蛋白质酶和核酸习题_第1页
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文档简介

1、第2单元 蛋白质(一)名词解释1兼性离子(zwitterion); 2.等电点(isoelectric point,pI); 3.构象(conformation); 4.别构效应(allosteric effect); 5.超二级结构(super-secondary structure); 6.结构域(structural domain,domain); 7. 蛋白质的三级结构(tertiary stracture of protein); 8.Edman 降解法(Edman degradation); 9.蛋白质的变性作用(denaturation of protein); 10.Bohr

2、效应(Bohr effect); 11.分子伴侣(molecular chaperone); 12.盐溶与盐析(salting in and salting out)并能够解释现象(二)填充题1.氨基酸在等电点时,主要以_离子形式存在,在pHpI的溶液中,大部分以_离子形式存在,在pHpI的溶液中,大部分以_离子形式存在。2.组氨酸的pK1(-COOH)值是1.82,pK2 (咪唑基)值是6.00, pK3(-NH3+)值是9.17,它的等电点是_。3.Asp的pK1=2.09,pK2= 3.86,pK3=9,82,其pI等于_。4.在近紫外区能吸收紫外光的氨基酸有_、_和_。其中_的摩尔吸光

3、系数最大。5 .蛋白质分子中氮的平均含量为_,故样品中的蛋白质含量常以所测氮量乘以_即是。6.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应,然后用碱(NaOH)来滴定_上放出的_。7.除半胱氨酸和胱氨酸外,含硫的氨基酸还有_,除苏氨酸和酪氨酸外,含羟基的氨基酸还有_,在蛋白质中常见的20种氨基酸中,_是一种亚氨基酸,_不含不对称碳原子。8.蛋白质的氨基酸残基是由_键连接成链状结构的,其氨基酸残基的_称蛋白质的一级结构。9.-折叠片结构的维持主要依靠两条肽键之间的肽键形成_来维持。10.在螺旋中C=O和NH之间形成的氢键与_基本平行,每圈螺旋包含_个氨基酸残基,高度为_,每个氨基酸残基使

4、螺旋轴上升_,并沿轴旋转_度。11.蛋白质颗粒在电场中移动的速率主要取决于_的大小和_量的多少。12.用凝胶过滤法分离蛋白质,相对分子质量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较_,因此最先流出凝胶柱的蛋白质,其相对分子质量最_。13.血红蛋白的辅基是_,当其中的1个亚基与氧结合后,其余亚基与氧的亲合力_,这种现象称_,当CO2或H+浓度增高时,血红蛋白与氧的亲合力_,这种现象称_。14蛋白质变性时空间结构_,而一级结构_,变性后,蛋白质的溶解度一般会_,生物学功能_。15.稳定蛋白质胶体溶液的因素是_和_。16.凝集素是一类能与_相互作用的蛋白质。17.免疫球蛋白G(IgG)含有_条重链,_条轻链,通

5、过_键联接成Y形结构,每一分子含有_个抗原结合部位。18.球状蛋白质形成空间结构时,肽链的熵_,而环境中水的熵_。19 .一般说来,球状蛋白质在其分子内部含有_性氨基酸残基,而在分子外表面含_性氨基酸残基。20.胰蛋白酶专一性地切断_和_的羧基端肽键。(三)选择题(在备选答案中选出1个或多个正确答案)1.下列蛋白质组分中,哪一种在280nm具有最大的光吸收?A. 色氨酸的吲哚环 B. 酪氨酸的酚环 C. 苯丙氨酸的苯环D. 半胱氨酸的硫原子 E. 肽键2.关于氨基酸的叙述哪一项是错误的?A. 酪氨酸和丝氨酸含羟基 B.酪氨酸和苯丙氨酸含苯环C. 亮氨酸和缬氨酸是支链氨基酸 D.赖氨酸和精氨酸是

6、碱性氨基酸 E. 谷氨酸和天冬氨酸含两个氨基3.在pH7时,其R基带有电荷的氨基酸是A. 缬氨酸 B. 甘氨酸 C. 半胱氨酸 D. 酪氨酸 E. 赖氨酸4.每个蛋白质分子必定具有的结构是什么A. -螺旋 B. -折叠 C. 三级结构 D. 四级结构5.下列哪一种氨基酸侧链基团的pKa值最接近于生理pH值?A. 半胱氨酸 B. 谷氨酸 C. 谷氨酰胺 D. 组氨酸 E. 赖氨酸6. Arg的pK1=2.17,pK2=9.04, pK3=12.48 其pI等于A .5.613 B. 7.332 C. 7.903 D. 10.767.关于蛋白质中L-氨基酸之间形成的肽键,下列哪些叙述是正确的A.

