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文档简介

1、高中生物实验高中生物实验实验一:生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定(一)生物组织中可溶性还原糖的鉴定(一)生物组织中可溶性还原糖的鉴定1 1 实验原理实验原理 当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。 Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖可溶性还原糖共热,能够生成黄红色的Cu2O沉淀。因此,利用该反应,可证明样液中含可溶性还原糖。CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O+2H2O2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性

2、还原糖的基本方法。3 3 实验材料实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验,还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果及其观察的最重要因素。 因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织,其中以苹果、梨最好,也可用白萝卜替代。4 4 试剂配制试剂配制 甲液(0.1g/mL的氢氧化钠溶液)本尼迪特试剂 乙液(0.05g/mL的硫酸铜溶液)甲、乙试剂千万要分开放,不可混合。在实验过程中,将4-5滴乙液滴入2mL甲液中现混现用!5 5 实验步骤实验步骤(1 1)制备组织样液(教师制备)制备组织样液(教师制备)(2 2)鉴定样液)鉴定样液先在试管中加入2mL组织样液再加入2mL刚配制的斐林试剂水

3、浴煮沸2分钟注意观察整个实验注意观察整个实验过程中,溶液颜色过程中,溶液颜色的变化!的变化!(二)生物组织中脂肪的鉴定(二)生物组织中脂肪的鉴定1 1 实验原理实验原理 苏丹是可以对脂肪染色的试剂,因此,当含有大量油滴的植物细胞用苏丹染色后,在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。2 2 实验目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中脂肪的基本方法3 3 实验材料实验材料 做脂肪的鉴定实验时,所用材料一要脂肪含量高,二要有一定大小才能做徒手切片,花生种子符合该实验的要求。 将花生种子经过3-4小时的浸泡使其变软,有利于切成薄片;但浸泡时间也不宜过长,否则切片时易碎裂,切不成薄片。4 4 试剂配制试剂配

4、制 苏丹溶液:将0.1g苏丹干粉溶于100mL体积分数为95%的酒精溶液中,待全部溶解后即成。5 5 实验步骤实验步骤(1 1)切片制作)切片制作去掉花生种皮用左手的三个手指夹住花生的一片子叶,使花生子叶高于手指之上(为什么?为什么?)。右手持刀片,将子叶削去一层,形成平面。刀口向内,与花生断面平行,以均匀的动作,自左前方向右后方快速拉刀,滑行切片(注意注意要整个臂部用力,而不要腕部用力。要整个臂部用力,而不要腕部用力。)如此连续动作,切下一些薄片。(2 2)染色)染色 用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央滴苏丹溶液2-3滴于花生子叶薄片上2-3min后,吸去染液滴50%的酒精洗去浮

5、色吸去多余酒精再滴1-2滴蒸馏水盖上盖玻片,制成临时装片。(3 3)镜检鉴定)镜检鉴定 在低倍镜下观察,找到花生子叶切片的最薄处(),移至视野的中心换用高倍镜观察,调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒,这就是脂肪滴(油滴)。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒,则是脂肪跑了出来。(三)生物组织中蛋白质的鉴定(三)生物组织中蛋白质的鉴定1 1 实验原理实验原理 在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与Cu 2+作用,形成紫色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。 由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。2 2 实验

6、目的实验目的 初步掌握鉴定生物组织中蛋白质的基本方法。4 4 试剂配制试剂配制 A液(0.1g/mL的氢氧化钠溶液)双缩脲试剂 B液(0.01g/mL的硫酸铜溶液)3 3 实验材料实验材料 做蛋白质的鉴定实验,一般选用蛋白质含量较高的大豆或鸡蛋白。5 5 实验步骤:实验步骤:(1 1)制备生物组织样液(教师制备)制备生物组织样液(教师制备)(2 2)鉴定)鉴定先加2mL组织样液再加2mL双缩脲试剂A液加3-4滴双缩脲试剂B液注意观察溶液中颜色的变化?课堂练习课堂练习1、下列关于实验一操作步骤的叙述中,正确的是( ) A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定 B、脂肪

7、的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C、鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液 D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现混现用 2、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择叙述中,错误的是 ( ) A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料 C、大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D、鸡蛋清含蛋白质多,是进行蛋白质鉴定的动物材料 3、将三个鉴定实验与其使用的试剂和结果之间用直线连接起来。

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