第3章 免疫球蛋白

1、 四个近义词四个近义词 具有抗体活性或化学结构与抗体相似的具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。球蛋白。 分泌型：分泌型：存在于体液中，具有抗体的各存在于体液中，具有抗体的各种功能。种功能。 膜型：膜型：B细胞膜上的抗原受体细胞膜上的抗原受体(BCR)。FR1FR2FR3FR4HVR1HVR2HVR3Variability Index257550100氨基酸残基1501005001、IgG 是血清Ig的重要成分，约占总量的75。全身的IgG有4050分布于血清中，其余存在于组织中。 IgG是主要的抗感染抗体，具有三种免疫活性。 （1）激活补体；（2） 促进吞噬；（3） ADCC。 IgG是

2、唯一能通过胎盘的抗体唯一能通过胎盘的抗体，在新生儿抗感新生儿抗感染染过程中发挥重要作用。 临床使用的丙球主要为IgG，作为人工被动免人工被动免疫疫，一般23周注射一次为宜2、IgM IgM是分子量最大分子量最大的Ig 。杀菌作用比大IgG100倍 在种族进化和个体发育过程中，最早合成IgM， 临床诊断意义：胎儿或新生儿血液内出现IgM抗体，提示可能有子宫内感染子宫内感染的可能性；因IgM半衰期较短，若血清中出现IgM特异性抗体，表示有近期感染近期感染。 IgM也是人体天然血型抗体天然血型抗体和B细胞表面的重细胞表面的重要表面标志。要表面标志。证明试验： 二巯基乙醇 (2-ME)可选择性使IgM

3、解离成单体，原有活性大为降低。这是一个简单区分IgM和IgG生物学活性的方法。 3、IgE 正常人血清中含量极低，具高度亲细胞性高度亲细胞性。参与型变态反应，型变态反应，结合嗜酸性粒细胞，有效杀伤杀伤寄生虫寄生虫 4、IgA IgA占血清总含量的13%。血清中IgA以单体存在称血清IgA。分泌型以二聚体形式存在，称为分泌型分泌型IgA。 局部抗感染、新生儿抗感染局部抗感染、新生儿抗感染中发挥作用。 同时可参与补体激活和III型超敏反应。 5、IgD IgD为单体。 IgD含量最低，易被蛋白所降解。 IgD功能尚不清，IgD对防止免疫耐受防止免疫耐受性的发生有一定关系。 二者的结合主要依靠静电引

4、力、氢键、范德华力等，二者的结合主要依靠静电引力、氢键、范德华力等，需要合适的温度、需要合适的温度、pH、离子强度以及完整的抗体，这种、离子强度以及完整的抗体，这种结合是可逆的。结合是可逆的。主要借助胎盘滋养层细胞表面的FcR进行的。2、同种异型（、同种异型（allotype)同一种属中不同个体所产生的同一类型Ig,由于重链或轻链恒定区内一个或数个氨基酸（即遗传标志）不同而表现的抗原性差异同种异型可以为同一物种的某些个体所共有，但绝不会为同一物种的所有个体所共有。3、独特型（、独特型（idiotype)同一个体中不同B细胞克隆所产生的Ig可变区所具有的抗原特异性标志，由Ig超变区特有的氨基酸序

5、列和构型所决定。可变区、抗原结合部位、独特型抗原决定簇是同一物质在不同情况下的不同名字。V(D)J recombinationis initiated by the Recombinase Activator Gene Products, RAG1 and RAG2(found only in developing lymphocytes)During B cell maturation, immunoglobulin genes undergo rearrangement.During B cell maturation, immunoglobulin genes undergo rearr

6、angement.轻链基因的重排、轻链基因的重排、RNA处理和蛋白处理和蛋白质表达的过程质表达的过程In heavy chains, the V, D and J segments encode the variable domain while the C segment encodes the constant domain.In light chains, the V and J segments encode the variable domain whilethe C segment encodes the constant domain.Combinations40 X 530 X

7、 465 X 27 X 6200 +12010,53032010,530X= 3,369,600V(D)J:H/L:Number of gene segments k k 40+5=45l l 30+4=34H 65+27+6=98total gene segments 177The potential diversity generated by V(D)J recombination is virtually infinite.Total lymphocytes in a human1012Genome size3X109 bp已在欧美得到批准上市的治疗用抗体已在欧美得到批准上市的治疗用抗