7、具有部分双键的性质 B. 比通常的C-N单键短 C. 通常有一个反式构型 D. 能自由旋转8.典型的螺旋是A. 2.610 B. 310 C. 3.613 D. 4.015 E. 4.4169.维持蛋白质分子中的螺旋主要靠A. 盐键 B. 范德华键 C. 共价键 D. 氢键10.维系蛋白质三级结构稳定的最重要的键或作用力是A盐键 B二硫键 C氢键 D疏水作用力 E范德华力11.血红蛋白质的氧合曲线是A.双曲线 B.抛物线 C. S形曲线 D.直线 E.钟罩形12.维持蛋白质二级结构的主要化学键是A.肽键 B.二硫键 C.氢键 D.疏水键13.存在于蛋白质分子中的下列作用力,哪项不是次级键 A

8、.氢键 B.肽键 C.盐键 D.疏水键 E.二硫键14.关于蛋白质三级结构的描述错误的是A.有三级结构的蛋白质均有酶活性 B.球蛋白均有三级结构C.三级结构的稳定性由多种次级键维系 D.亲水基团多分布在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列15.某蛋白质的等电点为7.5,在pH6.0的条件下进行电泳,它的泳动方向是A.在原点不动 B.向正极移动 C.向负极移动 D.无法预测. 16.用凝胶过滤层析柱分离蛋白质时,下列哪项是正确的A.分子体积最大的蛋白质最先洗脱下来 B.分子体积最小的蛋白质最先洗脱下来C.不带电荷的蛋白质最先洗脱来来 D.带电荷的蛋白质最先洗脱来来E.没有被吸附的蛋白

9、质最先洗脱下来17.有一蛋白质水解产物在pH6用阳离子交换柱层析时,第一个被洗脱下来的氨基酸是A. Val(pI为5.96) B. Lys(pI为9.74) C. Asp(pI为2.77) D. Arg (pI为10.76)18.为获得不变性的蛋白质,常用的方法有A.用三氯醋酸沉淀 B.用苦味酸沉淀 C.用重金属盐沉淀 D.低温盐析 E.常温醇沉淀19.用6mol/L HCl水解某种蛋白质时能检出的氨基酸种类是A. 20种 B. 19种 C. 18种 D. 17种或更少20.SDS凝胶电泳分离蛋白质是根据各种蛋白质A.pI的差异 B.分子大小的差异 C.分子极性的差异 D.溶解度的差异 E.以

10、上说法都不对21.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于A.O2分压降低 B.CO2分压降低 C.CO2分压增高 D.N2分压增高 E.pH值降低22.如果要测定一个小肽的氨基酸顺序,下列试剂中你认为最合适使用哪一个 A .茚三酮 B.CNBr C.胰蛋白酶 D.异硫氰酸苯酯23.下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的?A.四个血红素基各自独立地与氧结合,彼此之间并无联系B.以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图,曲线呈S形C.氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳弱 D.氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化24.关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的?A.蛋白质变性是由于特定的肽键断裂 B.是由

11、于非共价键破裂引起的C.用透析法除去尿素有时可以使变性蛋白质复性 D.变性的蛋白质一定会沉淀25.一个生物样品的含氮量为5%,它的蛋白质含量为A .12.50% B. 16.00% C. 38.00% D. 31.25%(四)判断题1.氨基酸为氨基取代的羧酸,可直接用酸碱滴定法进行定量测定。2.当溶液的pH等于某一可解离基团的pKa时,该基团一半被解离。3.在pH很高或很低的溶液中,氨基酸主要以非离子化形式出现。4.肽链的主链有1/3化学键不能旋转。5.溴化氰可以断裂甲硫氨酸的氨基参与形成的肽链。6.体内合成肽链的方向是从N端向C端,而在体外用固相化学合成法合成多肽时,通常是从C端向N端合成。

