仪器分析实验考试总结

1、.蚆羇肂莀薂羆膅薅羀羅莇蒈袆羄葿蚃螂羃腿蒆蚈羂芁蚂薄羁莃蒄袃肁肃蚀蝿肀膅蒃蚅聿莈蚈蚁肈蒀薁羀肇膀莄袆肆节蕿螂肅莄莂蚈肅肄薈薄膄膆莀袂膃艿薆螈膂蒁荿螄膁膁蚄蚀膀芃蒇罿腿莅蚂袅腿蒈蒅螁芈膇蚁蚇袄艿蒄薃袃莂虿袁袃肁蒂袇袂芄螇螃袁莆薀虿袀蒈莃羈衿膈薈袄袈芀莁螀羇莃薇蚆羇肂莀薂羆膅薅羀羅莇蒈袆羄葿蚃螂羃腿蒆蚈羂芁蚂薄羁莃蒄袃肁肃蚀蝿肀膅蒃蚅聿莈蚈蚁肈蒀薁羀肇膀莄袆肆节蕿螂肅莄莂蚈肅肄薈薄膄膆莀袂膃艿薆螈膂蒁荿螄膁膁蚄蚀膀芃蒇罿腿莅蚂袅腿蒈蒅螁芈膇蚁蚇袄艿蒄薃袃莂虿袁袃肁蒂袇袂芄螇螃袁莆薀虿袀蒈莃羈衿膈薈袄袈芀莁螀羇莃薇蚆羇肂莀薂羆膅薅羀羅莇蒈袆羄葿蚃螂羃腿蒆蚈羂芁蚂薄羁莃蒄袃肁肃蚀蝿肀膅蒃蚅聿莈蚈蚁肈蒀

2、薁羀肇膀莄袆肆节蕿螂肅莄莂蚈肅肄薈薄膄膆莀袂膃艿薆螈膂蒁荿螄膁膁蚄蚀膀芃蒇罿腿莅蚂袅腿蒈蒅螁芈膇蚁蚇袄艿蒄薃袃莂虿袁袃肁蒂袇袂芄螇螃袁莆薀虿袀蒈莃羈衿膈薈袄袈芀莁螀羇莃薇蚆羇肂莀薂羆膅薅羀羅莇蒈袆羄葿蚃螂羃腿蒆蚈羂芁蚂薄羁莃蒄袃肁肃蚀蝿肀膅蒃蚅聿莈蚈蚁肈蒀薁羀肇膀莄袆肆节蕿螂肅莄莂蚈肅肄薈薄膄膆莀袂膃艿薆螈膂蒁荿螄膁膁蚄蚀膀芃蒇罿腿莅蚂袅腿蒈蒅螁芈膇蚁蚇袄艿蒄薃袃莂虿袁袃肁蒂袇袂芄螇螃袁莆薀虿袀蒈 仪器分析实验总结张龙零 实验课总论重金属的测定:（1）比色法-分光光度计（2）原子吸收法（3）ICP-电感耦合等离子体光谱仪金属元素测定的前处理方法(1)电热酸溶样品(2)微波消解（1）电热酸溶样品

3、：100ml水样，放200ml烧杯内，加5ml硝酸，在电热板加热至10ml，稍冷，加5ml硝酸和1ml高氯酸（如不能加高氯酸，用过氧化氢代替），蒸至近干，加（1+1）3ml硝酸溶解残渣，冷却后，用水定容至100ml（2）查找适宜的微波消解方法。在样品杯中加入一定量（准确称重或称量）样品，按方法定量加入酸，将温度传感器放在有样品、消解酸的合适杯位内，样品杯的排列要注意平衡。有机物的测定： 常规、 经典法：COD测定-分光光度计 热稳定物质，分子量小于300、沸点低于300的有机物：气相色谱法 热不稳定物质的有机物：液相色谱法了解物质的分子结构：红外吸收光谱法物质发生相变、化学变化：热分析进入实验

