吸光光度法(1)

1、第第10章章 吸光光度分析吸光光度分析10-1 吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理10-2 光度计及其基本原理光度计及其基本原理10-3 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择10-4 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择10-5 吸光光度法的应用吸光光度法的应用10-110-110-1吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理吸光光度法基本原理 基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。学分析法。 分为分为: :光谱分析法和非光谱分析法。光谱分析法和非光谱分析法。

2、光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。分析的方法。 一、概述一、概述一、概述一、概述一、概述一、概述: : : 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法建立起来的分析方法称为吸光光度法, ,主要有主要有: : 红外吸收光谱：红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围分子振动光谱，吸收光波长范围2.52.5 1000 1000 m ,m ,主要用于有机化

3、合物结构鉴定。主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围电子跃迁光谱，吸收光波长范围200200 400 400 nmnm（近紫外区）近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围电子跃迁光谱，吸收光波长范围400400 750 750 nm nm ，主要用于有色物质的定量分析。主要用于有色物质的定量分析。 本章主要讲授可见吸光光度法。本章主要讲授可见吸光光度法。二、可见吸收光谱二、可见吸收光谱二、可见吸收光谱二、可见吸收光谱二、可见吸收光谱二、可见吸收光谱1 1光的基本

4、性质光的基本性质 光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长波长 、频率、频率 、光速、光速c c、波数（波数（cmcm-1-1）等参数来描述：等参数来描述： = = c c ； 波数波数 = 1/ = 1/ = = / /c c 光是由光子流组成，光子的能量：光是由光子流组成，光子的能量： E = h E = h = = h c / h c / （PlanckPlanck常数常数：h=6.626 h=6.626 10 10 -34 -34 J J S S ) ) 光的波长越短（频率越高），其能量越大。光的波长越短（频率越高），其能量越大。

5、 白光（太阳光）：由各种单色光组成的复合光白光（太阳光）：由各种单色光组成的复合光 单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子组成）单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子组成） 可见光区：可见光区：400-750 400-750 nmnm2.2.物质结构：物质结构： 物质由分子构成物质由分子构成 固有的内能固有的内能 连续变化的平动能连续变化的平动能分子能量包括分子能量包括 电子运动能电子运动能 量子化的量子化的 振动能振动能 转动能转动能物质对光的选择性吸收与分子内量子化的物质对光的选择性吸收与分子内量子化的能量有关。能量有关。以双原子分子的能级图为例以双原子分子的能级图为例: 能级跃迁能级

6、跃迁能级跃迁能级跃迁能级跃迁能级跃迁 电子能级间跃迁的同电子能级间跃迁的同时，总伴随有振动和转动时，总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁产生的若转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。干谱线而呈现宽谱带。3. 3. 物质对光的选择性吸收及吸收曲线物质对光的选择性吸收及吸收曲线M + 热M + 荧光或磷光 E = E2 - E1 = h ：量子化量子化 ；选择性吸收；选择性吸收吸收曲线与最大吸收波长吸收曲线与最大吸收波长 max： 用不同波长的单色光照射，测吸光度用不同波长的单色光照射，测吸光度M + h M

7、*光的互补：蓝光的互补：蓝 黄黄基态基态 激发态激发态E1 （E） E2 分子对光的吸收与吸收光谱分子对光的吸收与吸收光谱 /nm颜色颜色互补光互补光400 450紫紫黄绿黄绿450 480蓝蓝黄黄480 490绿蓝绿蓝橙橙490 500蓝绿蓝绿红红500 560绿绿红紫红紫560 580黄绿黄绿紫紫580 610黄黄蓝蓝610 650橙橙绿蓝绿蓝650 760红红吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为大处对应的波长称为最大吸收波长

8、最大吸收波长maxmax不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似maxmax不变。不变。在在max处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。要依据。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和maxmax则不同。则不同。3.3.3.3.3.3.紫外紫外紫外紫外紫外紫外可见分子吸收光谱与电子跃迁可见分子吸收光谱与电子跃迁可见分子吸收光谱与电子跃迁可见分子吸收光谱与电子跃迁可见分子吸收光谱与电子跃迁