12、7.核磁共振研究蛋白质三维结构的主要优势是可以研究溶液中的蛋白质三维结构,并能提供有关的动态信息。8.在水溶液中,蛋白质折叠形成疏水核心,会使水的熵增加。9.原子之间的距离越小,范德华引力越强。10.在-螺旋中,每3.6个氨基酸绕一圈,并形成1个氢键。11.胶原蛋白的原胶原分子是3股右手螺旋扭曲成的左手螺旋。12.球蛋白的三维折叠多采取亲水侧基在外,疏水侧基藏于分子内部的结构模式。13.胎儿血红蛋白与2,3-二磷酸甘油(2,3DPG)的结合力较弱。14.血红蛋白与氧的结合能力随pH降低而增高。15.由于一级结构可以决定空间结构,基因工程表达的肽链一定可以自然地形成天然构象。16.测定别构酶的相

13、对分子质量可以用SDS-PAGE。17.当溶液的pH小于某蛋白质的pI时,该蛋白质在电场中向阳极移动。18.用凝胶过滤分离蛋白质,小分子蛋白由于所受的阻力小首先被洗脱出来。19.若蛋白质与阴离子交换剂结合较牢,可用增加NaCI浓度或降低pH的方法将其从层析柱洗脱出来。20.糖蛋白的N-糖肽键是指与天冬酰胺的-酰胺N原子与寡糖链形成糖苷链。23.糖蛋白的O-糖肽键是指氨基酸残基的羧基O原子与寡糖链形成的糖苷键。(五)分析和计算题1.判断氨基酸所带的净电荷,用pI-pH比pH-pI更好,为什么?2.分别计算谷氨酸、精氨酸和丙氨酸的等电点。3.在下面指出的pH条件下,下列蛋白质在电场中向哪个方向移动

14、?A表示向阳极,B表示向阴极,C表示不移动。人血清蛋白:pH5.5,pH3.5;血红蛋白:pH7.07,pH9.0;胸腺组蛋白:pH5.0,pH8.0,pH11.5;已知:人血清蛋白的pI=4.64 血红蛋白的pI=7.07 胸腺组蛋白的pI=10.8。4.简述蛋白质溶液的稳定因素,和实验室沉淀蛋白质的常用方法。5.简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。6.在体外,用下列方法处理,对血红蛋白与氧的亲和力有何影响?(1)pH值从7.0增加到7.4;(2) CO2分压从1000 Pa增加到4 000 Pa;(3) O2分压从6000 Pa下降到2000 Pa; (4)2,3-二磷酸甘油酸的浓度从8

15、×10-4mol/L下降到2×10-4ol/L;(5)22解聚成单个亚基。7.胎儿血红蛋白(Hb F)在相当于成年人血红蛋白(Hb A)链143残基位置含有Ser,而成年人链的这个位置是具阳离子的His残基。残基143面向亚基之间的中央空隙。(1)为什么2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)同脱氧Hb A的结合比同脱氧Hb F更牢固?(2)Hb F对2,3-BPG低亲和力如何影响到Hb F对氧的亲和力?这种差别对于氧从母体血液向胎儿血液的运输有何意义。8.试述蛋白质二级结构的三种基本类型。9.蛋白质变性后,其性质有哪些变化? 10.为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有下列性质

16、。(1)在低pH值时沉淀。(2)当离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉淀。(3)在一定的离子强度下,达到等电点pH值时,表现出最小的溶解度。(4)加热时沉淀。(5)加入一种可和水混溶的非极性溶剂减小其介质的介电常数,导致溶解度的减小。(6)如果加入一种非极性强的溶剂。使介电常数大大地下降会导致变性。11.凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶,按照分子大小分离蛋白质的,为什么凝胶过滤时,蛋白质分子越小,洗脱速度越慢,而在SDS-PAGE中,蛋白质分子越小,迁移速度越快?12.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按质量计),色氨酸相对分子质量为204。(1)计算牛血清白

17、蛋白的最低相对分子质量(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大约为7万,问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基?第三单元 酶一、名词解释1 酶(enzyme);2全酶(holoenzyme);3 酶的比活力(specific activity);4 活性部位(active energy);5酸-碱催化(acid-base catalysis);6共价催化(covalent catalysis);7邻近效应(proximity effect);8米氏常数(Michaelis constant);9竞争性抑制作用(competitive inhibition);10反竞争性抑制作用(uncom

18、petitive inhibition);11非竞争性抑制作用(noncompetitive inhibition);12酶原(zymogen);13别构酶(allosteric enzyme);14别构调节剂(allosteric modulator);15齐变模型(concerted model);16序变模式(sequential model);17同工酶(isoenzyme isozyme);18 诱导契合学说(induced fit theory)二、填空1结合蛋白酶类必需由_和_相结合后才具有活性,前者的作用是_,后者的作用是_。2酶促反应速度(v)达到最大速度(Vm)的80%时,