4、室安全注意事项 有毒、有害物质需在通风柜内操作； 废酸、废碱、废有机物需倒入专用器皿，不能直接倒入下水道。 能通过钢瓶颜色识别气体：灰色氦气；绿色氢气；黑色氮气；蓝色氧气。使用气体前需确认使用气体 使用Milipore超纯水机（特殊用途：液相色谱；离子色谱痕量金属元素）注意事项：先观察供水桶内是否有水，供水桶内有水才可取用。氢气瓶使用注意事项室内必须通风良好，保证空气中氢气最高含量不超过1（体积比）。 建筑物顶部或外墙的上部设气窗或排气孔。排气孔应朝向安全地带，室内换气次数每小时不得少于三次，局部通风每小时换气次数不得少于七次。 设有固定气瓶的支架。 使用气瓶，禁止敲击、碰撞；气瓶不得靠近热源

5、；夏季应防止曝晒。 必须使用专用的减压器，开启气瓶时，操作者应站在阀口的侧后方，动作要轻缓。 阀门或减压器泄漏时，不得继续使用；阀门损坏时，严禁在瓶内有压力的情况下更换阀门。 试剂或异物进入眼内 任何情况都要用大量水洗涤，急救后送医院。 酸：用大量水洗涤，再用1%碳酸氢钠溶液洗。 碱：用大量水洗涤，再用1%硼酸溶液洗。 玻璃：用镊子移去碎玻璃或在盆中用水洗，切勿用手揉动。一 离子色谱部分（热导检测器）1、离子色谱相关思考题：（蓝色为次重要级别，红色为首要重要级别）p 离子色谱与一般意义的高效液相色谱在分离原理、系统构成方面有何异同？p 理解抑制器的工件原理；p 离子色谱检测方法主要有哪些、适合

6、什么情况下选用？1、简述离子交换色谱分析的特点及应用范围。2、简述离子交换色谱“只加水”淋洗的优点。3、简述离子色谱上样前处理要求和方法。1、简述离子交换色谱分析的特点及应用范围。2、简述影响阴离子分析的主要因素。3、简述离子色谱上样前处理要求和方法。2、离子色谱实验大纲部分离子交换分离原理：离子交换色谱是离子色谱中的一种，其分离机制主要是离子交换，是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换，依据这些离子对交换剂有不同的亲和力而被分离。抑制器ASRS-4mm工作原理（用OH-体系）：（1）水进入阳极电离，产生H+，通过阳离子交换膜进入抑制器（中间通道）；

7、（2）OH-携带Cl-、SO42-等进入抑制器，并与H+结合生成HCl，H2SO4等，以离子形式存在，进入检测器检测。（3）剩下的阳离子通过阳离子交换膜，进入并与阴极电离产生的OH-结合，废液排出。（实质是用H+代替其他阳离子进入检测器，因为H+的摩尔电导最高，所以以HCl形式进入电导检测器，能够降低背景电导，从而提高待测离子的灵敏度）。RFIC淋洗液发生器发生原理（KOH淋洗液发生原理）：淋洗液发生器由高压KOH发生室和低压K+电解槽组成。KOH发生室装有一个穿孔的铂金阴极，钾离子电解槽装有一个铂金阳极。KOH发生室通过阳离子交换膜与K+电解槽连接。离子交换连接器允许来自K+电解槽的K+通过

8、并进入高压KOH发生室，而阻止来自K+电解槽的其他阴离子进入。离子交换连接器将高压KOH发生室与低压K+电解槽隔开，泵驱动去离子水通过KOH发生室，在正负极之间加上直流电压，水在正极和负极发生电解，在正极产生的H+代替电解质溶液中的K+，被置换出的K+跨过阳离子交换连接器进入KOH发生室，这些K+与在阴极产生的OH-结合生产KOH，即用于阴离子交换色谱的淋洗液。电导检测器是离子色谱的通用型检测器，其检测的原理；是电导，主要用于测定无机阴阳离子和部分极性有机物。电导检测器通过在外加电场作用下使待测物质发生电离，离子通过流通池引起电导率的变化来进行检测。一般而言，呈离子态的物质都可以用电导法测定，