9、可见分子吸收光谱与电子跃迁物质分子内部三种运动形式：物质分子内部三种运动形式： 1. 1.电子相对于原子核的运动，电子相对于原子核的运动， 2. 2.原子核在其平衡位置附近的相对振动原子核在其平衡位置附近的相对振动 3. 3.分子本身绕其重心的转动。分子本身绕其重心的转动。分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级。级。三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。分子的内能：电子能量分子的内能：电子能量E Ee e 、振动能量振动能量E Ev v 、转动能量、转动能量E Er r 即即e+e+v

10、+v+r re e v v r r 讨论：讨论：讨论：讨论：讨论：讨论：1（1） 转动能级间的能量差转动能级间的能量差r r：0.0050.0050.0500.050eVeV，跃迁产生吸收光谱位于远红外区。远红外光谱或分子转动光跃迁产生吸收光谱位于远红外区。远红外光谱或分子转动光谱；谱；1（2 2） 振动能级的能量差振动能级的能量差v v约为：约为：0.050.05eVeV，跃跃迁产生的吸收光谱位于红外区，红外光谱或分子振动光谱；迁产生的吸收光谱位于红外区，红外光谱或分子振动光谱；1（3 3） 电子能级的能量差电子能级的能量差e e较大较大1 12020eVeV。电子跃电子跃迁产生的吸收光谱在

11、紫外迁产生的吸收光谱在紫外可见光区，紫外可见光区，紫外可见光谱或分可见光谱或分子的电子光谱子的电子光谱讨论：讨论：讨论：1 （4 4）吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间）吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的能量差所决定，反映了分子内部能级分布状况，是物质定的能量差所决定，反映了分子内部能级分布状况，是物质定性的依据。性的依据。1 （5 5）吸收谱带的强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有）吸收谱带的强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关，也提供分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得关，也提供分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩尔吸光系数的摩尔吸光系数maxmax也作为定性的

12、依据。也作为定性的依据。不同物质的不同物质的maxmax有时可能相同，但有时可能相同，但maxmax不一定相同；不一定相同；1 （6 6）吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比）吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比，定量分析的依据。，定量分析的依据。三、分子吸收光谱与电子跃迁三、分子吸收光谱与电子跃迁三、分子吸收光谱与电子跃迁三、分子吸收光谱与电子跃迁三、分子吸收光谱与电子跃迁三、分子吸收光谱与电子跃迁1 1紫外紫外可见吸收光谱可见吸收光谱 有机化合物的紫外可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果（三种）：电子、电子、n电子。分子轨道理论分子轨道理论：一个成键轨道必定有一个相应的

13、反键轨道。通常外层电子均处于分子轨道的基态，即成键轨道或非键轨道上。当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键轨道)跃迁。主要有四种跃迁四种跃迁所需能量大小顺序大小顺序为：n n n 11跃迁跃迁 所需能量最大，所需能量最大，电子只有吸收远紫外光的能量才能发电子只有吸收远紫外光的能量才能发生跃迁。饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区生跃迁。饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区( (吸收波长吸收波长200nm200nm200nm。这类跃迁在跃迁选律这类跃迁在跃迁选律上属于禁阻跃迁，摩尔吸光系数一般为上属于禁阻跃迁，摩尔吸光系数一般为1010100100L Lmolmol1 1 cmc

14、m1 1，吸收谱带强度较弱。分子中孤对电子和吸收谱带强度较弱。分子中孤对电子和键同时存在时发键同时存在时发生生n n 跃迁。丙酮跃迁。丙酮n n跃迁的跃迁的maxmax为为275275nm nm maxmax为为22 22 L Lmolmol1 1 cm cm 1 1（溶剂环己烷溶剂环己烷) )。生色团与助色团生色团与助色团生色团：生色团： 最有用的紫外最有用的紫外可见光谱是由可见光谱是由和和n n跃迁产跃迁产生的。这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这生的。这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这类含有类含有键的不饱和基团称为生色团。简单的生色团由双键键的不饱和基团称为生色团。

