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会计学1酶联免疫吸附试验的影响因素酶联免疫吸附试验的影响因素终止与读数结果的判读试 剂加 样温 育样 本洗 板显 色排泄物血 清唾 液尿液、粪便分泌物体 液脂血标本溶血标本标本的保存标本的离心采血试管标本的离心 避免细菌污染 A.如有细菌污染,菌体中可能含有内源性的 HRP会产生假阳性; B.细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对 抗原抗体等蛋白产生分解作用(如明胶酶 等蛋白水解酶); C.一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的-半 乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定 方法产生非特异性干扰。仔细注意加样全部过程移液器的使用及时放入孵育箱标本较多时,请分批操作试剂的滴加移液的方法及注意事项枪头的装配量程的调节温育温度的选择足够的反应时间“边缘效应”的排除“边缘效应”的排除1.“边缘效应”,即外周孔显色较中心孔深;2.有研究证实在温育中的热力学梯度可能是 根本原因。3.聚苯乙烯本身为不良热导体,板从室(通 常在25左右)置于37温箱,板升温 时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热 力学梯度。 双波长比色测定能排除由微滴板本身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、灰尘等对特异显色测定吸光度的影响,一般不必设空白孔。 ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性;在ELISA测定比色时,最好是使用双波长比色。 脂血标本溶血标本标本的保

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