高级生物化学专题二：模拟酶

1、专题之二专题之二模拟酶的基础知识及进展模拟酶的基础知识及进展一，天然酶促反应的特点及作用机理1，天然酶促反应的特点2,酶的促作用机理 1），酶与底物结合的作用力：静电吸引力氢键范德华力疏水相互作用。2），酶高效催化的机理：邻近效应多元催化；微环境效应诱导契合底物变形二，对酶活性中心功能团的模拟二，对酶活性中心功能团的模拟酶酶有有结结合合中中心心和和催催化化中中心心酶底物钥匙与锁的关系，反应进行不能与结合中相配，反应不能进行酶与底物的结合存在有别构效应酶与底物的结合存在有别构效应负效应正效应酶催化中心的组成酶的名称酶的名称氨基酸的总数氨基酸的总数 活性中心活性中心胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶 245

2、组组57，门，门102，丝，丝195枯草杆菌蛋白酶275组61，丝221碳酸酐酶258组93-组95组117牛胰核糖核酸酶124组12，组119，赖41羧肽酶307谷270，酪245，组196，组69谷72胰凝蛋白酶对肽键的水解机理（第一步）第一步：咪唑基从丝氨酸的羟基上取质子胰凝蛋白酶的水解机理（第二步）丝氨酸上负氧离子进攻酰胺上羰基，水解得胺，胺立即为附近的羧基所质子化成“盐”。胰凝蛋白酶的水解机理（第三步）水进攻所生成的酯的羧基，水解成酸及丝氨酸的负离子，负离子又被咪唑基的氢所质子化。完成循环。酶高效催化的机理及实例酶高效催化的机理及实例姜勇21200504084一一.决定酶高效催化的机

3、理决定酶高效催化的机理1.底物和酶的靠近(proximity)与定向(orientation) 在化学反应中，反应速度与反应物的浓度成正比，若在酶促反应系统中的催化场所酶的活性中心，增加底物浓度，反应速度也会随之增加。酶促反应加速的原因之一，就是使底物分子集中于酶的活性中心，大大提高这个区域底物的有效浓度，从而加速酶促反应速度。 曾测过某酶促反应中，溶液中的底物浓度为0.001mol/L,而在活性中心的底物浓度竟达到10mol/L，比溶液中高出一万倍！因此在酶活性中心区域的高底物浓度决定了高的反应速度。二二. .溶菌酶（溶菌酶（lysozyme) ) 溶菌酶存在于鸡蛋清和动物的眼泪中，其生物学

4、功能是催化某些细菌细胞壁的多糖水解，从而溶解细菌的细胞壁。 溶菌酶是第一个用X-射线法阐明其全部结构和功能的酶。是1922年伦敦细菌学家弗莱明(Fleming)首次发现的。1.底物、溶菌酶及酶和底物复合物的结构 溶菌酶的底物 溶菌酶通过水解某些细菌细胞壁的多糖组份来溶解细胞壁，细胞壁的多糖由两种糖组成: N-乙酰氨基葡萄糖 (NAG) N-乙酰氨基葡萄糖乳酸(NAM)溶菌酶的最适小分子底物溶菌酶的最适小分子底物溶菌酶的结构溶菌酶的结构 溶菌酶由129个氨基酸残基构成，是一个单链蛋白，分子内含有四对二硫键。活性中心的氨基酸残基是Glu35和Asp52 。鸡蛋蛋清溶菌酶的氨基酸序列鸡蛋蛋清溶菌酶的

5、氨基酸序列溶菌酶和底物结合的空间构象从表面构象看，酶的结构不很紧密，大多数极性氨基酸残基分布在分子的表面，非极性氨基酸残基分布在分子的内部。整个酶分子中有一狭长的凹穴。最适底物正好与酶分子的凹穴相结合，凹穴中的Glu35和Asp52 是活性中心的氨基酸残基。 底物底物D D糖环构象发生变化糖环构象发生变化 C3C4C5C2C1OC3C4C5C2C1O 溶菌酶底物溶菌酶底物D糖糖环变形模型图环变形模型图 椅式：椅式：C5、C1、C2 和和 O不在同一平面不在同一平面 C3C4C5C2C1OC5向前移动，向前移动， O原子向后移动原子向后移动半椅式：半椅式：C5、C1、C2 和和 O在同一平面上在

