院内感染监测与操作

1、 院内感染监测与操作院内感染监测与操作 医院感染又称医院内获得性感染，指患者在入院时既不存医院感染又称医院内获得性感染，指患者在入院时既不存在，又不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包括在医院在，又不处于潜伏期，而在医院内发生的感染，包括在医院获得而于出院后发病的感染。获得而于出院后发病的感染。一、医院感染的定义 1、 外源性感染又称交叉感染，病原体来自患者体外，即来自外源性感染又称交叉感染，病原体来自患者体外，即来自其他住院患者、医务人员、陪护家属和医院环境等。其他住院患者、医务人员、陪护家属和医院环境等。 2、 内源性感染又称自身感染，病原体来自患者自身贮菌库内源性感染又称自身感染，病原体

2、来自患者自身贮菌库（皮肤、鼻咽口腔、泌尿生殖道、肠道）的正常菌群或外来（皮肤、鼻咽口腔、泌尿生殖道、肠道）的正常菌群或外来的定植菌。在医院中当人体免疫功能下降、体内微生态环境的定植菌。在医院中当人体免疫功能下降、体内微生态环境失衡或发生细菌易位时即可发生感染。失衡或发生细菌易位时即可发生感染。二 、 医院感染的分类 医院感染可发生在与医院相关的人群中，如门诊和住院患医院感染可发生在与医院相关的人群中，如门诊和住院患者、医务人员、陪护家属、探视者等均可发生。者、医务人员、陪护家属、探视者等均可发生。 三、医院感染的对象1、手的微生物监测、手的微生物监测 采样时间：在接触患者或从事医疗活动前进行。

3、采样时间：在接触患者或从事医疗活动前进行。 采样方法：被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水的棉拭子采样方法：被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水的棉拭子一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两遍（一只手涂擦一支在双手曲面从指根到指端来回涂擦各两遍（一只手涂擦面积约面积约30 c ），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有位，将棉拭子放入装有5ml采样液的试管内送检。采样面积采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米按平方厘米 (c ) 计算。计算。四、医院感染监控中常用的检测方法细菌菌落总数检查：细菌菌落总数检查： 1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通

4、营养采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂培养，放琼脂培养，放35温箱内温箱内2448 h计数菌落。计数菌落。 手细菌菌落总数（手细菌菌落总数（cfu/ c ）= 平板上菌落数平板上菌落数采样液稀释倍数采样液稀释倍数 30X2（ cfu：是菌落形成单位，将稀释后的一定量的菌液通过涂布：是菌落形成单位，将稀释后的一定量的菌液通过涂布的方法，让其内的微生物单细胞分散在琼脂平板上，待培养的方法，让其内的微生物单细胞分散在琼脂平板上，待培养后，每一活细胞就形成一个菌落。后，每一活细胞就形成一个菌落。 就表示每毫升菌液中含有就表示每毫升菌液中含有多少单细胞。）多少单细胞。）采样时间：消毒处理后采样时间：消

5、毒处理后4 h内采样。内采样。采样面积：被采表面采样面积：被采表面30 ，设，设东、西、南、北、中东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙点，其中东、西、南、北点均距墙1m。采样方法：用采样方法：用9cm直径的普通营养琼脂平板，在采样点将平板直径的普通营养琼脂平板，在采样点将平板盖打开，把盖子扣在平板的边缘上，暴露盖打开，把盖子扣在平板的边缘上，暴露5 min后送检培养，后送检培养，每个被监测的房间菌落数以平均数计算。每个被监测的房间菌落数以平均数计算。 3、空气消毒效果的监测1、采样时间、采样时间 类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前取样；类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前取

6、样；、类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前取样。前取样。2、检测方法、检测方法 类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照GB50333医院洁净手术部建筑技术规范医院洁净手术部建筑技术规范要求进行检测要求进行检测。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。检测时将采样器置于室中央的空气采样器。检测时将采样器置于室中央0.8m-1.5m高度高度，按采样器使用说明书进行操作。每次采样时间不应超过，按采样器使用说明书进行操作。每次采

7、样时间不应超过30min。房间大于。房间大于10 者，每增加者，每增加10 增设一个采样点。增设一个采样点。 、类环境采用平板暴露法类环境采用平板暴露法 室内面积室内面积30 ，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1M处；室内处；室内面积面积30 ，设，设4角及中央角及中央5点，点，4角的布点部位应距墙壁角的布点部位应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿（处。将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样）放置各采样点，采样高度为距地面高度为距地面0.8m-1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（皿旁，暴

8、露规定时间（ 类环境暴露类环境暴露15min， 、类环类环境暴露境暴露5分钟）后盖上平皿盖及时送检。分钟）后盖上平皿盖及时送检。 将送检平皿置将送检平皿置36 1 恒温箱培养恒温箱培养48h，计数菌落数，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。必要时分离致病性微生物。3、结果计算、结果计算 平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：cfu/皿皿暴露时间。暴露时间。 各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数1. 类区域类区域-洁净手术室洁净手术室(分成分成4个等级个等级)： 特别洁净手术室特别洁净手术室手术手术区区0.2个

