DNA的粗提取与鉴定实验教学设计说明

1、DNA 的粗提取与鉴定实验一、教学背景分析【教材分析】生物体的性状之所以能够遗传给后代，是由于生物体具有DNA 或 RNA 这些遗传物质。通过必修 2遗传与进化的学习，学生已经学习了证明 DNA 是主要的遗传物质的实验证 据。那么DNA 究竟是什么样的呢？本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA1行粗提取，了解 DNA 的物理化学性质，理解 DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理，使学生对 DNA 有一定的 感性认识。“ DNA 勺粗提取与鉴定实验”在普通高中生物课程标准和考试大纲对实验容考查 的要求中属 D 级要求，新课标强调能力培养，高考对实验能力的考核比重也逐年加大。学 生通过本次实验探

2、究活动，可进一步提高动手能力和创新能力。【学情分析】通过必修 2遗传与进化的学习，学生已经了解了证明 DNA 是主要的遗传物质的实 验证据，知道生物体的形状之所以能够遗传给后代，是由于生物体具有 DNA 或 RNA 这些遗 传物质。通过本课题的学习，使学生对 DNAt一定的感性认识。二、教学目标【知识目标】本实验通过尝试对植物或动物组织中的 DNA1行粗提取，了解 DNA 的物理化学性质， 理解DNAE提取方法以及 DNA 鉴定的原理容。【能力目标】1. 实验中能运用已有的知识，选择实验材料用具；2. 通过具体的材料，学生尝试课题研究，体验科学探究的一般过程。3. 初步掌握 DNA 的粗提取和

3、鉴定的方法4. 在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。5. 熟悉粗提取生物大分子的的一般性方法【情感态度与价值观目标】1. 通过小组之间的分工合作，逐渐养成协作精神；2. 通过科学与数学的整合，逐渐形成简约、严谨的思维品质；3. 在实验过程中培养学生严谨细致、实事求是的科学态度三、教学重难点【教学重点】DNA 的粗提取与鉴定方法及其相关原理【教学难点】DNA 勺粗提取与鉴定方法及其相关原理四、实验实施准备【教师准备】1. 分组。学生平均分配，两人一组。2. 实验用具。移液管、烧杯、滴管、玻璃棒、研钵、冰箱、湿纱布、试管、离心机、水浴锅等。3. 材料。加抗凝剂勺鸡血4. 实验试

4、剂。 0.1g/mL 柠檬酸钠 蒸馏水 2mol/L 无水乙醇 二苯胺试剂 【学生准备】1. 预习实验“ DNAB提取和鉴定”，初步了解 DNA 勺理化性质和基本形态特征。2. 进行分组。3. 查阅资料，了解 DNA 勺取样的方法和来源4.通过课前准备，学生进一步提高学习兴趣，再次激发实验探究勺热情；较大程度上 节省了课堂时间；为探究实验勺成功打基础。五、 教学方法【教法】 任务驱动法、直观演示法【学法】 自主学习法、合作交流法 动手操作法六、 教学媒体黑板、多媒体计算机七、课时安排该实验勺操作简单，不需要大量繁杂勺实验培养，调查等实验步骤，故两个课时就可 超额完成。八、教学过程程序 及时 间

5、安排教师行为预设学生活动设计意图引入引入主题：我们已经学习了 DNA 勺有关学习，这节课，倾听思开门见山，实验我们一起学习“ DNA 勺粗提取与鉴定”实验技术。考使学生明白教学板书：DNA 勺粗提取与鉴定DNA 提取技5minDNA 勺提取技术是整个基因工程技术基础。无论人类术的重要阿波罗计划”的人类基因组计划以及熟知的亲子鉴定，思考、回答问性，激发学DNA 提取技术都是其中基础的基础。对于 DNA 我们只 在书本中了解它，但是接下来我们将亲手提取出细胞的 DNA 并做鉴定实验。题生学习的兴趣及探究热情， 主动思 考回顾基础知 识DNA这节课，我们一起学习 DNA 勺粗提取与鉴定技术。使学生明