6、同一平面上 GluGlu3535的羧基起的羧基起广义酸碱催化广义酸碱催化，向底物，向底物D D糖环和糖环和E E糖环糖环之间的糖苷键上的氧原子提供之间的糖苷键上的氧原子提供一个质子一个质子，氧原子与，氧原子与D D糖环糖环C C1 1的糖苷键断开，的糖苷键断开，D D糖环的糖环的C C1 1 带上正电荷成为正碳离子。带上正电荷成为正碳离子。AspAsp5252上的上的-COO-COO- -起着协调起着协调糖苷键断裂糖苷键断裂和稳定和稳定正碳离子正碳离子的作的作用。用。 最后，来自环境中的水分子上的最后，来自环境中的水分子上的H+与与Glu35的的-COO-结结合，水分子上的合，水分子上的HO-

7、与正碳离子结合，至此，一次反应完与正碳离子结合，至此，一次反应完成，细胞壁打开一个缺口。经多次重复作用，细菌的细胞成，细胞壁打开一个缺口。经多次重复作用，细菌的细胞壁溶解。壁溶解。对酶活性中心模拟的研究结果 诸多实验认为： 当模拟的分子中有Asp、Ser及His并处在适当的位置就有催化作用。例如：酪-组-组-苯丙-苯丙-门-组-丝-门-丝-苯丙-门-苯丙-组-苯丙三，对酶作用方式的模拟主要在仿金属方面做了大量工作：氧还蛋白酶活性中心的模拟物固氮酶活性中心模拟物左图为福州模型；右图为厦门模型固氮酶活性中心模拟物左图为Schrauzer模型；右图为大冢模型四，胶束催化 胶束催化分二类：其一为胶束催

8、化；其二为胶束模拟酶。 如，含有咪唑的或含有硫醇的阳性离子表面活性剂用来胶束催化，或使对硝基苯酯的水解加速104倍五，高分子模拟酶高分子模拟的原理：识别系统和催化中心（一），环糊精(Cycloamylose) 1,CD组成和在工业上的用途 2，CD的制法与性质 制法：淀粉糊化酶解沉淀 结构见下图CD的一般性质-CD-CD-CD葡萄糖数葡萄糖数678分子量97311351297空洞内径（）5678910空洞深度（）787878晶体针状棱柱状棱柱状水中溶解度14.518.523.225D（H2O）+150.5。+162.5。+177.4。碱显色蓝黄褐黄褐采用化学修饰可使CD有较多的疏水场3，利用，

9、利用CD进行仿生反应进行仿生反应取代苯酚乙酸酯加CD与未加CD的水解速率比值CDCDCDM-Br-22625054P-Br-1.72.241M-Cl-113137.8P-Cl-3.0103.8M-O2N-1035410.0P-O2N-A，水解酶的模拟，水解酶的模拟对CD进行修饰可提高对取代苯酚乙酸酯水解速率B，裂解酶的模拟，裂解酶的模拟苄基乙酰乙酸在CD催化下脱羧机理示意图(二)，褐藻多糖铈配合物的水解酶模拟 1，褐藻多糖铈配合物的水解模拟酶的研究意义 2，研究途径 3，研究结果00.820.641.251.5A570nm褐藻糖胶铈配合

10、物褐藻酸铈配合褐藻淀粉铈配合反应条件：pH7.0,37下水解90min，BSA浓度为2.5mg.ml-1作图数据是根据游离氨基酸及短肽与茚三酮反应生成紫色，在570nm处的吸光值，该值是已减除BAS本身的水解及对照后的两次测定平均值。五，磷酯键水解酶模拟物研究进展五，磷酯键水解酶模拟物研究进展（一），生物分子中键及键能1，共价键及键能键的类型键能(KJ/mol)键的类型键能(KJ/mol)O-H461C-N293H-H435C-S260P-O419N-O222C-H414S-S214N-H389C=O712C-O352C=N615C-C348C=C611S-H339P=O5022,其它键及键能