9、个/30min90皿，周边区皿，周边区0.4个个/30min90皿皿 ； 标准洁净标准洁净手术室手术室手术区手术区0.75个个/30min90皿，周边区皿，周边区1.5个个/30min90皿皿；一般洁净手术室一般洁净手术室手术区手术区2个个/30min90皿，周边区皿，周边区4个个/30min90皿皿 ； 准洁净手术室准洁净手术室手术区手术区5个个/30min90皿皿 ； 2. 类区域类区域:非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房重症监护病房、血液病管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房重症监护病房

10、、血液病病区空气中的细菌菌落总数病区空气中的细菌菌落总数4cfu（15min直径直径9cm平皿）。平皿）。3. -IV类区域：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治类区域：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数空气中的细菌菌落总数4cfu/(5min直径直径9cm平皿平皿)。 新规范的检测单位复杂，分别为：新规范的检测单位复杂，分别为

11、：XXcfu/(5min直径直径9cm平皿平皿)、XXcfu(15min直径直径9cm平皿平皿)、XXcfu/(30min直径直径9cm平皿平皿)。不同的区域采样时间的。不同的区域采样时间的要求是不相同的，参考范围也不相同的。所以，在送检要求是不相同的，参考范围也不相同的。所以，在送检的空气平板上必须标明采样的地点和时间。的空气平板上必须标明采样的地点和时间。（原参考范围：（原参考范围：类区域类区域 细菌总数细菌总数10cfu/,类区域类区域 细菌总数细菌总数200cfu/ ,类区域类区域 细菌总数细菌总数500cfu/ ） a、层流手术室采样布点在地面上或不高于地面、层流手术室采样布点在地面

12、上或不高于地面0.8m的任意的任意 高度上。高度上。 层流手术室空气监测细菌菌落数，以沉降法为标准：层流手术室空气监测细菌菌落数，以沉降法为标准：级特别洁净手术室手术区的菌落数是级特别洁净手术室手术区的菌落数是0.2个个/30min；周边；周边区是区是0.4个个/30min ；级标准洁净手术室手术区的菌落数是级标准洁净手术室手术区的菌落数是0.75个个/30min；周边；周边区是区是1.5个个/30min 级一般洁净手术室手术区的菌落数是级一般洁净手术室手术区的菌落数是2个个/30min；周边区；周边区是是4个个/30min 级准洁净手术室手术区的菌落数是级准洁净手术室手术区的菌落数是5个个/

13、30min；周边区是；周边区是5个个/30min 。层流手术室空气监测层流手术室空气监测b、 层流手术室空气监测细菌菌落数卫生标准（表）层流手术室空气监测细菌菌落数卫生标准（表） 手术室分类手术室分类 卫生标准（以沉降法为标准）卫生标准（以沉降法为标准） 手术区手术区 周边区周边区 级特别洁净手级特别洁净手术室术室 0.2个个/30min 0.4个个/30min 级标准洁净手级标准洁净手术室术室 0.75个个/30min 1.5个个/30min 一般洁净手术一般洁净手术室室 2个个/30min 4个个/30min 级标准洁净手级标准洁净手术室术室 5个个/30min 5个个/30min c、百

14、级手术间每间至少需要平板13个，暴露时间为30分钟。手术区周边区d、千级手术室每间至少需要平板、千级手术室每间至少需要平板5个，暴露时间为个，暴露时间为30分钟分钟。手术区周边区e e、万级手术室，每间至少需要、万级手术室，每间至少需要3 3个，暴露时间为个，暴露时间为3030分钟分钟。手术区周边区f、 层流手术室空气监测沉降法空气采样选择平皿数（表）层流手术室空气监测沉降法空气采样选择平皿数（表）被测区域洁净度级别 最少培养皿数（9cm，以沉降30min计） 100131000510000310000023000002采样时间：采样时间： 采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。采取更换前

15、使用中的消毒剂与无菌器械保存液。 请抽取被检样品请抽取被检样品5ml送检送检醇类和酚类消毒剂用普通营养肉汤作稀释液。醇类和酚类消毒剂用普通营养肉汤作稀释液。含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒液需在肉汤内加入含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒液需在肉汤内加入0.1%硫代硫酸钠作稀释液。硫代硫酸钠作稀释液。季铵盐类消毒液需在肉汤中加入季铵盐类消毒液需在肉汤中加入3% Tween 80和和0.3卵磷脂卵磷脂作稀液。作稀液。含有表面活性剂的各种复方消毒剂需在肉汤中加入含有表面活性剂的各种复方消毒剂需在肉汤中加入3Tween 80作稀释液。作稀释液。4 消毒剂和无菌器械保存液的微生物学监测消毒剂和无