6、白粗提首先，我们应该选取合适的实验材料为什么要选取和问题：教材中列举了很多中材料，请你从中选出 2-3 种。回答、思考用鸡血细胞定的原则：凡是含有 DNA 的生物材料都可以考虑，但是，选液为材料，实验用 DNA 含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。深对探究性步骤：那么教材中选择鸡血细胞液作为实验材料，而相对于其实验的过程(50他材料鸡血细胞液，有什么优点呢？及原则的理分钟）1.鸡是真核生物，真核生物的 DNA 都在染色体上。2. 鸟类的血细胞核大，DNA 多 （从核 DNA 数目来看，猪38 条，鸡 78 条，哺乳动物血 0 条，猕猴桃 58 条，洋葱 16条，豌豆 14 条，菠菜 12

7、 条，大肠杆菌 1 条）3. 不需要破除细胞壁选用鸡血细胞液还有一个好处一一鸡血比较容易获得，那么我们为什么不用哺乳动物的红细胞呢？哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核解冋题：鸡血细胞液可以直接用吗？柠檬酸钠抗凝破碎 细胞， 释放DNA问题：鸡血细胞虽然没有细胞壁，但是依然有细胞膜， 以你所学的知识，有什么比较简便但是可行的方法可以 破碎细胞膜？生物会考的实验是质壁分离，你还记得方法和原理吗？所以为了破碎鸡血细胞，我们可以反其道而行之，在鸡 血细胞液中加入一定量的蒸馏水，使其吸水胀破，达到 破碎细胞的目的。加入蒸馏水的同时，要用玻璃棒进行搅拌方法：单向，快速，5mi n，速度力量不要过于猛烈，防 治

8、打碎 DNA目的：加速血细胞破裂问题：这是我们获得的将是含有细胞膜、细胞器的碎片 液体，我们如何初步获得含有 DNA 勺液体？过滤可以用滤纸过滤吗？不可以，孔径太小。需要用到 3-4 层纱布，除去一些颗 粒较大的杂质，获得含有 DNA 勺滤液。这时 DNA 在哪里？滤液里。板书：破碎细胞，释放 DNA 对于动物细胞我们可以利用细胞的渗透压来破碎细胞， 但是很多情况下，人们不得不面对植物材料，那么我们 是不是还可以通过加入一定量的蒸馏水来涨破细胞 呢？植物细胞有细胞壁的支持和保护，因此吸水不会涨破。 我们通常通过研磨来破碎植物细胞的细胞壁。在研磨的过程中，一般还会加入洗涤剂和食盐。洗涤剂的作用：

9、洗涤剂也分为亲水基团和亲脂基团，可以与细胞膜中的 蛋白质结合，使之溶解，进而瓦解细胞膜。食盐的作用：食盐中主要含有 NaCI，有利于 DNA 的溶解学生回答讨论、思考使学生知道破碎动物细胞的方法和原理， 激发 学生的探究 思维去除 滤液 中的杂质冋题：这时的滤液可能含有哪些细胞成分？主要有 RNA 核蛋白、多糖等那么我们应该如何将 DNA 单独分离出来？板书：去除滤液中的杂质提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学 方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA 的粗提取而言，就是要利用 DNA 与 RNA 蛋白质和 脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA 去除其他成分。背

10、景介绍；DNA 的溶解性图片：DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线问题：在什么浓度下， DNA 勺溶解度最小？ DNA 在 NaCl 溶液中 的溶解度是如何变化的？在 NaCl 溶液浓度低于 0.14 mol/L 时 DNA 的溶解度随 NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在 0.14 mol/L 时， DNA 溶解度最小；当 NaCl 溶液浓度继续增加时，DNA 的 溶解度又逐渐增大。如何通过控制 NaCl溶液的浓度使 DNA在盐溶液中溶解 或析出？当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol /L 时，DNA 的溶解 度最大，浓度为 0 14 mol/L 时，DNA 的溶解度最低。 利用这一原理

11、，可以使 DNA 在盐溶液中溶解或析出为什么反复地溶解与析出 DNA 能够去除杂质？ 用高浓度的盐溶液溶解 DNA 能除去在高盐中不能溶解 的杂质；用低盐浓度使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶 液中的杂质。第一步：在浓度较高的 NaCl 溶液溶液中核蛋白容易解聚，游离 出的DNA 溶解在溶液中。方法： 在溶液中加入两倍体积的浓度为 2mol/L 的 NaCl 溶液，用玻璃棒沿一个方向搅拌 1min,使 DNA 充分溶解。板书： （1）溶解细胞核的 DNA第二步：加蒸馏水降低 NaCl 溶液浓度，使 DNA 析出。方法：缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向不停 地均匀搅拌，以利于 DNA 分