11、 A，配价键及键能 B,VanderWaals力 C，离子键及键能 (二)，DNA水解 1，HomogeneousCe4+complexesTheternaryofCe4+Pr+dextranhasmoreactivity,althoughhomogeneousCe4+complexeshascatalyticactivity(see,fig1)Retentiontime/minFig.1,SynergisticcatalysisbyCe4+/Pr3+/dextransystemforthehydrolysisofTPTtothymidine(T)Thereactionconditions:p

12、H7.0and50 for 10hA, Catalysis byCe4+/Pr3+/dextran;B,CatalysisbyCe4+/dextran;C,CatalysisbyPr3+/dextranabc2,Ce4+所引起的DNA裂解可获得天然酶解无法得到的DNA片断3，Ce4+对DNA水解的机理要回答二个问题：WhatistheactivecontainingCe4+speciesforDNAhydrolysis?WhyisCe4+overwhelminglymoreactivethanothermetalions?到目前为止，这些问题还没有完全清楚。可能的机理是：3,Mechanism

13、ofDNAhydrolysisbyCe4+ Ce4+DNACe4+2（OH）24+OH-1对磷酸根的亲核作用DNA水解 实验依据： 1，Ce4+对cAMP的水解时其活性部位是Ce4+形成了Ce4+2（OH）24+ 2，如果用下图的didnucleotideanalogofTpT,用Ce4+水解，其水解速率比TpT快100倍Reference:ShigekawaH.etal.Corelevelphotoelectronspectroscopyonthelathanide-inducedhydrolysisofDNA,Nucleic Acids Symp Ser,1998,39:137138Lef

14、t:DinucleotideanalogofTpT,wherethe5oxygenatomisreplacedbysulfur.Right:TheenergyprofilesforthehydrolysisofDNAatpH7inthepresence(theblueline)andtheabsence(theblackline)ofCe4+4，对PlasmidDNA的裂解作用，见磷酯键的非酶水解研究进展；，References:J.ChemSocPerkinTrans21997:20692072;,需要注意的是，可水解Plasmid的结果，不可外推能水解线状DNA。(三),Inorganic

15、catalysts 1,SynergisminbimetallicandtrimetalliccomplexesNovel catalysts should obtained by using multimetallic synergismEXPERIMENTRESULTS:A,X-raycrystallographicstudiestheenzymesinvolvedinphosphoesterhydrolysisoftenpossesstwo(ormore)metalionsattheiractivesitesthemetalionsandwaterboundsubstratecooper

16、atehydrolyzestablephosphoestersunderphysiologicalconditions.B,ThedinuclearZn2+complex(bottomfigure)isactiveforRNAhydrolysis,whereasfreeZn2+ionisinactive.C,AdinuclearLa3+complexforRNAhydrolysishasbeenalsoreported.D,ThetrinuclearZn2+complex(bottomfigure)isstillmore(tenfold)activethanthedinuclearcomple

17、x.Thecomplexalsoinducesboththesubstratespecificityandtheproductspecificity.InorganiccatalystsforphosphoesterhydrolysisLeft:AdinuclearZe2+complex;Right:AtrinuclearZe2+complexE,RNAhydrolysisbycombinationsofLa3+andhydrogenperoxidecanoccurandisascribedtotheformationofatrimericaggregateofthedinuclearcomp

18、lexLa(O-O3La).F,AmacrocyclicCu2+complexcleavesbothdouble-strandedandsingle-strandedportionsinhairpin-structuredRNAG,AmacrocyclicEu3+complexisactiveforphosphodiestertransesterification.2,ThecatalyticmechanismTherateofRNAhydrolysisbylanthanide()ionslinearlyincreaseswiththeequilibriumconcentrationofthe