16、菌器械保存液的微生物学监测细菌菌落总数检查：细菌菌落总数检查： 分别取分别取1ml采样液放入采样液放入2只灭菌平皿内，用普通营养琼脂只灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，将平板放作倾注培养，将平板放37温箱内培养温箱内培养48 小时计数菌落。小时计数菌落。 平板上有菌生长，证明被检样液有残存活菌，若每个平平板上有菌生长，证明被检样液有残存活菌，若每个平板菌落数在板菌落数在10个以下，仍可用于消毒使用（但不能用于灭个以下，仍可用于消毒使用（但不能用于灭菌）；若每个平板菌落数超过菌）；若每个平板菌落数超过10个，说明每毫升被检样液含个，说明每毫升被检样液含菌量已超过菌量已超过100个，不宜再用。

17、个，不宜再用。 a、 所有蒸汽和环氧乙烷气体的灭菌器至少每周所有蒸汽和环氧乙烷气体的灭菌器至少每周1次用活芽胞次用活芽胞杆菌作灭菌效果评价，干热灭菌每月监测杆菌作灭菌效果评价，干热灭菌每月监测1次。次。采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。布点方法：小型灭菌器选布点方法：小型灭菌器选1个包装物品放入指示剂，置最底层个包装物品放入指示剂，置最底层中央；中型灭菌器选中央；中型灭菌器选3个包装物品放入指示剂，上层中央放个包装物品放入指示剂，上层中央放一个，下层前后各一个；大型灭菌器选一个，下层前后各一个；大型灭菌器选5个包装物品放入指个包装物品放入指示剂，上、中

18、层中央各放示剂，上、中层中央各放1个，下层前、中、后部各放个，下层前、中、后部各放1个。个。监测方法：采用卫生部批准的化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌监测方法：采用卫生部批准的化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC 7953、ATCC 12980或或SSIK31株）作为生物指示株）作为生物指示剂剂 。5、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测b 、环氧乙烷气体灭菌的效果监测、环氧乙烷气体灭菌的效果监测 （1）采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。）采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。 （2）监测方法：用环氧乙烷灭菌指示片）监测方法：用环氧乙烷灭菌指示片 ，其由红色变，其由红色变

19、成蓝色表示灭菌完全。成蓝色表示灭菌完全。 枯草芽胞杆菌黑色变种（枯草芽胞杆菌黑色变种（ATCC 9372）作为生物指示剂。）作为生物指示剂。 紫外线灯管辐射强度值的测定：紫外线灯管辐射强度值的测定： 1、开启紫外线灯、开启紫外线灯5min后，按说明书操作，将测定波长为后，按说明书操作，将测定波长为253.7 nm的紫外线强度测定仪（指定有效期内）探头置被的紫外线强度测定仪（指定有效期内）探头置被检紫外线灯下垂直检紫外线灯下垂直1m的中央处，仪表稳定后所示数据即为的中央处，仪表稳定后所示数据即为紫外线灯管的辐射强度值。其中紫外线灯管的辐射强度值。其中30W直管型紫外灯新灯管辐直管型紫外灯新灯管辐

20、射强度值射强度值90微瓦微瓦秒秒/ c ，使用中辐射强度值，使用中辐射强度值70微瓦微瓦秒秒/ c ； 150W高强度紫外线新灯的辐射强度值高强度紫外线新灯的辐射强度值200微瓦微瓦秒秒/ c 。70微瓦微瓦秒秒/ c 。 6、紫外线消毒效果监测、紫外线消毒效果监测 2、紫外线强度指示卡监测法（四环、紫外线强度指示卡监测法（四环R牌）牌）【性能与原理性能与原理】紫外线强度指示卡由紫外线光敏色块、标准色紫外线强度指示卡由紫外线光敏色块、标准色块和卡片纸组成。块和卡片纸组成。 紫外线光敏色块以涂有聚乙烯膜的卡片纸为片基，将对波紫外线光敏色块以涂有聚乙烯膜的卡片纸为片基，将对波长长253.7nm的紫

21、外线敏感的化学物质和辅料均匀的涂布于片的紫外线敏感的化学物质和辅料均匀的涂布于片基上制成涂料卡，并粘贴在卡片纸中央制成。标准色块的辐基上制成涂料卡，并粘贴在卡片纸中央制成。标准色块的辐照强度值分别为照强度值分别为90微瓦微瓦秒秒/ c和和70微瓦微瓦秒秒/ c ，印制在，印制在紫外线光敏色块的两侧。受到规定波长的紫外线照射后，光紫外线光敏色块的两侧。受到规定波长的紫外线照射后，光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色。敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色。【使用范围使用范围】检测紫外线灯辐照强度值（检测紫外线灯辐照强度值（ 90微瓦微瓦秒秒/ c和和70微瓦微瓦秒秒/ c ）是否达到使用要求。用于紫外线辐照强度值