影响血液凝固的因素

1、实验三实验三影响血液凝固的因素影响血液凝固的因素红细胞脆性的测定红细胞脆性的测定血红蛋白的测定血红蛋白的测定影响血液凝固的因素影响血液凝固的因素 1 1 实验目的实验目的 以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素，加深以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素，加深 对生理止血过程的理解。对生理止血过程的理解。2 2 实验原理实验原理 血液凝固是一个酶解激活过程，有多种凝血因子血液凝固是一个酶解激活过程，有多种凝血因子 参与。根据凝血过程起动时凝血因子来源不同，可将参与。根据凝血过程起动时凝血因子来源不同，可将 凝血分为内源性激活途径和外源性激活途径。凝血分为内源性激活途径和外源性激活途径。3 3 实验

2、对象：实验对象：家兔家兔4 4 方法与步骤方法与步骤4.1 4.1 家兔的麻醉、保定与手术家兔的麻醉、保定与手术 33%33%乙醇溶液，乙醇溶液，6mL/kg6mL/kg，耳缘静脉注射。，耳缘静脉注射。4.2 4.2 颈动脉采血颈动脉采血4.3 4.3 试管准备试管准备4.4 4.4 记录凝血时间记录凝血时间5 5 实验结果实验结果表表1 1 血液凝固及其影响因素血液凝固及其影响因素试管号试管号实验处理实验处理凝血时间（秒）凝血时间（秒）1 1空白空白2 2液体石蜡液体石蜡4 4滴滴3 3棉花少许棉花少许4 4冰水环境冰水环境5 5肝素肝素4 4滴滴6 6草酸钾草酸钾4 4滴滴7 7脑组织浸液

3、脑组织浸液4 4滴滴5 5号管加号管加CaClCaCl2 24 4滴滴6 6号管加号管加CaClCaCl2 24 4滴滴6 6 注意事项注意事项6.1 6.1 采血过程要尽量快，以减少计时误差，对采血过程要尽量快，以减少计时误差，对 比实验的采血时间要紧接着进行。比实验的采血时间要紧接着进行。6.2 6.2 每支试管口径大小及采血量要相对一致，每支试管口径大小及采血量要相对一致， 不可相差太大。不可相差太大。 6.3 6.3 判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管 达达4545时试管内血液不见流动为准。时试管内血液不见流动为准。红细胞脆性的测定红细胞脆性的测定

4、1 1 实验目的实验目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液 渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。2 2 实验原理实验原理 正常红细胞悬浮于等渗的血浆中，著置于高渗溶正常红细胞悬浮于等渗的血浆中，著置于高渗溶 液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之，置于低渗溶 液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗透液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗透 压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红 蛋白，称之

5、为溶血。红细胞膜对低渗溶液有一定的抵蛋白，称之为溶血。红细胞膜对低渗溶液有一定的抵 抗力，这一特征称为红细胞的渗透脆性。抗力，这一特征称为红细胞的渗透脆性。3 3 实验对象：实验对象：动物种类不限动物种类不限4 4 方法与步骤方法与步骤4.1 4.1 溶液配置溶液配置表表2 2 不同浓度不同浓度NaClNaCl溶液配制溶液配制管管 号号1 12 23 34 45 56 67 78 89 910101%NaCl1%NaCl（mLmL）9.09.06.56.56.06.05.55.55.05.04.54.54.04.03.53.53.03.02.52.5蒸馏水蒸馏水(mL)(mL)1.01.03.

6、53.54.04.04.54.55.05.05.55.56.06.06.56.57.07.07.57.5NaClNaCl浓度浓度（% %）0.900.900.650.650.600.600.550.550.500.500.450.450.400.400.350.350.300.300.250.254.2 4.2 制备抗凝血：柠檬酸钠作抗凝剂。制备抗凝血：柠檬酸钠作抗凝剂。4.3 4.3 加抗凝血：每只试管加加抗凝血：每只试管加1 1滴。滴。4.4 4.4 观察结果观察结果未溶血试管：液体下层有大量红细胞下沉，上层为未溶血试管：液体下层有大量红细胞下沉，上层为无色透明，表明无红细胞破裂。无色透明