19、bimetallichydroxo-clusterM2(OH)24+thedinuclearhydroxideistheactivespecies(thesameasCe4+inducedDNAhydrolysis)byacid/basecooperationinthedinuclearspeciesTheformationofthepenta-coordinatedintermediateanditsbreakdown.(四四)，Sequenceselective article ribonucleasesPreviously,mostofthesequenceselectiveartifi

20、cialribonucleasesreportedpossessthemolecularscissorsatthe5endsofDNAoligomersTheRNAfragmentsformedbythecatalyticscissionassociatewiththecomplementaryDNAoligomer(thefigureinnextpage)ThesecondRNAsubstratecannotboundtotheDNAThecatalyticturnoverishardtoachieve.1,Incorporationofmolecularscissorsintointern

21、alpositions Recently,molecularscissorshavebeenincorporatedintotheinsideofDNAstrandThecomplementaryregionintheRNAisdividedintotwosmallfragmentsSpontaneouslyremovedfromtheDNA(figurenextpicture).MagdaM,etalDNAconjugatewiththeDy3+-texaphyrincomplexsequence-selectiveRNAscissiongottenhighcatalyticturn-ove

22、rrate.O:molecularscissorsCatalyticturn-overinRNAhydrolysisbyasequence-selectiveartificialenzyme.(Left)ArtificialenzymespossessingthemolecularscissorswithintheNDAstrand.Whenthescissionoccurs,theRNAportioniscleavedintotwosmallfragmentsandisremovedfromtheDNA.(Right)WhenthescissorsareboundtotheendsofDNA

23、,however,theproductscannotberemovedfromtheDNAafterthescission.AsimilarstrategyhasbeenusedintheoligoamineDNAhybridsandtheCu2+complexDNAhybrids.InordertopreciselypredictscissionsitesmolecularmodelingmethodmolecularscissionandfixedintheRNA-DNAduplex.Thescopeoftheapplicationofsuchribozymemimicshasbeenwi

24、denedbecauseofthesestudies.2,useofmultinulearmetalcomplexesasmolecularscissorsAattractivetacticusedtodevelopartificialribonucleasesistouseamultinulearmetalcomplexasthemolecularscissors.WHY?ThedinulearZn2+complex,forexample,beingascribedtobimetallicsynergism(freeZn2+ionisvirtuallyinactive),canselecti

25、velycutRNAatthesitewherethiscomplexisplaced.Aattractivefind:theconjugateofdinulearZn2+complexwiththeDNAoligomerexhibitsquiteahighsequenceselectivity,evenwhenconsiderableamountsoffreeZn2+ionsexistinthemixtures(seebottomfigure).DinuclearZe2+complexSelectivescissionZnZnZn六、稀土糖配合物的拟酶作用六、稀土糖配合物的拟酶作用（一）、稀

26、土元素（一）、稀土元素(REE)简介简介 稀土元素（稀土元素（Rare Earth Elements，简称，简称REE）或稀土（）或稀土（Rare Earth，简称简称RE）包括原子序数从）包括原子序数从51到到71的镧系元素（的镧系元素（Lanthanoid，简称，简称Ln）的）的15种元素和与种元素和与Ln同族的钪（原子序数同族的钪（原子序数21）和钇（原子序数）和钇（原子序数39）共）共17种元素。种元素。它们具有丰富的光、电、磁等物理特性和化学活性。镧系元素（它们具有丰富的光、电、磁等物理特性和化学活性。镧系元素（Ln）是稀）是稀土的主体，包括有土的主体，包括有15种元素：镧（种元素：

27、镧（La）、铈）、铈(Ce)、镨、镨(Pr)、钕、钕(Nd)、钷、钷(Pm)、钐钐(Sm)、铕、铕(Eu)、钆、钆(Gd)、铽、铽(Tb)、镝、镝(Dy)、钬、钬(Ho)、铒、铒(Er)、铥、铥(Tm)、镱、镱(Yb)、镥、镥(Lu)。 根据根据REE的化学性质及电子结构等特点，通常将其分为两组；一组为的化学性质及电子结构等特点，通常将其分为两组；一组为铈组（也称轻稀土，简称铈组（也称轻稀土，简称Ce），包括），包括La、Ce、Pr、Nd、Pm、Sm、Eu；其它的为钇组（也称重稀土，简称其它的为钇组（也称重稀土，简称Y），包括），包括Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu、Y1。其中。