12、子的附着和缠绕。同时应注 意控制加水量，使 NaCl 溶液的终浓度为 0.14mol/L，直 到溶液中丝状物不再增加时为止。板书：（2） DNA 勺析出在刚才实验中我们利用 DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶思考、回答观看思考并回答使学生懂得DNA 的提取分离纯化方法以及使学生掌握盐析法的原理与方法解度不同的特性，去除杂质。DNA 析出为止DNA的初 步纯 化们刚才说了 DNA 提取技术是分子生物学技术的基础， 但 如果提取的 DNA 量不够且其中含有较多杂质，是无法用 于其它操作的。所以我们必须对 DNA 进行进一步的纯化。 原理也是 DNA 的溶解性。背景介绍：DNA 不溶于酒精溶液，

13、但是细胞中的某些蛋白质则溶于 酒精。在实验中，我们可以使用预冷的酒精，使 DNA 能 够更好地凝结方法：将 DNA 粘稠物再溶解， 继续用 2mol/L 的 NaCI 溶液 20mL 溶解 DNA 黏稠物，仍旧沿一个方向不停搅拌 3min,使 DNA 充分溶解。过滤：用 34 层纱布进行过滤， 滤去杂质， 收集含有 DNA 的滤液。纯化：向滤液中贴壁缓慢加入 50mL 预冷的体积份数为 95%乙醇，并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌， 溶液中会出现 DNA 丝状物。板书：DNA 的初步纯化 预冷的酒精具有以下优点：1.抑制核酸水解酶活性，防止 DNA 降解2降低分子运动，易于形成沉淀析出3低

14、温有利于增加 DNA 分子柔韧性，减少断裂观看思考、讨论、回答思考思考、讨论DNA的鉴疋原理介绍：二苯胺法在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺变蓝。 方法：溶解：在物质的量浓度为 2mol/L 的 NaCI 溶液 5mL 放 入丝状物，用玻璃棒搅拌，使之溶解。显色：加入 4mL 的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置 于沸水中加热 5min。冋题：如果溶液变蓝是否能说明 DNA 的存在？设置对照组： 在 5mL 体积的 2moI/L 的 NaCI 溶液中加入 4mL的二苯胺试剂，置于沸水中加热 5mi n。对比：除了可以使用二苯胺法，还有什么方法可以鉴定 DNA用甲基绿溶液直接滴在有 DNA 丝状物

15、的载玻片或玻棒 上，呈蓝绿色反应。只用一种即可，不混合用。前者要 加热，后者不加热板书：DNA 的鉴定思考、讨论、回答使学生知道DNA 鉴定的原理和方法结束部分10mi n我根据所需分离物质与其他物质物理或者化学性质的 不同，来提取生物大分子物质。 而通过今天的学习， 我 们知道 DNAt以下物理或者化学的特性是与其他生物大 分子物质不同的：在 NaCI 溶液浓度低于 0.14 moI/L 时， DNA 的溶解度随 NaCI溶液浓度的增加而逐渐降低；在 0.14 moI/L 时，DNA 溶解度最小；当 NaCI 溶液浓度继续增加时，DNA 的 溶解度又逐渐增大。DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶 于酒精。利用这一原理，可以将 DNA 与蛋白质进一步分 离蛋白酶能水解蛋白质，但是对 DNA 没有影响大多数蛋白质不能忍受 60-80 C 的高温，而 DNA 在 80 C以上才会变性洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质，但对 DNA 没有影响思考、做笔记总结知识点， 扩展同 学的知识， 培养他们探 究其他牛命 物质的渴望在沸水浴的条件下，DNAS二苯胺变蓝。因此，我们可以设计实验，通过破碎细胞，释放DNA溶解细胞核的 DNADNA 勺析出DNA 勺初步纯化DNA的鉴定完成 DNA 勺粗提取与鉴定 视频：DNA 勺粗提取与鉴定板书设计D