19、底物浓度S是Km的_倍;而v达到Vm90%时,S则是Km的_ 倍。3不同酶的Km_,同一种酶有不同底物时,Km值_,其中Km值最小的底物是_。4_抑制剂不改变酶反应的Vm。5_抑制剂不改变酶反应的Km值。6乳酸脱氢酶(LDH)是_聚体,它由_和_亚基组成,有_种同工酶,其中LDH1含量最丰富的是_组织。7L-精氨酸只能催化L-精氨酸的水解反应,对D-精氨酸则无作用,这是因为该酶具有_专一性。8酶所催化的反应称_,酶所具有的催化能力称_。9影响酶促反应的因素主要有_、_、_、_、_、_等六大因素。10活性中心按其功能可分为_、_两个部位。11辅基和辅酶的不同点在于它与_结合的_程度不同。12动物

20、消化道内最初由细胞分泌的无活性的酶前体称为_。在一定条件下,无活性的酶前体转变成有活性的酶过程称为_。13凡能使酶活性丧失或引起酶活性下降的物质称为_;凡能激活或增强酶活性的物质称为_。14酶分为六大类,分别是_、_、_、_、_和_。15米切尔和曼顿根据中间产物理论,提出了底物浓度与反应速度的关系式,称为_,该方程为_。16米氏常数可用_来表示,它的涵义是酶促反应速度达到_一半时的_。17能催化相同的化学反应而蛋白质分子的结构和组成不同的一类酶称为_。18_是由几种酶彼此嵌合在一起形成的,它有利于反应中间产物的转移,并增加中间物局部浓度来提高酶促反应速度。19大部分别构酶的初速度和底物浓度的关

21、系不符合_,反应速率与底物浓度的关系曲线呈_。20_是酶与非生物催化剂的最重要的区别之一。21_包括酶与底物的结合和催化基团对反应的加速两个过程。22根据酶的分子结构可将酶分为_和_。23末端产物积累超过细胞需要时,对该反应途径催化限速反应的别构酶产生抑制,从而终止该产物的合成。这种抑制作用叫做_。24维生素D2的前体是_;而维生素D3的前体为_。25叶酸在体内发挥作用的形式是_。26维生素A的化学名称为_,它的结构是一种含有_环的_。_可以转化为维生素A。27维生素B12是动物体内唯一含金属_的维生素,又称为_。28生物素是_酶辅酶的成分;维生素PP是_酶的辅酶成分;维生素B6是_、_酶的辅

22、酶成分。29维生素B6包括_、_、_三种物质,其体内活性形式是_、_。30维生素K又称为_;维生素E称为_、核黄素是维生素_。三、选择题1关于酶的叙述哪项是正确的?A所有的酶都含有辅基或辅酶 B只能在体内起催化作用 C大多数酶的化学本质是蛋白质D能改变化学反应的平衡点加速反应的进行 E都具有立体异构专一性(特异性)2酶原所以没有活性是因为:A酶蛋白肽链合成不完全 B活性中心未形成或未暴露 C酶原是普通的蛋白质D缺乏辅酶或辅基 E是已经变性的蛋白质3磺胺类药物的类似物是:A四氢叶酸 B二氢叶酸 C对氨基苯甲酸 D叶酸 E嘧啶4关于酶活性中心的叙述,哪项不正确?A酶与底物接触只限于酶分子上与酶活性

23、密切有关的较小区域B必需基团可位于活性中心之内,也可位于活性中心之外C一般来说,总是多肽链的一级结构上相邻的几个氨基酸的残基相对集中,形成酶的活性中心D酶原激活实际上就是完整的活性中心形成的过程E当底物分子与酶分子相接触时,可引起酶活性中心的构象改变5辅酶NADP+分子中含有哪种B族维生素?A磷酸吡哆醛 B核黄素 C叶酸 D尼克酰胺 E硫胺素6下列关于酶蛋白和辅助因子的叙述,哪一点不正确?A酶蛋白或辅助因子单独存在时均无催化作用 B一种酶蛋白只与一种辅助因子结合成一种全酶C一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合成一种全酶 D酶蛋白决定结合酶蛋白反应的专一性E辅助因子直接参加反应7如果有一酶促反应其8