28、其中Ce、La、Nd、Pr和和Sm占稀土总量的占稀土总量的96%左右左右（铈占（铈占48%，镧占，镧占25%，钕占，钕占16%，镨占，镨占5%，钐占，钐占2%），其它），其它12种元素仅种元素仅占占4%。 近几年研究发现，稀土离子在水解磷酸二酯键、近几年研究发现，稀土离子在水解磷酸二酯键、肽键方面有很好的活性，在合成人工核酸酶、蛋肽键方面有很好的活性，在合成人工核酸酶、蛋白酶方面有很好的应用，是分子生物学和生物化白酶方面有很好的应用，是分子生物学和生物化学中重要的应用工具。学中重要的应用工具。 在生物大分子中普遍存在有肽键和磷酸二酯键，在生物大分子中普遍存在有肽键和磷酸二酯键，而这两种键的键能

29、较高，它们在无天然酶存在时，而这两种键的键能较高，它们在无天然酶存在时，中性温和条件下水解非常缓慢。例如，中性温和条件下水解非常缓慢。例如，GlyGly的中性溶液在的中性溶液在25下，下，350年才能有一半被水解，年才能有一半被水解，而磷酸二酯键则需而磷酸二酯键则需200万年。万年。 有机磷农药残留及水解意义。有机磷农药残留及水解意义。 （二）、开展稀土配合物水解模拟物的意义（二）、开展稀土配合物水解模拟物的意义（三）、稀土配合物的水解作用研究进展（三）、稀土配合物的水解作用研究进展1、稀土配合物的合成Schematicrepresentationofthestructuresofthecom

30、plexes,(a)M-D-glucose;(b)Pr-D-ribose。Schematicrepresentationofthestructuresofthecomplexes,(c)Nd-D-riboseand(d)M-D-maltose(M：ProrNd)。稀土离子对3-单核苷酸的断裂作用要大于5-单核苷酸，断裂机制为水解断裂，并且不同稀土的断裂作用大小为：重稀土轻、中稀土，Ce3+(空气中)对3-核苷酸断裂作用的增强同样是由于反应体系中产生的Ce4+所致。稀土离子对3-单核苷酸的断裂机制，主要是由于RE同时与核苷酸中的2-OH及PO43-形成不稳定的七元环结构，断裂依靠RE一OH亲核进

31、攻PO键来实现（四）、稀土配合物对有机磷农药的水解作用研究（四）、稀土配合物对有机磷农药的水解作用研究进展进展、多糖稀土配合物的结构分析、多糖稀土配合物的结构分析Fuc、Fuc-Ce与Ce的UV扫描图Ce-Lam与Ce（）扫描图Ce-Fuc、Ce及Fuc发射波谱Ce-Lam、Ce（）及Lam发射波谱七、多聚物的仿生催化研究进展七、多聚物的仿生催化研究进展1 1、概述概述仿生催化近几十年发展很快，由此产生了很多生物分子器件。南京大学近二十年来研制了近30多件生物分子器件（传感器），如免疫传感器的检测限可达1013mol/L（科技日报，2002/9/5/11）。2 2、具有仿生催化的多聚物合成、具

32、有仿生催化的多聚物合成2.12.1、分子印迹聚合物合成分子印迹聚合物合成分子印迹聚合物合成是模拟天然酶的结构进行人工合成。分子印迹聚合物合成的理论：Fischerr “锁和钥匙”、Pauling的“抗原-抗体”以及Dickey的“专一性吸附”。2.2、分子印迹聚合物合成的原理、分子印迹聚合物合成的原理选择带有功能基的烯类单体与大量二烯类单体进行共聚合，而功能基团与印迹分子结合，然后除去印迹分子，得到具有除去印迹分子空间构型的孔穴和功能基在孔穴内精确排布的聚合物，从使这类聚合物在分离、分析、免疫测定、催化、及生物传感器等方面应用。2.3、分子印迹聚合物合成常用的方法、分子印迹聚合物合成常用的方法

