系统性硬化症自身抗体研究进展

1、系统性硬化症自身抗体研究进展系统性硬化症(systemicsclerosis,SSc)是一种以皮肤及多脏器纤维化为突出表现的系统性自身免疫性疾病,目前认为炎症和自身免疫应答,血管病变及纤维化是介导SSc发病的重要环节.免疫细胞活化后释放大量促炎、促纤维化因子,合成自身抗体,参与组织损伤和器官功能障碍.针对细胞内、外靶点的自身抗体可作为SSc血清标志物.超过95%的SSc患者在首次诊断时可检测到自身抗体,并与疾病亚型,皮肤病变,内脏受累及预后密切相关.超过90%的SSc患者外周血抗核抗体阳性.而60%80%的SSc患者标志性抗体阳性1,包括抗拓扑异构酶I抗体、抗着丝点抗体和抗RNA聚合酶抗体,三

2、者对SSc诊断具有较高特异性,因而纳入了2021年美国风湿病学会(ACR)/欧洲抗风湿病联盟(EULAR)对SSc的分类标准之中2,并且有助于识别早期或极早期ssC3,4.尽管三种标志性抗体已广泛应用于临床,然而关于抗体功能和临床意义的研究仍不断进展.止匕外,研究发现一系列自身抗体具有功能性序列可参与SSc纤维化和血管病变,如抗血管紧张素II-1型受体和内皮素1受体抗体、抗血小板源性生长因子受体抗体、抗毒蕈碱-3受体抗体等,与SSc临床特征与发病环节密切相关,也为致病机制提供新的见解,而说明自身抗体介导发病相关通路也有助于寻找潜在治疗靶点.本综述将重点关注SSc相关自身抗体,尤其是新近发现的功

3、能性自身抗体,着重介绍其临床应用价值和潜在致病机制.1抗拓扑异构酶I(TopoisomeraseI/Scl-70抗体抗Scl-70抗体最初在SSc血清中鉴定发现,因其可与70kDa核抗原反响而得名.后来人们熟悉到全长自身抗原是拓扑异构酶I(TopoisomeraseI,topoI,而70kDa蛋白是天然全长100kDa蛋白分解产物.虽然抗Scl-70的术语仍在使用,但更准确的命名应为抗topoI抗体.抗topoI抗体在SSc中报道的阳性率为9.4%42%,最常见的是IgG亚型,IgA和IgM亚型亦可见.尽管抗topoI抗体对SSc高度特异,但研究报道也可见于SLE5,然而血清识别抗原表位有所不

4、同.抗topoII抗体并非SSc所特异,可见于其他免疫相关疾病,如局灶性硬皮病,特发性肺纤维化,SLE和幼年型类风关等.抗topoI抗体被认为与弥漫性皮肤型diffusecutaneousSSc,dcSSC高度相关,但也可见于局限性皮肤型localizedcutaneousSSc,IcSSc患者.抗topoI抗体强烈提示不良预后,病死率增高,与间质性肺病高度相关.另有报道抗topoI抗体与骨骼肌和心肌受累,手指挛缩畸形,及蛋白尿相关6.而抗topoI抗体与月中瘤间的关联仍存在争议.目前研究认为内皮细胞破坏释放拓扑异构酶,或译后修饰如乙酰化水平增高7,8,最终导致抗原释放,免疫耐受失衡,机体产生

5、抗topoI抗体.研究支持抗topoI抗体可能是SSc的致病性抗体,而非单纯的伴随抗体：1使用topoI抗原联合佐剂免疫小鼠可诱导抗topoI抗体产生,导致皮肤和肺组织的炎症和纤维化病变9;2抗topoI抗体可作用于SSc皮肤成纤维细胞,促进胶原合成,以及单核细胞募集10;3topoI抗原抗体免疫复合物可刺激原代人皮肤成纤维细胞上调表达促炎、促纤维化和缩血管因子11.因而抗topoI抗体在SSc发生中具有潜在的致病性,可能在SSc自身免疫应答与纤维化间起桥接作用,然而具体机制有待深入研究.2 抗着丝点Centromereprotein,CENP抗体抗CENP抗体在SSc中的检出率为20%40%