9、但溶液的电导率是其各种离子的加和，供离子分离用的溶剂本身的高电导率会掩盖待测介质中离子的电导，所以只有在一种离子电导率占绝对优势的情况下方可检测。 外标法定量：外标法是色谱分析中一种简便的定量方法。当样品中所有组分都得到良好的分离并都能被检测而得到色谱峰时，则可利用外标法定量计算样品中各组分的浓度。其定量的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比。数据处理软件（工作站）可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。一般由被测物所配标准浓度与峰面积做标准曲线，由标准曲线求出被测物浓度。Dionex IC 1000 离子交换色谱仪的工作过程：泵将Miniport超纯水，以稳定的流速（

10、或压力）输送至分析体系，在进入分析之前，先进入KOH发生器，产生的淋洗液在进入色谱柱之前通过自动进样器将样品导入，淋洗液将样品带入色谱柱，在色谱柱中各组分因对固定相的亲和力的不同而被分离，并依次随淋洗液流入抑制器，在抑制器中进行离子交换以提高检测信号，再依次进入检测器，检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存。3、预习报告部分此部分保留4、其他相关知识总结影响色谱分析的各种条件色谱柱、淋洗液的温度淋洗液的浓度与组成淋洗液的流速淋洗液中的杂质离子色谱样品预处理： 过滤样品中除去颗粒物用0.45m 或0.22m 滤膜用高纯水冲洗滤膜 ，以减少沾污 稀释待测物浓度较高时，应预先稀释.降低干扰物的浓度

11、. 去除干扰物预处理柱，超滤固相萃取液相萃取离心盐析在线柱处理应用范围：1。阴离子分析: 首推和首选的方法（主要应用）（F-、Cl-、SO42-、NO3-等）.2. 阳离子分析: 碱金属碱土金属，有机胺和铵（K+、Na+、Mg2+、NH4+等）、过度金属3. 有机化合物: 水溶性和极性化合物，有机酸 ， 有机胺，糖类，氨基酸，抗生素流动相选择：流动相： 对固定相亲合力和化学抑制反应 1. 阴离子分析: 弱酸盐，CO32-/HCO3-, OH-； 2. 阳离子分析: 矿物酸，硫酸，甲基磺酸； 3. 离子排斥: 矿物酸，盐酸，硫酸； 4. 过度金属和重金属: 络合剂；电解淋洗液发生器的优点 只需用

12、去离子水作淋洗液的载体 在线产生高纯度无污染的酸,碱和盐淋洗液, 只用鼠标控制电流和流速即可产生准确而具有重现性的淋洗液 改善等浓度和梯度淋洗的重现性,用等浓度泵作梯度淋洗 保留时间好的重现性 使用和方法发展方便 减少泵的维修,延长泵的使用寿命,全面提高离子色谱的效率柱子的保养： 最好分别清洗保护柱与分离柱。如要同时清洗，应将分离柱置于保护柱之前。溶液流动方向 : 保持 方向 离子色谱柱不能反冲。闲置或柱子干了以后重用，先用低流速冲（相当于沁润）。分析柱污染，会导致保留时间变化，相当于柱子变短了，保留时间缩短，此时，可稀释淋洗液浓度。若保留时间缩短15%就需要开始清洗柱子了。检测器：电导检测器

13、二 气相色谱法部分（氢火焰检测器）1、实验目的及实验思考题课前预习气相色谱仪器原理，氢火焰检测器，仪器分析定量方法。气相色谱的结构及各部分的作用。 常见检测器的适用范围。 气相色谱的定量方法。实验目的1、掌握气相色谱的基本原理。2、掌握气相色谱仪组成结构及作用。3、了解氢火焰检测器的特点和使用方法。4、掌握气相色谱中利用保留时间定性的基本原理及外标定量方法和特点。5、了解利用极性毛细管柱测定极性有机物的注意事项。6、了解气相色谱样品预处理的注意事项及其选择的原则。色 谱 定 量 方 法一、归一化法由于组分的量与其峰面积成正比，如果样品中所有组分都能产生信号，得到相应的色谱峰，那么可以用如下归一