33、自组装方法：在自组装法的制备中，印迹分子与聚合物单体在交联聚合前先形成共价键结合的化合物，交联聚合反应完成后再将此共价键打开，将印迹分子脱掉，得到分子印迹聚合物。目前常用的结合共健包括：硼酸酯、缩醛酮、酯的螯合键等；常用的单体有：4-乙烯苯硼酸、4-乙烯苯甲醛、4-乙烯苯胺等。预组装方法预组装方法 预组装方法预组装方法中印迹分子与聚合物单体间预先自组织排列，通过非共价键结合（如离子键、氢键、疏水作用等）形成多点相互作用被固定下来，然后除去印迹分子，得到分子印迹聚合物。 常用的非共价型单体有常用的非共价型单体有：丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酰胺、1-乙烯基吡啶等链引发方式：链引发方式：MIP制备过程

34、中的聚合反应是通过自由基，一般以偶氮二异丁腈或偶氮二异庚腈为引发剂，在光照、加热、加压等条件下进行。聚合方法：聚合方法：将印迹分子、功能单体、交联剂和引发剂按一定比例溶解在惰性溶剂中，然后在真空条件下引发聚合一定时间，得到块状聚合物，经粉碎、研磨、筛选得适度粒子，洗脱除去模板，真空干燥即成。Imprinted polymer catalysts for Imprinted polymer catalysts for the hydrolysis ofthe hydrolysis of -nitrophenyl nitrophenyl acetateacetateTransition state

35、 analogue of the hydrolysisDivinylbenzene(DVB) as a cross-linkerAzobis(isobutyronitrile AIBN) as a radical initator DVBAIBNPNAH2O-nitrophenyl nitrophenyl acetateacetateKinetic parameters for the hydrolysis of PNA catalyzed by the network polymersPolymerRatio(PNP:VI:DVB)102obs(min-1)P11:10:101.5P2P21

36、:10:201:10:202.32.3P31:10:301.6P4P40:10:200:10:201.11.1PNP:-nitrophenyl phosphate; VI:vinylimidazole; DVB:divinylbezeneXanthine oxidase biosensor for Xanthine oxidase biosensor for detection of the fish freshnessdetection of the fish freshness 原理：原理：鱼死后体内核酸开始分解而产生次黄嘌呤，且随着时间的延长不断增加。因此，在鱼类质量变化早期，以次黄嘌呤

37、作为检测指标相当灵敏且可靠。 以次黄嘌呤以次黄嘌呤+O2 黄嘌呤黄嘌呤 + H2O2 黄嘌呤黄嘌呤 + O2 尿酸尿酸+ H2O2黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶432178图图 黄嘌呤氧化酶传感器组成黄嘌呤氧化酶传感器组成1酶电极；2反应池；3磁力搅拌器；4-进样口；5蠕动泵；6缓冲液；7废液；8信号处理系统700720740760780800123456710minE(mV)传感器对次黄嘌呤溶液的响应曲线传感器对次黄嘌呤溶液的响应曲线次嘌呤的浓度（mg/L）从下到上依次为10，20，30，40，50鱼肉样品中次黄嘌呤含量测定结果鱼肉样品中次黄嘌呤含量测定结果方 法样 品12345678分光光度法分

38、光光度法6.717.257.3114.1514.56传感器法传感器法9.7510.2510.3411.3610.0912.1819.7519.75壳聚糖铈复合物微粒在苹果汁壳聚糖铈复合物微粒在苹果汁生产的应用研究生产的应用研究 汪东风、于丽娜、苏琳汪东风、于丽娜、苏琳中国海洋大学食品科学与工程学院中国海洋大学食品科学与工程学院引引言言 我国果汁及果汁饮料的生产现状及质量与我国果汁及果汁饮料的生产现状及质量与安全的要求。安全的要求。目前果汁生产中常用的澄清及脱农药残留技术。目前果汁生产中常用的澄清及脱农药残留技术。壳聚糖及铈配合物的功能。壳聚糖及铈配合物的功能。壳聚糖铈配