6、,CENP-B是一类80kDa的着丝粒蛋白,是与几乎所有抗CENP阳性血清反响的主要抗原,而抗CENP-A抗体比抗CENP-B抗体对SSc更具特异性12,两种亚型具有相似的临床特征13.其他抗CENP亚型也被陆续发现,抗CENP-C抗体与枯燥综合征相关,而抗CENP-I抗体可能是自身免疫性肝病的血清标志物.抗CENP抗体与lcSSc密切相关,尤其是CREST综合征钙质沉着,雷诺现象,食管运动障碍,指硬化和毛细血管扩张.严重的间质性肺病和肾危象少见13.约20%的抗CENP阳性患者合并肺动脉高压pulmonaryarterialhypertension,PAH,约50%该类患者死亡归因于PAH1

7、4.抗CENP抗体阳性的孤立性雷诺未来开展为SSc的风险显著升高15,然而合并严重指端溃疡的发生率并未增加13.抗CENP抗体阳性SSc患者较其他标志性抗体阳性患者总体预后相对较佳,死亡率较低16.3 抗RNA聚合酶(RNApolymerase,RNAP)抗体针又tRNAPI和RNAPIII的自身抗体经常共存,且对SSc高度特异.SSc中的阳性率约为20%.然而中国汉族SSc患者中阳性率仅为1.3%,远低于美国高加索人群17.4%,推测与种族基因背景相关17.针又tRNAPII的抗体少见,且并不特异于SSc,可在SLE和重叠综合征患者中检出18.抗RNAPIII抗体在传统以Hep-2细胞为底物

8、的间接免疫荧光中显示为斑点核仁型,但缺乏特异性,常与其他自身抗体同时检出,因而采用酶联免疫吸附测定(Enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA测定可能是优选方法19.抗RNAPI和III抗体与弥漫皮肤型SSc相关,且罹患肾危象的风险更高.值得关注的是,基于EUSTAR队列进行的病例对照研究,结果显示抗RNAPIII抗体除了与肾脏受累、弥漫皮肤亚型、胃窦血管扩张,快速进展的皮肤病变相关外,还与伴随的月中瘤发生(-6+12月)密切相关(OR7.38,95%CI1.61-33.8)20.而JohnsHopkins队列数据也应证了这一结果,抗RNAPIII抗体阳性患者中3

9、年月中瘤标化发病比为2.84(95%CI1.894.10),而乳腺癌和肺癌分列抗RNAPIII抗体阳性的dcSSc和lcSSc患者之首21.因而对于抗RNAPIII抗体阳性的SSc患者而言,除需密切随访肾脏病变外,还应增强月中瘤筛查.4抗血管紧张素II-1型受体(angiotensinIItype1receptor,AT1R)和内皮素1受体(endothelin-1typeAreceptor,ETAR抗体AT1R和ETAR广泛表达于脉管系统及免疫细胞.针对AT1R和ETAR的抗体可激活相应受体参与多种血管病变,两者高度相关且可发生交叉反响.85%的SSc患者抗AT1R和ETAR的抗体阳性22,

10、与指端溃疡23及PAH24密切相关,也可见于其他结缔组织病合并的PAH,可作为提示预后的血清标志物24.体内实验证实抗AT1R和ETAR抗体可作用于血管内皮细胞导致中性粒细胞黏附及胶原合成25,也可促进内皮细胞和免疫细胞分泌促炎症因子26o体内实验中过继回输抗AT1R和ETAR抗体IgG至小鼠体内,可出现气道血管壁增厚和间质细胞浸润24,从而提示了抗AT1R和ETAR抗体在SSc血管病变中的致病性.5 抗血小板源性生长因子受体(Platelet-derivedgrowthfactorreceptor,PDGFR抗体PDGF通过作用于成纤维细胞或平滑肌细胞受体PDGFR,诱导活性氧(reacti

11、veoxygenspecies,ROS产生,促进胶原合成.有研究将来自SSc患者的生物工程皮肤移植至免疫缺陷小鼠,同时输注针对PDGFR的刺激性抗体,证实这一抗体可促进并维系SSc皮肤纤维化病变27.止匕外,抗PDGFR抗体可诱导人肺血管平滑肌细胞的增殖和迁移,可能参与SSc血管病变28.有研究报道SSc来源的抗PDGFR抗体发挥激活作用参与发病,虽然健康对照、SLE和原发性雷诺患者外周血中均可检出抗PDGFR抗体,然而并不能发挥类似效应29,推测可能是天然存在的抗体,其作用表位与致病性抗体有所不同.已有研究通过区分刺激性和非刺激性抗PDGFR抗体结合的抗原表位,绘制功能性表位图谱,从而推动临