14、化公式计算各组分的含量。(7.34)若样品中各组分的校正因子相近，可将校正因子消去，直接用峰面积归一化进行计算。中国药典用不加校正因子的面积归一化法测定药物中各杂质及杂质的总量限度。(7.35) 归一化法的优点是：简便、准确、定量结果与进样量重复性无关(在色谱柱不超载的范围内)、操作条件略有变化时对结果影响较小。缺点是：必须所有组分在一个分析周期内都流出色谱柱，而且检测器对它们都产生信号。不适于微量杂质的含量测定。二、外标法用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。此法可分为工作曲线法及外标一点法等。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对

15、照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算，工作曲线法也可以用外标二点法代替。通常截距应为零，若不等于零说明存在系统误差。工作曲线的截距为零时，可用外标一点法(直接比较法)定量。 外标一点法是用一种浓度的对照品溶液对比测定样品溶液中i组分的含量。将对照品溶液与样品溶液在相同条件下多次进样，测得峰面积的平均值，用下式计算样品中i组分的量：WA(W)(A)(7.36)式中W与A分别代表在样品溶液进样体积中所含i组分的重量及相应的峰面积。(W)及(A)分别代表在对照品溶液进样体积中含纯

16、品i组分的重量及相应峰面积。外标法方法简便，不需用校正因子，不论样品中其他组分是否出峰，均可对待测组分定量。但此法的准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响。此外，为了降低外标一点法的实验误差，应尽量使配制的对照品溶液的浓度与样品中组分的浓度相近。三、内标法选择样品中不含有的纯物质作为对照物质加入待测样品溶液中，以待测组分和对照物质的响应信号对比，测定待测组分含量的方法称为内标法。“内标”的由来是因为标准(对照)物质加入到样品中，有别于外标法。该对照物质称为内标物。在一个分析周期内不是所有组分都能流出色谱柱(如有难气化组分)，或检测器不能对每个组分都产生信号，或只需测定混合物中某几个组分的含量

17、时，可采用内标法。准确称量W克样品，再准确称量W克内标物，加入至样品中，混匀，进样。测量待测组分i的峰面积A及内标物的峰面积A，则i组分在W克样品中所含的重量W，与内标物的重量W，有下述关系：(7.37)待测组分i在样品中的百分含量C为：(7.38)对内标物的要求；内标物是原样品中不含有的组分，否则会使峰重叠而无法准确测量内标物的峰面积；内标物的保留时间应与待测组分相近，但彼此能完全分离(R1.5)；内标物必须是纯度合乎要求的纯物质。内标法的优点是：在进样量不超限(色谱柱不超载)的范围内，定量结果与进样量的重复性无关。只要被测组分及内标物出峰，且分离度合乎要求，就可定量，与其他组分是否出峰无关

18、。很适用于测定药物中微量有效成分或杂质的含量。由于杂质(或微量组分)与主要成分含量相差悬殊，无法用归一化法测定含量，用内标法则很方便。加一个与杂质量相当的内标物。加大进样量突出杂质峰，测定杂质峰与内标峰面积之比，即可求出杂质含量。但样品配制比较麻烦和内标物不易找寻是其缺点。1. 思考题二：影响气相色谱分离的因素有哪些？(1)、色谱长度和填料的性质，色谱柱越长，组分之间分辩效果越好，但色谱柱越长压降越大，而输入的压力是有限的。色谱柱过长会增大进出口压力比，相反会降低分离度。(2)、色谱柱填料颗粒大小也是主要因素，粒子越细，由于表面积增加，分辩效果越好，但是颗粒细会增大柱压降，也会起反作用。(3)

19、、柱温对分辩效果也有很大影响，因为气体在液体中的溶解度或在固体表面的吸附程度都随温度增高而降低，在气液色谱分析中，当超过一定温度时，静态的液体通常会从色谱柱中挥发掉，所以选择柱温时应考虑到样品的沸点。一般是略低于样品沸点的平均值。(4)、载气种类的影响。常用的载气有 N2、H2、He、Ar等，其中H2、He 气的分子量较小，有利于提高分析速度，但浓度较高的介质易在其间形成扩散，影响分离度，所以在实际测量中H2、 He气体一般都用在介质浓度较低的区域并提高其流速，减少扩散的影响。N2、Ar等分子量较大的气体的优点是扩散作用小，缺点是在柱中压降大流速慢，即分析周期长。(5)、载气流速的影响。介质在