24、=1/2Km,则v值应等于多少Vmax?A025 B033 C050 D067 E0758有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于:A可逆性抑制作用 B竞争性抑制作用 C非竞争性抑制作用 D反竞争性抑制作用E不可逆性抑制作用9关于pH对酶活性的影响,以下哪项不对?A影响必需基团解离状态 B也能影响底物的解离状态 C酶在一定的pH范围内发挥最高活性D破坏酶蛋白的一级结构 EpH改变能影响酶的Km值10Km值的概念是:A与酶对底物的亲和力无关 B是达到Vm所必须的底物浓度 C同一种酶的各种同工酶的Km值相同 D是达到1/2Vm的底物浓度E与底物的性质无关11关于酶的竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?A

25、抑制剂结构一般与底物结构相似 BVm不变C增加底物浓度可减弱抑制剂的影响 D使Km值增大12关于酶的非竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?A增加底物浓度能减少抑制剂的影响 BVm降低C抑制剂结构与底物无相似之处 DKm值不变13酶与一般催化剂的不同点,在于酶具有:A酶可改变反应平衡常数 B极高催化效率 C对反应环境的高度不稳定 D高度专一性14FAD分子组成是:A含有维生素B2 B是一种二核苷酸 C含有GMP组分 D含有ADP组分15关于同工酶,哪些说明是正确的?A是由不同的亚基组成的多聚复合物 B对同一底物具有不同的Km值C在电泳分离时它们的迁移率相同 D免疫学性质相同16常见的酶活性中心的必

26、需基团有:A半胱氨酸和胱氨酸的巯基 B组氨酸的咪唑基 C谷氨酸,天冬氨酸的侧链羧基 D丝氨酸的羟基17酶的专一性可分为:A作用物基团专一性 B相对专一性 C立体异构专一性 D绝对专一性18有关变构酶的叙述是:A大多数变构酶是多聚复合物 B是体内快速调节酶含量的重要方式C可有调节亚基和催化亚基 D酶从一种构象转变为另一种构象时,酶活性发生改变19影响酶促反应的因素有:A温度,pH值 B作用物浓度 C激动剂 D酶本身的浓度20酶的活性中心是指:A是由必需基团组成的具有一定空间构象的区域 B是指结合底物,并将其转变成产物的区域C是变构剂直接作用的区域 D是重金属盐沉淀酶的结合区域21酶催化底物反应时

27、将产生能量效应的一种是A. 提高产物能量水平 B. 降低反应所需活化能 C. 降低反应物能量水平 D. 降低产物能量水平22关于酶活性部位叙述错误的是. A是必需基团集中的部位 B是酶与底物结合的部位 C是辅助因子结合的部位D是抑制剂结合的部位23在酶促反应方程式中,E、S和P分别表示酶、底物和产物,K1、K2、K3为速度常数,试选出表示(1)Vmax;(2)Km的动力学参数的定义表达式AK2×Et(Et为酶的总浓度) BK2/K3 CK2/K1 D(K2+K3)/K124按照典型的米氏动力学公式,米氏常数Km值可以从反应速度对底物浓度所作的双倒数图形中哪一项求得A曲线上的折点 B曲

28、线斜率 C曲线在X轴上的截距的绝对值 D曲线在X轴上的截距的绝对值的倒数25若以某酶的米氏方程的双倒数作图得直线,在X轴上截距为-3,Y轴截距2,则该酶Km值为A-0.25 B-0.50 C+0.25 D+0.3326一个酶的竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂将有的动力学效应分别是:AKm增大,Vmax不变 BKm减小,Vmax不变 CKm不变,Vmax增大DKm不变,Vmax减小27酶如何使反应的活化能大大降低,目前最圆满的解释是:A锁钥模型 B中间产物学说 C诱导契合学说 D能阈学说28可使酶失活的因素有A煮沸 B强酸强碱 C75乙醇 D低温29pH对酶促反应发生影响,其原因有A过酸过碱使酶分子

29、结构破坏而变性失活 BpH改变能影响酶分子活性部位上有关基团的解离CpH能影响酶的纯度 DpH能影响酶的浓度30从底物S转变为产物P,酶催化此反应时,其发生变化的过程表达为 31酶的活性部位应处在多肽链的A一个点上 B一条线上 C一个面上 D一个空间(三维)32下列维生素中属于脂溶性维生素的是A遍多酸 B胆钙化醇 C叶酸 D吡哆醇33引起脚气病是由于缺乏A硫胺素 B胆碱 C乙醇胺 D丝氨酸34辅酶A的生理功能是A递氢体 B转移酰基 C转移酮基 D递电子体35辅酶A的前体是A核黄素 B泛酸 C硫胺素 D钴胺素四、判断题1、米氏常数(Km)是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。( 

