离子交换层析法离子交换层析法尿素尿素ID-MS尿素酶法尿素酶法尿酸尿酸ID-MS尿酸酶法（紫外法尿酸酶法（紫外法）胆红素胆红素重氮反应法重氮反应法葡萄糖葡萄糖ID-MS己糖激酶法己糖激酶法胆固醇胆固醇ID-MSAbell-Kendall法，胆固醇氧化酶法，胆固醇氧化酶法法甘油三酯甘油三酯ID-MS酶法酶法AST（GOT ） MDH-NADH法法ALT（GPT）LDH-NADH法法转肽酶（转肽酶（r-GT）连续监测产物生成法连续监测产物生成法肌酸激酶肌酸激酶 NAD+偶联法偶联法ID-MS：同位素稀释：同位素稀释-质谱分

3、析法质谱分析法n（2）可靠性）可靠性 一般具有较高的精密度和准确度，一般具有较高的精密度和准确度，以及较大的检测能力。以及较大的检测能力。（systematic error， SE） （random error，RE）p注意事项：注意事项：n吸量准确；吸量准确；n加入标准液后，其实验样品的被子测浓度最好加入标准液后，其实验样品的被子测浓度最好达到医学决定水平；达到医学决定水平；n总浓度必须在方法分析范围内；总浓度必须在方法分析范围内；n需加入高中低不同浓度回收试验，计算平均回需加入高中低不同浓度回收试验，计算平均回收率；收率；n加入标准液的体积一般在加入标准液的体积一般在10%10%内；内；n

4、重复重复2-32-3次。次。p注意事项注意事项n被试验的物质：胆红素、溶血、防腐剂、抗凝剂、药物等被试验的物质：胆红素、溶血、防腐剂、抗凝剂、药物等n可疑干扰物的浓度：干扰物浓度有可能达到病理标本最高可疑干扰物的浓度：干扰物浓度有可能达到病理标本最高浓度值。浓度值。n本试验检测的误差包括方法特异度不高和干扰物作用引起本试验检测的误差包括方法特异度不高和干扰物作用引起的误差。的误差。p消除干扰常用方法消除干扰常用方法n空白对照：空白对照：试剂空白试剂空白：常见：常见标本空白：标本空白：n物理、化学方法分离干扰物物理、化学方法分离干扰物n双波长或多波长法检测排除干扰双波长或多波长法检测排除干扰n误

5、差较大又无法消除，则改进或更换方法。误差较大又无法消除，则改进或更换方法。(四四)方法比较试验（对比试验）方法比较试验（对比试验）n用于检测候选方法的系统分析误差。用于检测候选方法的系统分析误差。对所得数据对所得数据进行分析，可提供系统误差的性质（恒定或和进行分析，可提供系统误差的性质（恒定或和比例误差）比例误差） 对一组病人的标本用候选方法和比较方法同时对一组病人的标本用候选方法和比较方法同时进行分析测定，观察二者之间的差异。这是考验进行分析测定，观察二者之间的差异。这是考验候选方法是否可采用的重要措施。候选方法是否可采用的重要措施。n在进行临床化学常规方法的评价时，最好选在进行临床化学常规

6、方法的评价时，最好选择参考方法作为比较方法择参考方法作为比较方法n若采用已知偏差法，则有部分误差来自比较若采用已知偏差法，则有部分误差来自比较方法（与已知偏差方法（与已知偏差 一致的那部分误差），剩一致的那部分误差），剩余的则属于侯选方法。余的则属于侯选方法。n若采用未知偏差法，分析误差可能来源于二若采用未知偏差法，分析误差可能来源于二者之一或两者都有，难以分析。者之一或两者都有，难以分析。理想试验的诊断灵敏度为理想试验的诊断灵敏度为100%。n注意事项：注意事项：正确选择受检对象，以受检对象的确对所反映的总体具正确选择受检对象，以受检对象的确对所反映的总体具有代表性和不存在对指标具有影响的因

7、素为原则；有代表性和不存在对指标具有影响的因素为原则；合理规定参考人群的条件，如年龄、性别、民族、职业、合理规定参考人群的条件，如年龄、性别、民族、职业、女性的月经期、妊娠和哺乳，以及标本采集的时间和地女性的月经期、妊娠和哺乳，以及标本采集的时间和地区因素等；区因素等；保证一定数量的受检人数，一般应有保证一定数量的受检人数，一般应有100例以上，若指例以上，若指标分布呈偏态时应在标分布呈偏态时应在120例以上，特殊情况至少也应例以上，特殊情况至少也应30例以上；例以上；测定方法应标准化，保证测定结果的可靠性和可比性。测定方法应标准化，保证测定结果的可靠性和可比性。根据专业知识确定单、双侧位界，

8、严格按照统计要求进根据专业知识确定单、双侧位界，严格按照统计要求进行测定结果的处理。行测定结果的处理。n参考值在临床应用中应注意的问题参考值在临床应用中应注意的问题n 参考值的使用有一定的范围，仅适合于符参考值的使用有一定的范围，仅适合于符合参考个体要求的参考人群。合参考个体要求的参考人群。n参考值范围通常定为参考值范围通常定为 2S，有时称为，有时称为95%可信区间，即此范围仅覆盖研究人群的可信区间，即此范围仅覆盖研究人群的95%，因此，参考值范围不能盲目地作为正常与疾因此，参考值范围不能盲目地作为正常与疾病的分界点。病的分界点。n综合评价，参考值在作为诊断和监测目的综合评价，参考值在作为诊断和监测目的使用时，应注意年龄、性别、饮食、药物、使用时，应注意年龄、性别、饮食、药物、个人习惯和体力锻炼等因素的影响。个人习惯和体力锻炼等因素的影响。 n一个诊断试验一般确定三个决定水平：一个诊断试验一般确定三个决定水平：n提示需要制定进一步检查计划的阈值