20、固定相上的滞留时间，主要取决于介质自身的特性(挥发性，极性等)和载气的流速。所以流速快慢直接影响分离度。(6)、进样时间和进样量的影响。进样时间应尽量短，原则上的瞬间进样会提高分离度。进样量应尽量小，但应使检测器能够识别。2、实验大纲部分1气相色谱工作原理:是利用试样中各组份在气相和固定液液相间的分配系数不同,当汽化后的样品被载气带入色谱柱中运行时,组份就在其中的两相间进行反复多次分配,由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同,因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组份的色谱峰。2.气相色谱仪的

21、组成及作用:（1）载气系统:包括气源、气体净化、气体流速控制，提供稳定流量/压力的高纯载气。（2）进样系统：包括注射器和进样口（隔垫、衬管），样品被注射器注入衬管后（液体样品将瞬间汽化），被载气带入色谱柱，分流功能也在进样口实现。（3）色谱柱和柱温箱：在恒温或程序升温控制下，样品中各组分在色谱柱上实现分离（4）检测系统：获得与各组分含量呈比例的信号。（5）记录系统：包括放大器及记录仪，或数据处理装置及工作站，记录检测器获得的信号，得到色谱图，并可以对色谱峰进行积分等处理。3氢火焰检测器的工作原理原理：含碳有机物在氢火焰中燃烧时，产生化学电离，发生下列反应：（1） CH + O CHO+ + e

22、；（2）CHO+ + H2O H3O+ + CO。在电场作用下，正离子被收集到负极，产生电流。检测器结构： 如下图所示，在喷嘴上加一极化电压，氢气从管道7进入喷嘴，与载气混合后由喷嘴逸出进行燃烧，助燃空气由管道6进入，通过空气扩散器5均匀分布在火焰周围进行助燃，补充气从喷嘴管道底部8通入。4气相色谱保留时间定性方法在混合物样品得到分离之后，利用已知物保留值对各色谱峰进行定性是色谱法中最常用的一种定性方法。它的依据是在相同的色谱操作条件下，同一种物质应具有相同的保留值，当用已知物的保留时间与未知物组分的保留时间完全相同，则认为它们可能是相同的化合物。这个方法是以各组分的色谱峰必须分离为单独峰为前

23、提，同时还需要有作为对照用的标准物质。5气相色谱外标法定量的定义和特点色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比。数据处理软件（工作站）可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常情况是采用峰面积进行定量分析。外标法是色谱分析中一种简便的定量方法。当样品中所有组分都得到良好的分离并都能被检测而得到色谱峰时，则可利用外标法定量计算样品中各组分的浓度。6、极性毛细管气相色谱柱挥发性有机酸属于极性物质，所以选择极性色谱柱DB-WAXetr，其固定相是聚乙二醇（PEG），强极性。最

24、高使用温度240。五、样品预处理将取得的污泥发酵液，离心5000-8000转/min，取上清液过0.45um膜，稀释50-100倍，在2mL气相色谱样品瓶中，加入0.9mL稀释后样品，再加入3%磷酸0.9mL（使得pH2）。六、实验步骤 1. 通载气N2约1分钟后，打开氢气和空气钢瓶。2. 打开稳压电源、打开气相色谱仪主电源，打开电脑及工作站。3. 分别设定柱温、进样口温度和检测器温度50、220和250。4. 当温度达到设定值后，在工作站中，设定分析文件名、文件路径和仪器方法，等待仪器显示ready。5. 将标准样品系列依次从低浓度到高浓度手动进样0.5uL，按start按钮开始进样测试。6