15、简单的生色团由双键或叁键体系组成，如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基或叁键体系组成，如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基N NN N、乙炔基、腈基乙炔基、腈基C CN N等。等。助色团：助色团： 有一些含有有一些含有n n电子的基团电子的基团( (如如OHOH、OROR、NHNH、NHRNHR、X X等等) )，它们本身没有生色功能，它们本身没有生色功能( (不能吸收不能吸收200nm200nm的光的光) )，但当它们与生色团相连时，就会发生，但当它们与生色团相连时，就会发生n n共轭作共轭作用，增强生色团的生色能力用，增强生色团的生色能力( (吸收波长向长波方向移动，且吸收波长向长波方向移动，且吸收强

16、度增加吸收强度增加) )，这样的基团称为助色团。，这样的基团称为助色团。红移与红移与红移与红移与红移与红移与蓝移蓝移蓝移蓝移蓝移蓝移 有机化合物的吸收谱带常常因有机化合物的吸收谱带常常因引入取代基或改变溶剂使最大吸收引入取代基或改变溶剂使最大吸收波长波长maxmax和吸收强度发生变化和吸收强度发生变化: : maxmax向长波方向移动称为红移向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为蓝移，向短波方向移动称为蓝移 ( (或紫或紫移移) )。吸收强度即摩尔吸光系数。吸收强度即摩尔吸光系数增大或减小的现象分别称为增色效增大或减小的现象分别称为增色效应或减色效应，如图所示。应或减色效应，如图所示。2.

17、2.金属配合物的紫外金属配合物的紫外可见吸收光谱可见吸收光谱 金属离子与配位体反应生成配合物的颜色一般不同于游金属离子与配位体反应生成配合物的颜色一般不同于游离金属离子离金属离子( (水合离子水合离子) )和配位体本身的颜色。金属配合物的和配位体本身的颜色。金属配合物的生色机理主要有三种类型：生色机理主要有三种类型：配位体微扰的金属离子配位体微扰的金属离子d d一一d d电子跃迁和电子跃迁和一一电子跃迁电子跃迁 摩尔吸收系数摩尔吸收系数很小，对定量分析意义不大。很小，对定量分析意义不大。金属离子微扰的配位体内电子跃迁金属离子微扰的配位体内电子跃迁 金属离子的微扰，将引起配位体吸收波长和强度的变

18、化。金属离子的微扰，将引起配位体吸收波长和强度的变化。变化与成键性质有关，若静电引力结合，变化一般很小。若变化与成键性质有关，若静电引力结合，变化一般很小。若共价键和配位键结合，则变化非常明显。共价键和配位键结合，则变化非常明显。电荷转移吸收光谱电荷转移吸收光谱 在分光光度法中具有重要意义。在分光光度法中具有重要意义。电荷转移吸收光谱电荷转移吸收光谱1 当吸收紫外可见辐射后，分子中原定域在金属当吸收紫外可见辐射后，分子中原定域在金属M M轨道上电荷的转轨道上电荷的转移到配位体移到配位体L L的轨道，或按相反方向转移，这种跃迁称为电荷转移跃迁，的轨道，或按相反方向转移，这种跃迁称为电荷转移跃迁，

19、所产生的吸收光谱称为荷移光谱。所产生的吸收光谱称为荷移光谱。1 电荷转移跃迁本质上属于分子内氧化还原反应，因此呈现荷移光电荷转移跃迁本质上属于分子内氧化还原反应，因此呈现荷移光谱的必要条件是构成分子的二组分，一个为电子给予体，另一个应为电谱的必要条件是构成分子的二组分，一个为电子给予体，另一个应为电子接受体。子接受体。1 电荷转移跃迁在跃迁选律上属于允许跃迁，其摩尔吸光系数一般都电荷转移跃迁在跃迁选律上属于允许跃迁，其摩尔吸光系数一般都较大较大(10(10 4 4左右左右) )，适宜于微量金属的检出和测定。，适宜于微量金属的检出和测定。1 电荷转移跃迁在紫外区或可见光呈现荷移光谱，荷移光谱的最