7、，表明无红细胞破裂。不完全溶血试管：液体下层有红细胞下沉，上层出不完全溶血试管：液体下层有红细胞下沉，上层出现透明淡红色，表明部分红细胞已经破裂，称为不现透明淡红色，表明部分红细胞已经破裂，称为不完全溶血。完全溶血。完全溶血试管：液体完全变成透明红色，管底无红完全溶血试管：液体完全变成透明红色，管底无红细胞下沉。细胞下沉。5 5 实验结果实验结果表表2 2 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性测定脆性测定分组分组HbHb测定测定（g/Lg/L） RBC RBC脆性测定（脆性测定（NaCl%NaCl%）最小抵抗力最小抵抗力最大抵抗力最大抵抗力实验组实验组对照组对照组1231230.600

8、.600.550.550.400.400.350.356 6 注意事项注意事项6.1 6.1 试管要干净；试管要干净；6.2 6.2 配液要准确；配液要准确；6.3 6.3 加血量要一致；加血量要一致；6.4 6.4 轻轻混匀，减少溶血机会；轻轻混匀，减少溶血机会；6.5 6.5 静置时间不少于静置时间不少于30min30min。血红蛋白的测定血红蛋白的测定1 1 实验目的实验目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。2 2 实验原理实验原理 血红蛋白的颜色与氧结合量有关，当用一定的氧血红蛋白的颜色与氧结合量有关，当用一定的氧 化剂将其氧化时，可使其转变

9、为稳定、棕色的高铁血化剂将其氧化时，可使其转变为稳定、棕色的高铁血 红蛋白，而且颜色与血红蛋白的浓度成正比。因此，红蛋白，而且颜色与血红蛋白的浓度成正比。因此， 可与标准色板进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每可与标准色板进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每 升血液中含血红蛋白的克数（升血液中含血红蛋白的克数（g.Lg.L-1-1）。）。3 3 实验对象：实验对象：动物种类不限动物种类不限4 4 方法与步骤：方法与步骤：使用沙里氏血红蛋白计测定。使用沙里氏血红蛋白计测定。 比色法是用比色法是用HClHCl使血红蛋白酸化形成粽色的高铁使血红蛋白酸化形成粽色的高铁 血红蛋白，然后和标准比色板进行比色。

10、血红蛋白，然后和标准比色板进行比色。（1 1）血红蛋白计由标准比色箱和测定管组成。测定管）血红蛋白计由标准比色箱和测定管组成。测定管 两侧有刻度，一侧为血红蛋白量的绝对值，以每两侧有刻度，一侧为血红蛋白量的绝对值，以每100 100 mL mL血液中所含血红蛋白的克数表示；另一侧为相对血液中所含血红蛋白的克数表示；另一侧为相对 值，以（即相当于正常平均值的百分数）来表示。值，以（即相当于正常平均值的百分数）来表示。（2 2）测定方法）测定方法血红蛋白吸管清洁：自来水血红蛋白吸管清洁：自来水蒸馏水蒸馏水无水乙醇。无水乙醇。将将0.1N0.1N盐酸加入测定管中至刻度盐酸加入测定管中至刻度“2”2”

11、处。处。用血红蛋白吸管吸取用血红蛋白吸管吸取20L20L血液，将血液吹入盐酸血液，将血液吹入盐酸中，并利用上层盐酸将吸管反复洗涤多次（避免起中，并利用上层盐酸将吸管反复洗涤多次（避免起泡）。泡）。酸化酸化10min10min后，逐滴加入蒸馏水，边加边混匀并与后，逐滴加入蒸馏水，边加边混匀并与标准比色板比较，至二者颜色相同为止。标准比色板比较，至二者颜色相同为止。读数即为每读数即为每100mL100mL血液中血红蛋白的克数。血液中血红蛋白的克数。 【注意事项】【注意事项】（1 1）血红蛋白吸管和比色管要清洁；）血红蛋白吸管和比色管要清洁；（2 2）吸取血液要准确，避免起泡；）吸取血液要准确，避免

