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文档简介
1、实验四实验四 影响酶活性的因素影响酶活性的因素 一、实验目的一、实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察不同底物、温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。二、原理二、原理影响酶活性的因素包括:底物类型、酶浓度、底物浓度、产物浓度、抑制剂、激活剂、pH值、温度等淀粉在淀粉酶的作用下被降解成单糖,这种降解过程是逐步进行的,降解的中间产物遇碘曾现不同的颜色: 淀粉 红色糊精 无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 (紫蓝色)(红色) (无色) 所以根据水解液和碘反应的颜色,可以判断水解是否已完全。三、试剂和器材三、试剂和器材 1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、Benedict试剂、
2、0.5%淀粉、含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液、 5氯化钠溶液、0.1硫酸铜溶液、 0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液、柠檬酸钠溶液、KI-I2溶液 2. 器材 恒温水浴锅、冰箱、电磁炉四、操作方法四、操作方法1. 唾液淀粉酶液的准备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中。将其稀释5-20倍。2. 淀粉酶活性的检测: 取一支试管,注入0.5%淀粉溶液3 mL与稀释的唾液1 mL。混匀后插入1支玻棒,将试管连同玻棒置于37水浴中。不时地用玻棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为
3、止。记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化及反应时间。根据反应时间调整酶的稀释倍数。实验四实验四1 酶的特异性酶的特异性一、实验目的 了解酶的特异性并掌握检查酶的特异性的方法和原理。二、原理 酶的特异性是指一种酶只能对一种或一类化合物此类化合物通常具有相同的化学键起作用,而不能对别的化合物起作用。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解无催化作用。 本实验以唾液淀粉酶含淀粉酶和少量麦芽糖酶对淀粉的作用为例,说明酶的特异性。淀粉和蔗糖都没有还原性,但淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖和葡萄糖,均为还原性糖,能与Benedict试剂反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。三、试剂和器材 1. 试剂
4、 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、Benedict试剂、0.5%淀粉、含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液 2. 器材 恒温水浴锅四、操作方法 1. 检查试剂 取2只试管,按下表操作。 试管 编号试剂处理 1 20.3NaCl 的0.5%淀粉溶液/mL3 2%蔗糖溶液/mL3Benedict试剂/mL22 沸水浴煮沸23min记录观察结果 淀粉酶的专一性实验 取2只试管,按下表操作。 试管编号试剂处理 1 2稀释的唾液/mL110.3NaCl的 0.5%淀粉溶液/mL3 2% 蔗糖溶液/mL3摇匀,置37水浴保温10min10minBenedict试剂/mL22 沸水浴煮沸23min记录观察结果五、本卷须知 唾液的稀释倍数因人而异,有时差别很大,
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