25、. 将样品自动进样0.5uL，按start按钮开始进样测试。7. 测试结束后，对每个色谱图进行积分处理，并记录所有数据。8. 启动降温程序，待柱温、进样口温度和检测器温度均降至50以下后，依次关闭气相色谱仪、化学工作站，关掉气体钢瓶及稳压电源。七、注意事项1. 先通载气，再打开仪器；先关仪器，再关载气。2. 注意各气体钢瓶的检漏，尤其是氢气。气相色谱流程1. 载气系统：包括气源、净化干燥管和载气流速控制;2. 进样系统：进样器及气化室；3. 色谱柱：填充柱（填充固定相）或毛细管柱（内壁涂有固定液）；4. 检测器：可连接各种检测器，以热导检测器或氢火焰检测器最为常见；5. 记录系统：放大器、记录

26、仪或数据处理仪；6. 温度控制系统：柱室、气化室的温度控制。隔垫的作用隔垫将样品流路与外部隔开，进样针插入时，能保持系统内压，防止泄漏，避免外部空气渗入，污染系统。隔垫要定期更换，为防止：没漏汽，分解，样品损失，出鬼峰，柱效下降如何维护进样口温度不要超过隔垫的最高使用温度定期更换（200次）安装后用“手紧“使用针尖锋利的注射器衬管的作用衬管是进样口的中心，样品在此气化为什么要更换衬管衬管不定期更换，或使用不当会出现：峰形变坏，样品分解或歧视，重现性差，出鬼峰注意事项检测器温度不能低于进样口温度，否则会污染检测器进样口温度应高于柱温的最高值，同时化合物在此温度下不分解。l 含酸、碱、盐、水、金属

27、离子的化合物不能分析，要经过处理方可进行。l 进样器所取样品要避免带有气泡以保证进样重现性。l 取样前用溶剂反复洗针，再用要分析的样品至少洗2-5次以避免样品间的相互干拢。l 需直接进样品，要将注射器洗净后，将针筒抽干避免外来杂质的干拢。色谱柱选择原则色谱柱的选择主要是选择固定液或固定相，遵循“相似相溶”原理。基于此原理的色谱流出规律如下： 分离非极性物质：一般选用非极性固定液，这时样品中的各组分按沸点次序先后流出色谱柱，沸点低的先流出，沸点高的后流出； 分离极性物质：选用极性固定液，这时样品中的各组分主要按极性顺序分离，极性小的先流出色谱柱，极性大的后流出色谱柱； 分离非极性和极性混合物：一

28、般选用极性固定液，这时非极性组分先出峰，极性组分（或易被极化的组分）后出峰；三 吹扫捕集-GC-MS实验部分（四级杆质谱检测仪）1、实验目的或思考题部分实验报告要求及实验思考题1.1. 通过标准谱库的检索，分析出峰时间为5.59min、7.17min和7.79min的色谱峰代表什么物质？1.2. 通过S/N分析质谱分析中，全扫描和单离子扫描的区别。 吹扫捕集预处理的特点。2、实验大纲部分2.1质谱检测器的工作原理以电子轰击或其他的方式使被测物质离子化，形成各种质荷比（m/e）的离子，然后利用电磁学原理使离子按不同的质荷比分离并测量各种离子的强度，从而确定被测物质的分子量和结构。 有机质谱仪主要

29、用于有机化合物的结构鉴定，它能提供化合物的分子量、元素组成以及官能团等结构信息。分为四极杆质谱仪、离子阱质谱仪、飞行时间质谱仪和磁质谱仪等。本实验中使用的是四极杆质谱仪。2.2质谱图定性方法以相同的70eV能量电子轰击样品束，同一种物质应具有相同的质谱图。国际上通用的标准质谱库收集了大部分已知化合物在70eV电子轰击电离源下产生的质谱图，如NIST库。用未知物组分的质谱与质谱库中的标准图比对，按照相似度可排列出可能的化合物。如果要进一步确认，则需用标准样品进样，以保留时间辅助确定。2.3、非极性/弱极性毛细管气相色谱柱苯系物是非极性的化合物，部分有弱极性，针对苯系物样品的测定，选择固定相为5%