20、大吸电荷转移跃迁在紫外区或可见光呈现荷移光谱，荷移光谱的最大吸收波长及吸收强度与电荷转移的难易程度有关。收波长及吸收强度与电荷转移的难易程度有关。 例：例：FeFe3 3与与SCNSCN形成血红色配合物，在形成血红色配合物，在490490nmnm处有强吸收峰。其实质处有强吸收峰。其实质是发生了如下反应：是发生了如下反应： FeFe3 3 SCN SCN hh= = Fe SCNFe SCN 2 2 三、光的吸收定律三、光的吸收定律三、光的吸收定律三、光的吸收定律三、光的吸收定律三、光的吸收定律吸光度吸光度A：描述溶液对入射光的吸收程度，：描述溶液对入射光的吸收程度，A= lg（I o/ It）

21、透光度透光度T ： 描述入射光透过溶液的程度描述入射光透过溶液的程度: T = I t/ I0吸光度吸光度A与透光度与透光度T的关系的关系: A lg T 1.1.朗伯朗伯比耳定律比耳定律 布格布格( (BouguerBouguer) )和朗伯和朗伯( (Lambert)Lambert)先后于先后于17291729年和年和17601760年年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。 A A b b 18521852年比耳年比耳( (Beer)Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。之间也具有类似的关系。

22、 A A C C 二者的结合称为朗伯二者的结合称为朗伯比耳定律，其数学表达式为：比耳定律，其数学表达式为： 朗伯朗伯比耳定律数学表达式比耳定律数学表达式 Alg（I0/It)= b c 式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的物质的量浓度，单位molL； ：摩尔吸光系数，单位Lmolcm； 或: Alg（I0/It)= a b c c：溶液的浓度，单位gL a：吸光系数，单位Lgcm a与与的关系为：的关系为： a =/M （M为摩尔质量） 吸光度吸光度A与浓度与浓度C的关系的关系: A lg T =bc A lg T = abc 朗伯

23、朗伯比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量；测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量； 摩尔吸光系数摩尔吸光系数在数值上等于浓度为在数值上等于浓度为1 mol/L、液液层厚度为层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度；时该溶液在某一波长下的吸光度； 吸光系数吸光系数a(Lg-1cm-1）相当于浓度为相当于浓度为1 g/L、液液层厚度为层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。时该溶液在某一波长下的吸光度。2.2.摩尔吸光系数摩尔吸光系数的讨论的讨论 吸收物质在一定波长和溶剂条件下的吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数

24、特征常数； 不随浓度不随浓度c c和光程长度和光程长度b b的改变而改变的改变而改变。在温度和波长。在温度和波长 等条件一定时，等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关；仅与吸收物质本身的性质有关； 可作为可作为定性鉴定的参数定性鉴定的参数； 同一吸收物质在不同波长下的同一吸收物质在不同波长下的值是不同的。在最大吸值是不同的。在最大吸 收波长收波长maxmax处的摩尔吸光系数，常以处的摩尔吸光系数，常以maxmax表示，表明表示，表明 了该了该吸收物质最大限度的吸光能力吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测，也反映了光度法测 定该物质可能达到的最大灵敏度。定该物质可能达到的最大灵敏度。

25、摩尔吸光系数摩尔吸光系数的讨论的讨论max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。质的灵敏度越高。 104 ：高灵敏；：高灵敏； 105： 超高灵敏；超高灵敏；在数值上等于浓度为在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为液层厚度为1cm时该溶液在时该溶液在某一波长下的吸光度。某一波长下的吸光度。朗伯朗伯-比尔定律的适用条件比尔定律的适用条件（1 1） 平行单色光平行单色光 应选用应选用 maxmax处或肩峰处测定处或肩峰处测定. .（2 2） 吸光质点形式不变吸光质点形式不变 离解、络合、缔合会破坏线性关系离解、络合、缔合会破

26、坏线性关系, , 应控制条件应控制条件( (酸度、浓度、介质等酸度、浓度、介质等).).（3 3） 稀溶液稀溶液 浓度增大，分子之间作用增强浓度增大，分子之间作用增强. .3.3.偏离朗伯偏离朗伯比耳定律的原因比耳定律的原因 标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯伯比耳定律的偏离。比耳定律的偏离。 引起这种偏离的因素（两大类）：一类是物理性因素，引起这种偏离的因素（两大类）：一类是物理性因素，即仪器的非理想引起的；另一类是化学性因素。即