39、合物微球状树脂应用于苹果汁生壳聚糖铈配合物微球状树脂应用于苹果汁生产的意义。产的意义。1 1 、材料与方法、材料与方法1.11.1、 壳聚糖铈配合物球状树脂的制备壳聚糖铈配合物球状树脂的制备壳聚糖原料壳聚糖原料Ce (NHCe (NH4 4) )2 2(NO(NO3 3) )中国海洋大学专利TXA840扫描电镜1.2 1.2 壳聚糖铈配合物球状树脂的稳定性壳聚糖铈配合物球状树脂的稳定性壳聚糖铈配合物球状树脂壳聚糖铈配合物球状树脂pHpH值（值（1.51.512.012.0）缓冲溶液体系缓冲溶液体系2525下恒温振摇下恒温振摇12h12h蒸馏水反复洗涤解离的铈离子的测定解离的铈离子的测定不同的温

40、度不同的温度（10108080）保温振摇保温振摇12h 12h12h 12h1.31.3壳聚糖铈配合物球状树脂处理方式对果壳聚糖铈配合物球状树脂处理方式对果汁质量的影响汁质量的影响原果汁原果汁 过过 CCGR CCGR 柱柱 与与CCGRCCGR混合振荡混合振荡 滤滤 液液 透光率，澄清度、可溶性固形物、透光率，澄清度、可溶性固形物、总糖含量、蛋白质含量、氨基酸总糖含量、蛋白质含量、氨基酸含量及含量及VcVc含量含量测定1.4 1.4 壳聚糖铈配合物球状树脂在果汁壳聚糖铈配合物球状树脂在果汁生产中的应用生产中的应用青岛海升果业有限责任公司青岛海升果业有限责任公司 可口可乐公司可口可乐公司提供提

41、供 的树脂的树脂壳聚糖铈配合壳聚糖铈配合物球状树脂物球状树脂 车间生产线超滤口苹果汁车间生产线超滤口苹果汁 果汁流出液果汁流出液 透光率、色值、吸光度、糖度、浊透光率、色值、吸光度、糖度、浊度和甲胺磷及甲基对硫磷残留量度和甲胺磷及甲基对硫磷残留量 测定2.结果与讨论结果与讨论 2.1 2.1 壳聚糖铈配合物微球树脂有效好的酸碱及热稳定性壳聚糖铈配合物微球树脂有效好的酸碱及热稳定性01231.5345789101112pH值铈含量（mg/g）在在pH12.0pH12.0和和pH1.5pH1.5时，树脂中的时，树脂中的CeCe4 4含量与含量与pH7.0pH7.0相比，相比，分别减少较少。因此，有

42、较宽的分别减少较少。因此，有较宽的pHpH适宜范围。适宜范围。 012341020304050607080温度（）铈含量（mg/g） 在常温范畴内（在常温范畴内（10104040）CCGRCCGR中中CeCe4 4含量变化不大，含量变化不大，高于高于5050情况下使用该树脂，其结构可能遭到了破坏。情况下使用该树脂，其结构可能遭到了破坏。2.2 2.2 用用CCGRCCGR柱处理果汁，可明显提高果柱处理果汁，可明显提高果汁质量汁质量 总糖（g/100m）还原糖(mg/ml)蛋白质(ug/ml）氨基酸(ug/ml)原果汁4.690.088.770.05152.080.33447.870.829过柱4.630.058.530.0475.300.30486.890.229混合3.780.058.520.0377.500.24434.211.399 蛋白质有较大减少，过柱方式氨基蛋白质有较大减少，过柱方式氨基酸增加较多；其它成分变化不大酸增加较多；其它成分变化不大 Vc(ug/ml)可溶物可溶物(Brix)(Brix)透过率（）透过率（）原果汁原果汁1.3850.0130.0134.259.9过柱过柱1.1391.1390.0350.03混合混合0.4800.4800.0230.095.40.2