30、0; )2、同工酶就是一种酶同时具有几种功能。(   )3、辅基与酶蛋白的结合不紧密,可以用透析的方法除去。(   )4、一个酶作用于多种底物时,其最适底物的Km值应该是最小。(   )5、一般来说酶是具有催化作用的蛋白质,相应地蛋白质都是酶。(    )6、酶活性中心是酶分子的一小部分。(    )7、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。(    )8、竞争性抑制剂在结构上与酶

31、的底物相类似。(    )9、L-氨基酸氧化酶可以催化D-氨基酸氧化。(    )10、维生素E的别名叫生育酚,维生素K的别名叫凝血维生素。(    )11、泛酸在生物体内用以构成辅酶A,后者在物质代谢中参加酰基的转移作用。(   )12、本质为蛋白质的酶是生物体内唯一的催化剂。(   )五、分析计算1在一个化学反应中,反应物分子必需达到最基本的能量状态才能发生反应。反应物分子的这一状态叫做转换态(过渡态或活化态)。

32、反应物分子由基态到转化态所需能量叫做活化能。该反应的速度取决于每单位时间内进入转换态的分子数量。(1)用什么方法可达到增加进入转换态分子数量?(2)对于生物体来说,哪种方法最具意义?2延胡索酸酶催化延胡索酸水合形成苹果酸,其逆反应苹果酸脱水转变成延胡索酸也能被该酶催化吗?为什么?3借助米氏方程来研究底物浓度对酶反应速率影响的一种有用方法是,在规定的实验条件下检验这个方程。在下述条件下,方程呈什么形式?说明什么问题?(1)当S=Km (2)当S>>Km (3)当S<<Km时4在不同底物浓度下,测定了凝乳蛋白酶的反应初速度,运用下面的数据确定该酶对它的底物的Vmax和Km。

33、S(mmol/L): 0.00125 0.01 0.04 0.10 2.0 10V(mmol/L·min): 14 35 56 66 69 705甘油醛-3-磷酸脱氢酶,一种相对分子质量为40000的四聚体蛋白,它含有四个活性部位。在最适条件下,5微克纯酶每分钟催化2.8微摩甘油醛-3-磷酸转变成3磷酸甘油酸。试计算该酶的比活力和单个活性部位的转化数。6在胆绿素还原酶的纯化过程中,测定了其中几个纯化步骤的总活力及蛋白质的含量。请计算出每个纯化步骤的比活力、纯化倍数和回收率。纯化步骤总蛋白质量/mg总活力单位超速离心上清液27362563.6硫酸铵盐析978.52050.9DEAE-纤

34、维素柱层析18.31320.7SephadexG-100柱层析3.87307研究某抑制剂对单底物酶催化反应的影响,获得如下表的结果S(mmol·L-1)V(mol·L-1·min-1)I(mmol·L-1)00.51.00.050.300.500.370.500.400.400.800.670.570.500.830.710.63(1)该抑制剂是竞争性抑制还是非竞争性抑制?(2)在无抑制剂存在时,该酶促反应的Vmax和Km是多大?(3)在有抑制剂存在时,该酶促反应的Vmax和Km是多大?(4)该反应的抑制常

35、数(Ki)是多少?8把鸡蛋保存在冰箱4-6周而不会损坏。但将去除卵清的卵黄保存在冰箱中时,很快会变质。(1)什么原因引起损坏?(2)为什么卵清能防止卵黄损坏?(3)这种保护方式对鸟类来说,其生物学上的优点是什么?第四单元 核酸化学 测试题一、名词解释1.单核苷酸(mononucleotide);2.磷酸二酯键(phosphodiester bonds);3.不对称比率(dissymmetry ratio);4.碱基互补规律(complementary base pairing);5.反密码子(anticodon);6.顺反子(cistron);7.核酸的变性与复性(denaturation、r