12、床应用30o6 抗毒蕈碱-3受体(Muscarinic-3receptor,M3R)抗体包括胃食管反流在内的消化道病变是SSc患者常见且突出的临床表现,既往认为食管蠕动障碍,平滑肌萎缩,胶原沉积和纤维化是引起胃食管反流的重要原因,而Goldblatt等发现来自SSc患者的IgG可特异性阻断肠肌层中的毒蕈碱-3受体对胆碱的应答,并与SSc消化道病症密切相关31o进一步发现来自SSc的自身抗体首先阻断神经节胆碱能神经传递引起神经病变,随着疾病进展,可改变平滑肌细胞膜上乙酰胆碱功能引起肌肉病变.抗M3R抗体主要作用于靶点为M3R的第二胞外段,静脉用丙种球蛋白(Intravenousgammaglob

13、ulin,IVIG)可阻断抗M3R抗体Fab段的特异性作用,包括对神经病变和肌肉病变的双重调控32.抗M3R抗体除了可见于SSc患者,还可见于枯燥综合征及重症肌无力患者,但抗M3R抗体阳性的SSc中,64%的患者有营养吸收障碍和/或胃肠道假性梗阻330因而抗M3R抗体的发现有助于加深我们对SSc消化道病变的熟悉,在临床应用中,不但可以提示消化道合并症,并为IVIG等免疫治疗提供理论依据.7 抗干扰素诱导基因16(Interferon-induciblegene16,IFI16)抗体IFI16是HIN-200家族成员,构成性表达于血管内皮细胞和角质形成细胞,过表达IFI16可导致血管内皮凋亡和促

14、炎症因子释放340研究发现SSc外周血中存在抗IFI-16抗体,其阳性率在21%25%35,36,IcSSc中更高35,且与肢端溃疡相关37,抗CENP和抗IFI-16抗体双阳性性患者的肢端血管事件风险增加.目前研究推测抗IFI-16抗体作用于内皮细胞特异性抗原,参与SSc血管病变38.8 抗RuvBL1和RuvBL2抗体RuvBL1和RuvBL2是ATP酶同源物,参与转录、DNA修复及染色质结构重塑等生理过程39.最近在SSc中发现抗RuvBL1和RuvBL2抗体,其在日本和北美人群中阳性率约为2%,与dcSSc和骨骼肌受累相关40o9 抗真核起始因子-2B(EukaryoticInitia

15、tionFactor-2B,eIF-2B)抗体eIF-2B是一种细胞质多聚体蛋白,参与真核细胞蛋白质合成,帮助tRNA与核糖体结合41.Betteridge等首先在ANA阴性的SSc患者血清中发现此抗体,报道的阳性率为1%7%,临床上与dcSSc和间质性肺病相关阳43.有研究提出抗eIF2B抗体的形成可能与EB病毒分子模拟相关44.小结：SSc经典的特异性抗体如抗拓扑异构酶I抗体、抗着丝点抗体和抗RNA聚合酶抗体虽然已经广泛应用于SSc的诊断分型和预后判断中,然而对于其临床意义和致病机制仍不断在拓展和深入,因而在此温故而知新.此外,一些功能性抗体靶向于SSc重要致病环节,日前也备受关注,抗AT

16、1R和ETAR抗体可促进血管内皮细胞收缩,进而导致内皮细胞凋亡和促炎症因子释放参与血管病变,针对PDGFR抗体可改变氧化应激平衡,促进细胞外基质合成,而针对M3R抗体在消化道病变中发挥重要作用.因此功能性自身抗体不但可提示临床,还有助于揭示潜在发病机制,也为IVIG、B细胞靶向治疗、干细胞移植等免疫调节和重塑策略提供理论依据.最后,新近发现的SSc自身抗体,如抗IFI-16抗体、抗Ruv1/2抗体和抗eIF2B抗体等,与SSc特定临床表型相关,有望应用于临床,然而其潜在作用机制有待深入.参考文献：1 MECOLICA,CASCIOLA-ROSENL.Anupdateonautoantibodi

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