离子色谱操作教程

1、离子色谱操作教程离子色谱操作程序一、准备工作：? 去离子水：必须准备足量的去离子水? 淋洗液：配制好要用的淋洗液? 配制标准溶液：提前准备好预分析离子的标准溶液（均用去离子水配制）? 样品：进样前要用 0.45 m的过滤膜过滤? 检查淋洗液的液面高度，不应低于 200ml二、开关机：1、 开机：? 打开 N2 保护气，调钢瓶分压在 0.1-0.2Mpa 之间，淋洗液前仪器压力表 3-6psi 之间；? 打开 IC 、PC 电源开关；打开仪器软件开关、开泵；? 开泵稳定一段时间后压力大于 1000psi 后打开抑制器；? 检验仪器是否正常： 压力 1300-1500psi 以下，一般阳离子 11

2、40-1160psi之间，阴离子在 1140-1180之间；系统压力的波动应小于± 10psi；阴离子的背景电导应低于 20S；阳离子的背景电导应低于 10S；内部无泄漏；抑制器、废液出口有连续气泡，泵出口无气泡2、 关机：? 关抑制器? 关泵? 关软件? 关保护气? 关电源? 击“ OK ”，点击“下一步”，确认泵的工作方式（isocratic ）、淋洗液通道 A、高/低压极限（设为 0-3000psi）和流速是否正确， 点击“下一步”。选择手动进样“ manual ”，进样时间设为 30s? 将 acquisition time 调整至 0-18min ，点击“下一步”，确认以下

3、参数：采样频率（ 5Hz），自动调零“ Yes”池温柱温均为“ 35”选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，电流为推荐值，点击“下一步”? 选择“ review the program in a new window ”，点击“完成”? 在程序的第一行添加一下提示信息： message “请进样”，删除“0.000”的“inject ”（注意：绿色字体为注释信息，不起作用）? 存盘退出（推荐存入独立的“ program ”子目录中）2、 建立方法文件（ mothed file ）? 依次点击 file 和 new，选择 method file? 依次点击 file 和 save as，存盘退出（推荐

4、存入独立的“ method”子目录中）3、 建立样品表（ sequence）? 依次点击 file 和 new，选择 sequence（using wizard ），点击“ OK ”，点击“下一步”（连续两次次）填入未知样的数量“ number of”和每个样的平行测定次数 “injection per ”，点击 “apply ”，点击“下一步” ，填入标准样品的数量“ number of”和每个样的平行测定次数 “injection per ”，点击“ apply ”，点击“下一步”，选择正确的程序文件，点击“ open”，选择正确的方法文件，点击“ open”，选择方法文件和程序文件， 选

5、择正确的报告文件， 点击“下一步”，为这个 sequence起名“ sequence name”，点击“完成”8、运行标准样品? 点击蓝色圆形图标 （acquisition on/off ），选择“yes”，停止采集基线? 依次点击 batch 和 start 。? 点击“ add”，打开需要运行的样品表? 点击“ ready check ”，如果样品表没有错误，将出现“ ready check was successful ”提示，点击“确定”? 点击“ start ”，注入样品，点击“确定”4、 处理标准曲线（以多点校正为例）? 依次点击 file 和 browser ，双击需要处理的标准

6、样品文件（第一个标准点） ，依次点击 view和 QNT-Editer? 点击屏幕左下角“General ”，在“Dimension of ”处输入浓度单位“ mg/L ”? 点击相邻的“ Detection ”，设定最小峰面积为0.005。点击键盘“”，选择“是（ Y ）”将新生成的“Minimum Area ”重新选为“InhibitIntegration ”，按“ Enter ”键? 点击键盘的“”后，将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处，在 Ret.Timemin 的第三行输入屏幕左下角显示的时间“ 2.5”? 点 击 相 邻 的 “ Peak Table ” 选 择 Edit 、

7、Autogenerate Peaktable ，依次点击 OK 和确定，在“ Peak Name”下顺序输入离子名称，注意：定性分析到此结束。如需进行单点校正，直接执行下一步。在“ Cal.Type ”下“ Lin ”处双击左键，选择“ Linear with Offset ”，点击“OK ”，在“ Loff ”处点击右键，从弹出的对话框中选择“ Fill Column ”? 点击相邻的“ Amount Table ”，注意：如果进行单点校正，在“ Amount mg/L ”处输入各个组分的浓度，存盘退出? 在“ Amount mg/L ”处点击右键，依次选择Columns 和 Edit Am