27、仪器的非理想引起的；另一类是化学性因素。（1）非单色光引起的偏离）非单色光引起的偏离 朗朗比耳定律的比耳定律的前提条件之一前提条件之一是入射是入射光为单色光。光为单色光。 难以获得真正的纯单色光难以获得真正的纯单色光。分光光度分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯可导致对朗伯比耳定律的正或负偏离。比耳定律的正或负偏离。 非单色光、杂散光、非平行入射光都非单色光、杂散光、非平行入射光都会引起对朗伯会引起对朗伯比耳定律的偏离，最主要比耳定律的偏离，最主要的是非单色光作为入射光引起的偏离。的是非单色光作为入射光引起的偏离。 A =bc非单色光作为

28、入射光引起的偏离非单色光作为入射光引起的偏离 假设由波长为1和2的两单色光组成的入射光通过浓度为c的溶液，则： o1、o2 分别为1、2 的入射光强度； t1、t2 分别为1、2 的透射光强度； 1、2 分别为1、2的摩尔吸光系数； 1lg（o1 /t1 ）1bc 2lg(o2 /t2 ）2bc故：故： t1 o1101bc ； t2 o2102bc因实际上只能测总吸光度A总，并不能分别测得A1和A2，故 A总总 lg（o总总/t总总 )lg(Io1o2)/(t1t2） lg(Io1o2)/(o1101bc o2102bc ）讨论讨论: : 若若1=2 , , 则：则：1 1= =2 2 =

29、= 则：则： A A总总 lglg（o o/ /t t）bcbc 若若1 2 ，则，则: :12， A总总 与与c c不是直线关系，发不是直线关系，发 生偏离。生偏离。即标准曲线偏离直线向即标准曲线偏离直线向c轴弯曲，即负偏离；或向轴弯曲，即负偏离；或向 A轴弯曲，即正偏离。轴弯曲，即正偏离。 为什么在为什么在C C较大时偏离较为严重？较大时偏离较为严重？( (见上图）见上图） 故朗伯故朗伯比耳定律只适用于稀溶液比耳定律只适用于稀溶液。为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器。为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器。此外还应将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲此

30、外还应将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。线较平坦处。非单色光的影响A A总总 lg(lg(I Io1o1o2o2)/()/(o1o110101 1bcbc o2o210102 2bcbc ）浓度浓度C如何选取？如何选取？在实际工作中，一般选用在实际工作中，一般选用max作为入射光波长。作为入射光波长。 ？AAc谱带谱带A A谱带谱带B B谱带谱带A A谱带谱带B B选用选用maxmax作为入射光波长的优点：作为入射光波长的优点：偏离朗伯偏离朗伯比耳定律小；灵敏度高。比耳定律小；灵敏度高。（2 2） 化学性因素化学性因素 朗朗比耳定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相比耳

31、定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用；互作用；假定只有在稀溶液假定只有在稀溶液(c10 2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。等相互作用，直接影响了对光的吸收。 溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 故：朗伯故：朗伯比耳定律只适用于稀溶液比耳定律只适用于稀溶液。例：例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡：铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： Cr42- 2H = Cr272- H2 溶液中溶液中Cr42-、 Cr272-的颜色不同，吸光性质也不相同的颜色不同，吸光性质也不相同。故：此时溶液浓度、。故：此时溶液浓度、pH 对测定有重要影响。对测定有重要影响。10-2 光度分析的方法和仪器光度分析的方法和仪器光度分析的几种方法光度分析的几种方法1.目视比色法目视比色法观察方向观察方向空白空白c1c2c3c4方便、灵敏，准确度差方便、灵敏，准确度差. 常用于限界分析常用于限界分析.2. 光电比色法光电比色法通过滤光片得一窄范围的光通过滤光片得一窄范围的光(几十几十nm)光电比色计结构示