高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸B含量

1、高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸B含量作者：税丕先庄元春何兵朱悻【摘要】目的成立一种用高效液相色谱(HPLC)法测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量的方式。方式色谱柱DikmaKromasilC18(5um,10()A250mmXmm)；流动相为甲醇-乙睛-甲酸-水(3()：10：1：59)；流量为ml-min-1;检测波长286nm；柱温30；进样量20川。结果丹酚酸B的加样提取平均回收率为%,RSD为,重复性实验的RSD为%。结论该方式简即靠得住，结果稳固，重复性好，该方式可用于测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量。【关键词】丹酚酸B含量测定高效液相色谱法丹参滴注液丹参滴注液收载于国家中成药标准汇编

2、内科心系分册，由丹参中提取的水溶性化合物总丹酚酸制得。总丹酚酸具有抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化和改善记忆功能障碍等作用L13,由丹参素、丹酚酸A、B、E,原儿茶醛等各类芳香酚酸类化合物组成。丹参滴注液标准中对丹参素钠、原儿茶醛进行了高效液相色谱含量测定，对其中含量高、活性强的丹酚酸B未进行含量测定。咱们参照有关文献2,3,用高效液相色谱柱测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量，取得满意效果。1器材仪器与试药戴安高效液相色谱仪（P680A四元泵,PDA-100二极管阵列检测器，TCC-10。柱温箱，Chromcluon色谱工作站）。丹酚酸B对比品（中国药品生物制品检定所提供。批号：），丹参滴注液（安徽华源

3、生物药业有限公司生产。规格:250ml,16go批号：061112,061115,061118,061120,061201）0甲醇、乙睛为色谱纯（天津四友公司），水为重蒸储水，甲酸为分析纯。色谱条件DikmaKromasilCl8（5p.m,100A25（）mmXmm）；流动相:甲醇-乙睛-甲酸-水（30：1（）：1：59）;流量：ml-min-1;检测波长286nm；进样量2（）ulo2方式与结果溶液的配制对比品溶液的配制取丹酚酸B对比品约5mg,精密称定,置50ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml,置50ml量瓶中,加水至刻度，摇匀，得10mg3的对比品溶液。供试品溶液的

4、配制精密量取丹参滴注液(批号061112)10ml,置5()ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。阴性样品溶液的制备按丹参滴注液制备方式和“项制得不含丹参的阴性对比品溶液，备用。测定方式精密吸取上述供试品溶液与对比品溶液各20r1,别离注入高效液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算样品的含量。方式学验证标准曲线的制备精密称取丹酚酸B对比品适量，配成1gL-l的标准储蓄液；别离吸取10,20,40,8(),100川别离置于5个1ml量瓶中，以水稀释至刻度，混匀后别离进样20记录色谱图见图1。以色谱峰面积(A)对成份浓度(C)作回归统计，回归方程为:A=-9+13,r=6,线性范围mg-L-l

5、o稳固性考察与精密度实验取浓度为mg-L-1的供试品溶液别离在0,2,4,6,8h进样,测得丹酚酸B供试品的峰面积RSD为,表明供试品溶液在8h内稳固。取某一浓度mg-L1)供试品溶液，持续进样5次，测得进样精密度心口为。重复性实验取同一批号的丹参滴注液6份，按上述方式操作，测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量，RSD为%。结果表明重复性良好。a²对比品b²空白c²丹参滴注液1.丹酚酸B图1HPLC图（略）加样回收率实验取同一批号丹参滴注液（含量为mg-L-l）6份，每份约10ml,精密量取，别离加入丹酚酸B对比品适量，精密称定，按含量测定方式测定，计算回收率（见表1）

6、。可见，丹酚酸B的平均回收率为%（於0=%）,符合分析方式的要求。表1加样回收率实验结果（略）样品含量测定取批号别离为061112,061115,061118,061120,061201的丹参滴注液适量,按“2.2”项下操作，测得丹酚酸B的含量见表2O表2样品含量测定（略）3讨论溶剂的选择本实验比较了丹酚酸B在5()%甲醇与水中的稳固性，结果均在8h内稳固，而因水价廉易患，故选用水为溶剂。色谱条件的选择中国药典2005版，丹参片质量标准提供的色谱条件中，色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。按照单位实际情形，采用不同比例的甲醇-水、甲醇-水-甲酸、乙睛-水-甲酸为流动相进行测试，发觉乙睛的洗脱效果优于甲醇，流动相中存有甲酸时的柱峰形明显优于流动相中存有乙酸时的峰形，故选择甲醇-乙脯甲酸-水(30：10：1：59)为流动相。【参考文献】1戈升荣，俞一心，谢更新.丹酚酸的药理作用研究进展口，中药材,2002,25(9):683.2曹枫，马长华,乔延江.HPLC法