水中的大熊猫

1、“水中的大熊猫水中的大熊猫”中国一级重点保护动物中国一级重点保护动物世界世界12种最濒危动物之一种最濒危动物之一白鳍豚白鳍豚利用植物细胞可利用植物细胞可以培育成植物体，以培育成植物体，那么，你能否利那么，你能否利用动物细胞大量用动物细胞大量繁殖动物体，从繁殖动物体，从而保护这些濒危而保护这些濒危动物呢？动物呢？ 2.2 动物细胞工程(基础基础)2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. . 动物细胞培养动物细胞培养（1）需分散成单个细胞；）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是）动物细胞培养的实质是细胞增殖。细胞增殖

2、。2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养1.1.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？2.2.为什么要将组织块分散成单个细胞？为什么要将组织块分散成单个细胞？3.3.如何将组织块分散成单个细胞？由此可说明细胞间的物质是什么成份？用胃如何将组织块分散成单个细胞？由此可说明细胞间的物质是什么成份？用胃蛋白酶行吗？为什么？胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？蛋白酶行吗？为什么？胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？4.4.动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？动物

3、细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？5.5.培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？如此时细胞数量并未达培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？到人们的需求，应该怎样办？6.6.什么叫细胞贴壁？什么叫细胞的接触抑制？什么叫细胞贴壁？什么叫细胞的接触抑制？6.6.如何理解原代培养和传代培养？如何理解原代培养和传代培养？7.7.传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？8.8.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？9.9.动物细胞培养能否像绿色

4、植物组织培养那样最终培养成新个体？动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？取动物组织块取动物组织块剪碎组织剪碎组织用胰蛋白酶处理用胰蛋白酶处理分散成单个细胞分散成单个细胞制成细胞悬液制成细胞悬液转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液个细胞，制成细胞悬液转入培养液中转入培养液中进行传代培养进行传代培养放入二氧放入二氧化碳培养化碳培养箱中培养箱中培养2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞

5、动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养(1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？动物细胞培养材料？(2)为什么要将组织块分散成单个细胞？为什么要将组织块分散成单个细胞？成块的组织细胞靠在一起成块的组织细胞靠在一起, ,彼此限制了细胞的生长和增殖彼此限制了细胞的生长和增殖2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细

6、胞培养(3)如何将组织块分散成单个细胞？如何将组织块分散成单个细胞？(4)由此可说明细胞间的物质是什么成份？由此可说明细胞间的物质是什么成份？(5)用胃蛋白酶行吗？为什么？用胃蛋白酶行吗？为什么？(6)胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？胰蛋白酶会不会将细胞消化掉呢？为什么？先用剪刀剪碎先用剪刀剪碎, ,后用蛋白酶处理后用蛋白酶处理 细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适pHpH不同，而正常组织不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适pHpH较接近较接近不会，因为胰蛋白酶处理时间

7、短暂不会，因为胰蛋白酶处理时间短暂2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养细胞贴壁细胞贴壁细胞的接触抑制：细胞的接触抑制：当贴壁当贴壁细胞分裂生长到表面相互细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分接触时，细胞就会停止分裂增殖裂增殖2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养(7)动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？(8)培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？(9)如此时细胞数量并未达到人们的需求，应

8、该怎样办？如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖易于培养细胞贴壁，进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖就会停止分裂增殖将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理分散，将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理分散，摇晃，继续培养摇晃，继续培养2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养(10)如何理解原代培养和传代培养？如何理解原代培养和传代培养？(11)传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下去？传代培养的细胞能一直传代下去吗？有些为何能一直传下

9、去？(12)人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？(13)动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？体？动物组织消化后的初次培养就是原代培养，接触抑动物组织消化后的初次培养就是原代培养，接触抑制后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养制后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能，发生突变，朝着癌细胞方向发展不都能，发生突变，朝着癌细胞方向发展保存保存1010代以内的细胞，因为有少部分还发生突变代以内的细胞，因为有少部分还发生突变向癌细胞方向发展向癌细胞方向发展不能，动物细胞培养只能使细胞数目增不能，

10、动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体多，不能发育成新的动物个体生物体生物体内的细内的细胞是生胞是生活在什活在什么样的么样的环境呢？环境呢？2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养（无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液）（无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、 微量元素、动物血清、血浆等）微量元素、动物血清、血浆等）（接近动物体温；（接近动物体温；pH为为7.2

11、7.4）O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5% CO5% CO2 2 ）2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养动物细胞培养液的主要成分是什么？动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？较植物组培培养基有何独特之处？主要成分：主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。素、维生素、血清、血浆等。独特之处有：独特之处有：1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有、成分中有血清、血浆血清、血浆等等2.2.1 动物细胞培养和核移植技术

12、动物细胞培养和核移植技术一一. 动物细胞培养动物细胞培养植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较培养结果培养结果培养目的培养目的培养基特有成分培养基特有成分培养基性质培养基性质原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目获得细胞获得细胞或或细胞产物细胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体葡萄糖、血清、葡萄糖、血清、血浆血浆蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖 巩固训练巩固训练1.1.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ） A A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的二倍体细胞的传代培养次数通常是无限