8、体商品名商品名 类型类型 适应症适应症 靶靶 点点 批准日期批准日期 OKT3 小小 鼠鼠 移植排斥移植排斥 CD3链链 1986 Simulect 嵌合体嵌合体 移植排斥移植排斥 IL2 受体受体 1998 Zenapax 人源化人源化 移植排斥移植排斥 IL2 受体受体 1997 Remicade 嵌合体嵌合体 RA 膜膜 TNF 1998、1999 Rituxan 嵌合体嵌合体 淋巴瘤淋巴瘤 CD20 1997 Herceptin 人源化人源化 乳腺癌乳腺癌 HER2 1998 Reo-Pro 嵌合体嵌合体 抗血小板抗血小板 GpIIb/IIIa 1994 Synagis 人源化人源化

9、RSV 感染感染 RSV 1998 Panorex 小小 鼠鼠 大肠癌大肠癌 17-1A 1995 Mylotarg 人源化人源化 AML CD33 2000 CAMPATH 人源化人源化 CLL CD52 2001 （一）多克隆抗体（一）多克隆抗体(PcAb) 用抗原免疫动物后获得的免疫血清（抗用抗原免疫动物后获得的免疫血清（抗血清）。具有高度异质性血清）。具有高度异质性（由不同克隆的（由不同克隆的B B细胞针对不同抗原决定簇所产生）细胞针对不同抗原决定簇所产生）。 应用：免疫学检测、被动免疫治疗和紧应用：免疫学检测、被动免疫治疗和紧急预防急预防 存在问题：特异性差存在问题：特异性差, ,

10、用于免疫学检用于免疫学检测容易出现交叉反应测容易出现交叉反应二、二、 单克隆抗体单克隆抗体(McAb) 指指一个一个B B细胞针对一个抗原决定簇所产生细胞针对一个抗原决定簇所产生的一种特异性抗体，称为单克隆抗体的一种特异性抗体，称为单克隆抗体 特特高特异性、高均一性、大量产生及稳高特异性、高均一性、大量产生及稳定性定性(GeAb) 根据研究者的意图，采用基因工程方法，根据研究者的意图，采用基因工程方法，在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、拼接或修饰后导入受体细胞进行表达，产拼接或修饰后导入受体细胞进行表达，产生新型抗体。生新型抗体。 主要包括主要包括 嵌

11、合抗体、人源化抗体、小嵌合抗体、人源化抗体、小分子抗体等分子抗体等。（三）基因工程抗体（三）基因工程抗体基基 因因工工 程程抗抗 体体种种 类类基基 因因工工 程程人人 源源化化 抗抗体体 生生产产 示示意意 图图鼠抗体可变区鼠抗体可变区人抗体恒定区人抗体恒定区人鼠嵌合抗体人鼠嵌合抗体人抗体可变区人抗体可变区重构抗体重构抗体与鼠单抗相比，免疫原性大大降低，利于在人体内应用，基基因因工工程程抗抗体体种种类类基基因因工工程程人人源源化化抗抗体体生生产产示示意意图图基因工程人源化抗体生产示意图基基因因工工程程抗抗体体种种类类基基因因工工程程人人源源化化抗抗体体生生产产示示意意图图LLHHVLVHFd

12、FvFabFabFcF（ab）2抗体分子的基本结构和各种分子片段抗体分子的基本结构和各种分子片段小分子抗体小分子抗体 ：Fab片段和重组片段和重组Fab 、Fv和和单单链抗体（链抗体（scFv） 、双特异性抗体（双特异性抗体（diabody） 、单域抗体单域抗体 、最小识别单位最小识别单位 结结 构构 分分子子量量 (Kd) 血血液液廓廓清清 肿肿瘤瘤参参入入 肿肿瘤瘤滞滞留留 IgG 150 + + + + + + F(ab)2 110 + + + + + + + Diabody 60 + + + + + + + + ScFv 30 + + + + + + + + + 免疫毒素免疫毒素CCVCVCCCSPDPSPDPRicin ARicin A（-FcRI-Ricin A）CH1CH2CH3IL-2scFvIL-2 免疫细胞因子免疫细胞因子(Immunocytokine)目前我国抗体药物发展的瓶颈目前我国抗体药物发展的瓶颈规模化动物细胞培养技术规模化动物细胞培养技术工程抗体高效表达系统工程抗体高效表达系统IgIg的异常的异常一一 多克隆高多克隆高IgIg血症血症常见于自身免疫病常见于自身免疫病二二 低（无）免疫球蛋白血症低（无）免疫球蛋白血症 先天性先天性BrutonBruton丙种球蛋白缺乏症丙种球蛋白缺乏症 继发性继发性IgIg缺乏症缺