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文档简介
1、会计学1尿中尿中氨基氨基酮戊酸酮戊酸ALA的测定的测定临床意义 铅吸收或铅中毒时,尿中-氨基-酮戊酸(-ALA)的含量增高,故测定尿中-ALA的含量,有助于了解铅吸收和铅中毒的诊断。 特异性,灵敏性均较差 乙酸乙酯萃取对二氨基苯甲醛基比色法 尿中-ALA + 乙酰乙酸乙酯 吡咯化合物(经乙酸乙酯提取)+显色剂(对二甲氨基苯甲醛) 红色化合物100PH=4.6l 分光光度计;l 水浴锅,l 电炉;l 离心机(1500-2000r/min);l 具塞比色管10m1 20支;l 移液管2m1 1支;l 吸管10m1 4支、5m1 1支、2m1 2支;l 离心管10m1 10支。 l 乙酰乙酸乙酯;l
2、 乙酸乙酯;l 醋酸盐缓冲液;l 对二甲氨基苯甲醛显色剂 ;l ALA标准溶液;l 标准色列制备与标准曲线绘制 l 尿样测定:测定前须用比重计测定尿比重 试剂管号012345样品管空白管ALA标液(ml)0.00.10.30.50.71.0 尿样1.0尿样1.0蒸馏水(ml)2.01.91.71.51.31.01.01.0乙酸缓冲液(ml)2.0乙酰乙酸乙酯(ml)0.4乙酸缓冲乙酸缓冲液液0.40.4混匀,沸水中加热10分钟,冷却至室温乙酸乙酯(ml)4.0加塞振摇1分钟,静置分层离心离心5 5分钟分钟提出液2ml于另具赛比色管中,加2ml显色剂,加塞振摇,静置10分钟分光光度计 ,波长55
3、4nm ,零管参比零管参比乙酸乙酯参比乙酸乙酯参比1标准曲线的绘制2样品管吸光度减去尿样空白管吸光度,查标准曲线得样品管中ALA含量(g)3计算公式:(1)尿样比重在正常范围(1.010-1.035)内 尿中 ALA(mgL)=样品管中 ALA含量(g) (2)尿样比重不在正常范围内尿中ALA(mmo1L)= 0.0076 样品管含量(g )1(尿样) 1.020-1.000 尿比重-1.000 乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。显色剂宜新鲜配制。 加入显色剂后,静置10分钟,应在半小时内完成比色。 尿样易腐败,可导致 pH增高,影响测定结果。如不能及时测定,应将尿样保存在冰箱中。 乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好近期产品,显色剂宜新鲜配制 参比液有两种:标准色列:零管 样品管:乙酸乙酯l
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