30、苯基95%二甲硅亚芳基硅氧烷的非极性柱DB-5MS，“MS”是指针对质谱检测器设计的低流失气相色谱柱。2.4、吹扫捕集原理通过吹脱管用氮气将水样中的挥发性有机物VOCs连续吹脱出来，通过气流带入并吸附于捕集管中，待水样中VOCs被全部吹脱出来后，停止对水样的吹脱并迅速加热捕集管，将捕集管中的VOCs热脱附出来，进入气相色谱仪。气相色谱仪采用在线冷柱头进样，使加热脱附的VOCs冷凝浓缩，然后快速加热进样。与其他方法相比，吹扫捕集法具有样品用量少，组分损失小，检测限低，无溶剂污染，操作快捷方便等特点。2.5、质谱系统的构造质谱系统一般由真空系统、进样系统、离子源、质量分析器、检测器和计算机控制与数

31、据处理系统（工作站）等部分组成。 3. 其他与GC-MS相关的知识3.1. 由质谱图可以获得的信息在质谱图中，每个质谱峰表示一种质荷比的离子;根据特征质谱峰，可以进行定性分析（无机物、有机物、同位素分析等）；质谱峰的强度表示该离子的多少，可以进行定量分析；对于有机化合物质谱，根据质谱峰的质荷比和相对强度，可以进行结构分析。3.2. 质谱分析的特点l 应用广：可进行同位素分析 化学分析 无机成分分析 有机成分分析l 精确测定原子量或分子量l 灵敏度高：有机物分析可达 50pg（pg为10-12g） 无机物分析可达 10-14gl 分析速度快l 可实现多组分多形态同时检测l 匹配功能强：可与GC、

32、HPLC、ICP、TA & DSC等大型仪器联用高真空要求的理由压强高，气体密度大，离子与气体分子发生碰撞，使离子运动方向偏离正常轨道；高气压可导致离子分子反应，改变质谱图；氧分压过高影响离子源中灯丝的寿命；离子源高气压可能引起加速电压发电；高气压产生的高本底干扰质谱图；高气压干扰轰击电子束的正常调节。质谱仪进样系统3.5.吹扫捕集和顶空比较方法优点缺点静态顶空GC 样品基质干扰小 仪器较简单，不需要吸附装置 挥发性样品组分不会丢失 可连续取样分析 灵敏度稍低（10-100ppb） 难分析较高沸点的组分动态顶空GC 灵敏度高（1ppb） 可分析沸点较高的组分 样品的基质可能会干扰分析 仪器较复

33、杂 吸附和解析可能造成样品成 分的丢失3.5. 离子源分类按样品离子化方式： 气相源：先蒸发再激发，适于沸点低于500 度、对热稳定的样品的离子化，包括电子轰击源、化学电离源、场电离源、火花源；n 解吸源：固态或液态样品不需要挥发而直接被转化为气相，适用于分子量高达105的非挥发性或热不稳定性样品的离子化。包括场解吸源、快原子轰击源、激光解吸源、离子喷雾源和热喷雾离子源等按离子化的能量：n 硬源：离子化能量高，如EI。伴有化学键的断裂，谱图复杂，可得到分子官能团的信息；n 软源：离子化能量低，如CI、ESI。产生的碎片少，谱图简单，可得到分子量信息。四 高效液相色谱部分（紫外-可见光检测器和二

34、极管阵列检测器）1、实验目的或思考题1高效液相色谱分析法的基本原理及色谱柱的选择。2紫外-可见光检测器的基本原理及其适用范围。3高效液相色谱（1200LC）组成结构、性能。4实验步骤及注意事项（重点）。5高效液相色谱（1200LC）根据标准样品的保留时间定性及定量方法6掌握数据分析与处理及报告输出。1掌握高效液相色谱分析法中的基本原理（包括分配分离原理、紫外-可见光检测器检测原理）。2基本了解高效液相色谱（1200LC）组成结构，硬件操作及掌握化学工作站的开机，关机，参数设定，数据采集及分析的基本操作。3了解紫外-可见光检测器的基本原理及其适用范围。4掌握高效液相色谱定性、外标定量方法。1、为