36、enaturation);8.退火(annealing);9.增色效应(hyper chromic effect);10.减色效应(hypo chromic effect);11.噬菌体(phage);12.发夹结构(hairpin structure);13.DNA的熔解温度(melting temperature Tm);14.分子杂交(molecular hybridization);二、填空题1.DNA双螺旋结构模型是_于_年提出的。2.核酸的基本结构单位是_。3.脱氧核糖核酸在糖环_位置不带羟基。4.两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于_中,RNA主要位于_中。5.核酸分子中的

37、糖苷键均为_型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_键。核苷与核苷之间通过_键连接成多聚体。6.核酸的特征元素_。7.碱基与戊糖间是C-C连接的是_核苷。8.DNA中的_嘧啶碱与RNA中的_嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。9.DNA中的_嘧啶碱与RNA中的_嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。10.DNA双螺旋的两股链的顺序是_关系。11.给动物食用3H标记的_,可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。12.B型DNA双螺旋的螺距为_,每匝螺旋有_对碱基,每对碱基的转角是_。13.在DNA分子中,一般来说G-C含量高时,比重_,Tm(熔解温度)则_,分子比较稳定。14.在_条件下,互补的单股核苷酸序列将缔

38、结成双链分子。15._RNA分子指导蛋白质合成,_RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。16.DNA分子的沉降系数决定于_、_。17.DNA变性后,紫外吸收_,粘度_、浮力密度_,生物活性将_。18.因为核酸分子具有_、_,所以_nm处有吸收峰,可用紫外分光光度计测定。19.双链DNA热变性后,或在pH2以下,或在pH12以上时,其OD260_,同样条件下,单链DNA的OD260_。20.DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈_。21.DNA所在介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围愈_,熔解温度愈_,所以DNA应保存在较_浓度的盐溶液中,通常为_mol/L的NaCI溶液。22

39、.mRNA在细胞内的种类_,但只占RNA总量的_,它是以_为模板合成的,又是_合成的模板。 23.变性DNA 的复性与许多因素有关,包括_,_,_,_,_,等。24.维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如_,_和_也起一定作用。25.mRNA的二级结构呈_形,三级结构呈_形,其3末端有一共同碱基序列_,其功能是_。26.常见的环化核苷酸有_和_。其作用是_,他们核糖上的_位与_位磷酸-OH环化。27.真核细胞的mRNA帽子由_组成,其尾部由_组成,他们的功能分别是_,_。28. 28.DNA在水溶解中热变性之后,如果将溶液迅速冷却,则DNA保持_状态;

40、若使溶液缓慢冷却,则DNA重新形成_。三、选择题1.ATP分子中各组分的连接方式是A.R-A-P-P-P   B.A-R-P-P-P   C.P-A-R-P-P   D.P-R-A-P-P2.hnRNA是下列哪种RNA的前体?A.tRNA   B.rRNA   C.mRNA   D.SnRNA3.决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是A.XCCA3末端   B.TC环   C.DHU环   D.额外环   E.反密码子环4.根据Watson-Crick模型,求得每一微米DNA双螺旋含核苷酸对的

41、平均数为A.25400   B.2540   C.29411   D.2941   E.35055.构成多核苷酸链骨架的关键是A.23-磷酸二酯键   B. 24-磷酸二酯键   C.25-磷酸二酯键   D. 34-磷酸二酯键   E.35-磷酸二酯键6.与片段TAGAp互补的片段为A.AGATp   B.ATCTp   C.TCTAp   D.UAUAp7.含有稀有碱基比例较多的核酸是A.胞核DNA   B.线粒体DNA   C.tRNA   D. m

42、RNA8.真核细胞mRNA帽子结构最多见的是A.m7APPPNmPNmP   B. m7GPPPNmPNmP   C.m7UPPPNmPNmP   D.m7CPPPNmPNmP E. m7TPPPNmPNmP9. 9. DNA变性后理化性质有下述改变A.对260nm紫外吸收减少   B.溶液粘度下降   C.磷酸二酯键断裂   D.核苷酸断裂10.双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致A.A+G   B.C+T   C.A+T   D.G+C   E.A+C11.密码子GA,所识别

43、的密码子是A.CAU   B.UGC   C.CGU   D.UAC   E.都不对12.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接,连接方式是A.2-5   B.3-5   C.3-3   D.5-5   E.3-313.在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是A.AMP   B.GMP   C.CMP   D.UMP14.下列对于环核苷酸的叙述,哪一项是错误的?A.cAMP与cGMP的生物学作用相反   B. 重要的环核苷酸有cAMP与cGMPC.c

