胰弹性蛋白酶的制备与分析修改ppt课件

1、生物制药工艺学实验生物技术实验实验要求 实验 2人一组， 穿任务服。 实验 听从教师安排，留意仪器运用，平安。 不得缺席，旷课三次没有成果。 实验终了 洗涤，值日、检查平安。实验报告： 英文书写 内容: 实验目的英文 实验原理英文 操作流程英文 实验结果英文 讨论英文、中文或双语实验成果评分规范 平常实验20 +实验报告60 +设计实验20Experiment 1： Preparation of Elastic Protease from pancreas and Analysis of Enzyme Activity实验一： 胰弹性蛋白酶的制备与活性分析Purpose 1. Learn th

2、e principle of Preparation of Elastic Protease from pancreas. 2. Master the analysis method of enzyme activity. Frozen pancreas75gActivation24，24hremove the fat，cut into piecesadd 50ml HAc-buff ,mashedPancreatic plasmaadd 250ml HAc-buff，ph4.525stir for 1 hours, FilterFiltrate40g Resin Adsorption25st

3、ir for 1 hours, Water washingResin(absorb protein)add 50 ml 1M NH4Cl-buff，ph9.0 stir for 1h, adjust pH(5.2 pH 6.0) ，FilterEluateAdd 3-time-volumn cold acetoneRoom temperature 20min, 4000rpm10minprecipitationAcetone wash 2 timesEther wash one time，Vacuum dryingElastase powderProcedures1 preparation o

4、f reference substance30mg Congo red elastin30ml standard elastic enzyme37 1h50ml PB (pH 6.0)50ml BB (pH 8.8) to the scale2 Sample Reference5mg10ml pH8.8 BB buffer3. standard curve2：Sample preparationTake 3 tubes to operate according to the table below:制备工艺：制备工艺： 附： 树脂处置：取干Amoerlite CG50树脂，水漂洗后加5倍体积1N NaOH搅2小时，水洗至中性。加5倍体积1N HCl 处置2小时，水洗至中性，再用pH4.5 0.1M醋酸缓冲液平衡过夜。 本卷须知