35、什么溶剂和样品要过滤?2、高效液相色谱定性、定量的依据是什么？3、如何防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞，以及堵塞后的处理？2、实验大纲和上课内容21、高效液相色谱分析法的基本原理液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。分配色谱原理：主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同（分配作用）而实现分离的液相色谱分离模式。正相色谱法采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。反相色谱法一般

36、用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛，据统计，它占整个HPLC应用的80%左右。正相色谱法与反相色谱法比较表正相色谱法反相色谱法固定相极性高中中低流动相极性低中中高组分洗脱次序极性小先洗出极性大先洗出2.2、高效液相色谱（1200LC）组成结构、性能（四元泵、自动进样器、柱温箱、 UV-VIS检测器、C18色谱柱)， 稳压电源。流动相真空在线脱气机四元比例阀主动输入阀泵头出口单向阀压力阻尼器（侧压力）泵头排液阀自动进样器（其冷凝水排

37、水管必须高于收集瓶，不能浸在液体里。其下有一控温模块，定量环标配100ul，一般进样量5ul-50ul较好）柱温箱紫外监测器（流通池）荧光检测器（一定要荧光串联在紫外之前，因其流通池耐压20bar，紫外可耐压40bar）2.3、实验步骤及注意事项。（1）准备根据待测物要求配制多个浓度点标准样品，待测样品（样品需要前处理），准备HPLC所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。（2）样品分析1）开机。打开电脑、HPLC各组件电源（所有组件）、打开软件。2）配置仪器，打开工作界面，按操作要求赶流动相气泡。（逆时针方向旋松泵头（2-3圈）在软件上泵模块，设置泵里控制排A（设为100%）或B

38、，流速为3-5ml/min，排5-10min，A相排完后，直接切换到B，即将B相设为100%，确认即可依次排所需流动相各流动相均排完后将流速改回原来的1ml/min顺时针方向旋紧泵头。注意：排气时注意观察压力，如果压力超过10bar，报警，可能是滤芯脏了）3）建立平衡柱子分析方法，保存并运行。4）在脱机状态下建立样品分析方法，设置自动进样器方法（sequence），设置数据保存文件。5）待柱子平衡后，运行所设置的sequence，分析标准样品及实际样品。6）建立清洗及保存柱子的方法，并在样品分析结束后运行。7）所有程序结束后，关泵、关灯，退出程序，关闭主机、电脑及相关附件。（3）数据处理可在脱

39、机状态下整理实验数据。2.5高效液相色谱（1200LC）根据标准样品的保留时间定性及定量方法根据标准样品的保留时间定性根据标准样品的的标准曲线定量（外标法）标准曲线绘制方法：（1）先打开数据file-load signal,选中一个数据文件-ok（2）Calibration-New calibration-定一个浓度值-ok（3）在compound 里输入峰名（4）多点校正，重复（1）后，在校正中添加级别，（3）完成后，保存方法2.6掌握数据分析与处理及报告输出。（1）在脱机状态下，进入数据分析画面。（2） 从“File”菜单选择“Load signal”，选中您的数据文件名（3）积分要分析的

40、数据（可自动，可手动）（4）根据打开的方法，打印报告，可看结果（可编辑报告内容）撰写实验报告（内容应包括实验目的、基本原理、仪器与试剂、实验步骤（重点）、实验数据记录、结果与讨论等（绘制外标曲线并求所测样品的结果），回答思考题）。注意：实验步骤请不要按大纲上的内容抄思考题：1、为什么溶剂和样品要过滤?2、流动相使用前为什么要脱气？3、如何防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞，以及堵塞后的处理？4、系统压力过高的原因有哪些？1、为什么溶剂和样品要过滤?溶剂和样品过滤非常重要，它会对色谱柱、仪器起到保护作用，消除由于污染对分析结果的影响。色谱柱：由于填料颗粒很细，色谱柱内腔很小，溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。仪器：溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损，同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。2、流动相使用前为什么要脱气？流动相使用前必须进行脱气处理 ，以除去其中溶解的气体（如O2），以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至