44、AMP是一种第二信使     D.cAMP分子内有环化的磷酸二酯键15.真核生物DNA缠绕在组蛋白上构成核小体,核小体含有的蛋白质是A.H1、H2、 H3、H4各两分子     B.H1A、H1B、H2B、H2A各两分子C.H2A、H2B、H3A、H3B各两分子   D.H2A、H2B、H3、H4各两分子E.H2A、H2B、H4A、H4B各两分子16自然界游离核苷酸中,磷酸最常见是位于:A戊糖的C-5上 B戊糖的C-2上 C戊糖的C-3上 D戊糖的C-2和C-5上E戊糖的C-2和C-3上17可用于测量生物样品中核酸含量的元素是:A碳 B氢 C氧

45、 D磷 E氮18下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA:A尿嘧啶 B腺嘌呤 C胞嘧啶 D鸟嘌呤 E胸腺嘧啶19核酸中核苷酸之间的连接方式是:A2,3磷酸二酯键 B糖苷键 C2,5磷酸二酯键 D肽键E3,5磷酸二酯键20核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近?A280nm B260nm C200nm D340nm E220nm21有关RNA的描写哪项是错误的:AmRNA分子中含有遗传密码 BtRNA是分子量最小的一种RNA C胞浆中只有mRNADRNA可分为mRNA、tRNA、rRNA E组成核糖体的主要是rRNA22大部分真核细胞mRNA的3-末端都具有:A多聚A B多聚U C多聚T D多

46、聚C E多聚G23DNA变性是指:A分子中磷酸二酯键断裂 B多核苷酸链解聚 CDNA分子由超螺旋双链双螺旋D互补碱基之间氢键断裂 EDNA分子中碱基丢失24DNA Tm值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致?AG+A BC+G CA+T DC+T EA+C25某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%,则胞嘧啶的含量应为:A15% B30% C40% D35% E7%26DNA分子中的碱基组成是:AA+C=G+T BC=G CA=T DC+G=A+T27含有腺苷酸的辅酶有:ANAD+ BNADP+ CFAD DFMN28DNA水解后可得到下列哪些最终产物:A磷酸 B核糖 C腺嘌呤、鸟嘌呤 D胞嘧啶、尿

47、嘧啶29关于DNA的碱基组成,正确的说法是:A腺嘌呤与鸟嘌呤分子数相等,胞嘧啶与胸嘧啶分子数相等 B不同种属DNA碱基组成比例不同C同一生物的不同器官DNA碱基组成不同 D年龄增长但DNA碱基组成不变30DNA二级结构特点有:A两条多核苷酸链反向平行围绕同一中心轴构成双螺旋 B以A-T,G-C方式形成碱基配对C双链均为右手螺旋 D链状骨架由脱氧核糖和磷酸组成31tRNA分子二级结构的特征是:A3端有多聚A B5端有C-C-A C有密码环 D有氨基酸臂32DNA变性时发生的变化是:A链间氢链断裂,双螺旋结构破坏 B增色效应 C粘度增加 D共价键断裂33mRNA的特点有:A分子大小不均一 B有3-

48、多聚腺苷酸尾 C有编码区 D有5C-C-A结构34影响Tm值的因素有:A一定条件下核酸分子越长,Tm值越大 BDNA中G,C对含量高,则Tm值高C溶液离子强度高,则Tm值高 DDNA中A,T含量高,则Tm值高35真核生物DNA的高级结构包括有:A核小体 B环状DNA C染色质纤维 D-螺旋四、判断题( )1.DNA是生物遗传物质,RNA则不是。( )2.脱氧核糖核苷中的糖环3位没有羟基。( )3.原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。( )4.核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。( )5.生物体的不同组织中的DNA,其碱基组成也不同。( )6.核酸中的修饰成分(也叫稀有成分)大部

49、分是在tRNA中发现的。( )7.DNA的Tm值和AT含量有关,AT含量高则Tm高。( )8.真核生物mRNA的5端有一个多聚A的结构。( )9.DNA的Tm值随(A+T)/(G+C)比值的增加而减少。( )10.B-DNA代表细胞内DNA的基本构象,在某些情况下,还会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构象。( )11.DNA复性(退火)一般在低于其Tm值约20的温度下进行的。( )12.用碱水解核酸时,可以得到2和3-核苷酸的混合物。( )13.生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。( )14.mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。( )15.tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。( )16.对

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