8、ount Columns 。点击 “Auto-Generate ”，按“Apply ”键，按“OK ”键退出? 在“Amount ”下输入各个组分的标准点浓度，屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲线， 点击“ Integration ”图标，选择“ Calibration ”，查标准曲线合格后，存盘退出离子色谱的基本操作一、淋洗液的配制：? 阳离子 20mM 的 MSA （甲磺酸）。配制： 2.6mlMSA （分析纯即可）溶解在 2 升的淋洗液瓶中。注意配制过程中 MSA 要用 0.45um 的滤膜过滤，以防止堵塞管路。? 阴离子 3.5mMNa 2CO3/1.0mMNaHCO 3。配制：称取

9、37.1g Na2CO 3/8.4g NaHCO 3（分析纯即可）定容于 1 升的容量瓶中，配成350mMNa 2CO3/100mMNaHCO 3 的阴离子淋洗液母液 （可保留半年），用前需稀释 100 倍，即取 20ml 母液于 2 升的淋洗瓶中。? 注意：淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。二、样品前处理? 过滤： 0.22 m, 0.45 m过滤膜? 稀释：未知样品稀释 100 倍? 基体消除：去除样品中所包含的， 有可能损坏仪器或者影响色谱柱 /抑制器性能的成分（如：重金属离子、有机大分子）去除样品中所包含的，有可能干扰目标离子测定的成分（如：高离子强度基体）三、 SRS 使用注意事项?

10、淋洗液中含有机溶剂时， 使用外接水或者化学抑制；? 尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命；? 抑制器与泵同时开关；或当泵压 1000psi 以上在开抑制器? 每周至少开机一次，保持抑制器活性；? 长期不用应封存抑制器；? 重新启用前需要水化抑制器，具体操作如下： ASRS 从 ELUENT OUT 处注入 3mL H2O从 REGENIN处注入5mL H2O CSRS 从 ELUENT OUT 处注入 3mL H2O从 REGENIN处注入5mL H2O完成上述操作后，将抑制器平放30 分钟。四、阴、阳离子色谱柱的更换：? 准备工作：要在换柱之前开泵和抑制器洗柱，至少 3

11、0min ，直到仪器稳定为止， 因为仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。? 更换系统：更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器；接通电源，停泵，设置淋洗液存量；打开保护柱进口的接头， 开泵；排气泡，调节流速；清洗管路，用试纸检验流出溶液的 pH 值，与分离柱要求的淋洗液一致后停泵； 拧紧保护柱进口的接头，进行正常操作。? 注意：每个接口的正确对应， 保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向， 保护柱箭头向下、 色谱柱箭头向上。抑制器连接时注意阴阳离子的不同，阴离子的 regen in/out 均为平头接口，而阳离子则只有 regen out 为平头接口，注意更换。换下来的柱子及抑制器一定要密封好，已保持内部

12、有溶液， 防止内部溶液干掉， 阴离子的抑制器 regen in/out 用专用堵头密封。? 柱子装好后先开泵看是否漏水（气） ，再装上外面的两块面板。五、 排气泡：如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。? 具体操作：首先开泵，将注射器插入右侧主泵，旋松主泵的旋钮， 此时有液体从泵中流出， 流到 8ml 左右关闭泵，拧紧主泵旋钮， 取出注射器，弹出注射器内气泡， 然后将注射器插回主泵，打开左侧副泵旋钮后， 再缓慢打开主泵旋钮，慢慢将注射器内液体推入泵内， 从副泵流出，旋紧两个泵的旋钮。六、测柱头压：要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。? 正常的柱头压力值： 过六通阀到保护柱前正常压力

13、 100psi 以下；过保 护柱后 压力小于500-600psi；过分析柱后压力小于 1500psi；系统正常压力 1300-1500psi 以下。七、分离柱的存储与清洗? 分离柱的储存：在存储前用淋洗液正常运行至少 10min ，取下保护柱和分离柱， 用死接头将分离柱 /保护柱两端封堵? 分离柱的清洗：按清洗液色谱柱保护柱的流路进行清洗，流速为 1.0ml/min ；清洗程序及时间为：去离子水 -15min ，清洗液 -60min ，去离子水 - 15min ，淋洗液-30min? 清洗液的类型阴离子柱： 低价态亲水离子污染（常用 X10 倍淋洗液 高价态疏水离子污染80% 乙腈 /20% 200mM NaCl( 用 HCl 调节 pH=2.0) 金属离子污染 0.1M 草酸阳离子柱 高价阳离子 /酸溶性污染 10mM HCl(15min) 1MHCl(60min)10mM HCl(15min) 疏水性阳离子 /有机污染 10% 100mM HCl/ 90%乙腈 (30min)八、抑制器的存储与清洗? 抑制器的存储：? 抑制器的清洗：以 1.0mL/min 的流速，按清洗 液 -ELUENT IN-ELUENT OUT-REGEN IN-REGEN OUT 流路进行清洗? 清洗液的类型阴离子抑制器 金属污染或沉