12、起泡；（3 3）滴加蒸馏水要准确；）滴加蒸馏水要准确；（4 4）酸化时间不能少于）酸化时间不能少于10min10min；（5 5）在自然光下比色。）在自然光下比色。3 3 实验结果实验结果3.1 3.1 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性测定：见表脆性测定：见表1 1。表表1 1 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性测定脆性测定分组分组HbHb测定测定含量（含量（g/Lg/L）RBCRBC脆性测定（脆性测定（NaCl%NaCl%）最小抵抗最小抵抗最大抵抗最大抵抗实验组实验组对照组对照组1231230.600.600.550.550.400.400.350.353.2 3.2

13、不同因素对血液凝固时间的影响不同因素对血液凝固时间的影响表表2 2 血液凝固及其影响因素血液凝固及其影响因素试管号试管号实验处理实验处理凝血时间（秒）凝血时间（秒）1 1空白空白2 2液体石蜡液体石蜡4 4滴滴3 3棉花少许棉花少许4 4冰水环境冰水环境5 5肝素肝素4 4滴滴6 6草酸钾草酸钾4 4滴滴7 7脑组织浸液脑组织浸液4 4滴滴5 5号管加号管加CaClCaCl2 24 4滴滴6 6号管加号管加CaClCaCl2 24 4滴滴4 4 分析与探讨分析与探讨4.1 4.1 本次实验家兔本次实验家兔HbHb测定结果比对照高（或低、或基本一测定结果比对照高（或低、或基本一 致），从操作过程

14、方面说明原因：致），从操作过程方面说明原因：。4.2 4.2 本次实验家兔本次实验家兔RBCRBC脆性测定结果，最小抵抗比对照组高（或脆性测定结果，最小抵抗比对照组高（或 低、或基本一致），最大抵抗低、或基本一致），最大抵抗，从操作过程方面说明，从操作过程方面说明 原因：原因：。4.3 4.3 家兔凝血时间测定结果表明，家兔凝血时间测定结果表明，处理能加快（抑制或不处理能加快（抑制或不 凝）血液凝固，为什么？凝）血液凝固，为什么？管加管加CaClCaCl2 2后凝固，为什么？后凝固，为什么？ （从凝血机制分析）（从凝血机制分析）5 5 参考文献参考文献1 1 杨秀平杨秀平. . 动物生理学实验

15、动物生理学实验M. M. 北京：高等教育出版社，北京：高等教育出版社，2004. 85-99. 2004. 85-99. 2 2 邹永新，郭予强邹永新，郭予强. . 我国鸭病毒性疾病的发生和流行概况我国鸭病毒性疾病的发生和流行概况J.J.中国兽医杂中国兽医杂 志，志，20022002（6 6）：）：38-40.38-40.实验报告的撰写实验报告的撰写1 1 实验原理实验原理2 2 材料与方法材料与方法2.1 2.1 主要器材主要器材2.2 2.2 主要药品主要药品2.3 2.3 实验动物实验动物2.4 2.4 实验方法实验方法HbHb测定：按动物生理学实验测定：按动物生理学实验8585页方法进

16、行页方法进行11。脆性测定：按动物生理学实验脆性测定：按动物生理学实验9090页方法进页方法进 行行11。影响血液凝固因素：按动物生理学实验影响血液凝固因素：按动物生理学实验9797页方页方 法进行法进行11。家兔家兔HbHb、RBCRBC脆性测定及影响血凝的因素观察脆性测定及影响血凝的因素观察1 1 实验相关信息及目的实验相关信息及目的2 2 材料材料2.1 2.1 动物动物2.2 2.2 主要药品：主要药品：2.3 2.3 主要仪器：主要仪器：3 3 实验方法：简述或按实验方法：简述或按动物生理学实验动物生理学实验方法进行方法进行11。 4 4 结果结果4.1 4.1 家兔家兔HbHb、RBCRBC脆性测定：见表脆性测定：见表1 1。4.2 4.2 家兔血凝时间的测定：见表家兔血凝时间的测定：见表2 2。 表表1 1 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性测定脆性测定 表表2 2 不同因素对家兔血凝时间的影响不同因素对家兔血凝时间的影响5 5 讨论讨论5.1 5.1 家兔家兔HbHb测定结果与对照比较，其值偏高，原因：测定结果与对照比较，其值偏高，原因：5.2 5.2 家兔家兔RBCRBC脆性测定结果与对照比较，其值，原因：脆性测定结果与对照比较，其值，原因：5.3