山楂精降脂胶囊的质量标准研究

1、山楂精降脂胶囊的质量标准研究                  作者：朱才庆 李艳 吴迪 何南生 曾宪仪 余华 【摘要】  目的以山楂对照药材和熊果酸作为对照品，分别建立薄层色谱（TLC）鉴别和高效液相色谱（HPLC）法控制山楂精降脂胶囊的质量。方法TLC鉴别用甲苯-醋酸乙酯-甲酸（20:4:0.5）为展开剂；HPLC法采用Alltima C18色谱柱（5 m，4.6 mm×250 mn），用乙腈-甲醇-水-乙酸铵(

2、70:16:14 :0.5)为流动相，检测波长220 nm；柱温25；流速1.0 ml/min。结果TLC鉴别图谱斑点清晰，阴性无干扰；熊果酸含量1.796 817.968 0 g范围内呈良好线性关系，得回归方程Y44 820X+5 725.5，r=0.999 9，平均加样回收率及RSD分别为101.17%和1.02%。结论以熊果酸为对照品，采用TLC法和HPLC法控制山楂精降脂胶囊质量的方法简便快速、准确可靠、重复性好，专属性强。 【关键词】  山楂精降脂胶囊 薄层鉴别 高效液相色谱 熊果酸山楂精降脂胶囊是由山楂提取物制成的中药单方制剂，是由山楂精降脂片经剂型改变而来，功能与主治为

3、降血脂，可用于治疗高血脂症，亦可作为冠心病和高血压病的辅助治疗1。文献报道山楂主要含黄酮类有机酸和三萜类等有效成分，其中金丝桃苷、熊果酸是山楂中黄酮和三萜类物质的主要成分2，3。研究表明黄酮类成分具有降压、增加冠脉血流量、降血脂、强心和抗心律失常的药理作用，而三萜类成分有降低高脂模型小鼠血脂的作用47。原标准只有理化鉴别和UV法测定总黄酮的含量，专属性不强。为了提高产品的质量可控性，以山楂对照药材及熊果酸对照品为对照，探讨TLC鉴别和HPLC法测定熊果酸含量的质量控制法。   1   器材   1.1   仪器&#

4、160; 高效液相色谱仪(大连依利特分析仪器有限公司)：P200 II型高压恒流泵，UV200 II 紫外可变波长检测仪，Rheodyne 7725i 高压六通进样阀，20 l定量环；HW色谱工作站（南京千谱软件有限公司）；百万分之一电子天平（瑞士Mettler公司M3型）。   1.2   试药 山楂精降脂胶囊（由本实验室自制）；山楂对照药材(中国药品生物制品检定所，批号：121138-200403)；熊果酸对照品（供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号:110742-200415）；乙腈、甲醇为色谱纯（中国医药集体上海化学试剂公司）；水为自制的重

5、蒸水，其余试剂均为分析纯。   2   方法与结果   2.1  山楂的薄层鉴别取山楂精降脂胶囊4粒，倾出内容物，加甲醇25 ml，超声30min，滤过，滤液浓缩至2 ml，作为供试品溶液；另取山楂对照药材1 g，加70乙醇25 ml，回流30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水5 ml溶解并加盐酸5 ml（6 mol/L），水浴水解30   min，抽滤，滤液弃去，滤渣加水洗至洗涤液呈中性,滤渣连同滤纸80干燥后，加甲醇25 ml，超声提取30 min，滤过，滤液浓缩至1 ml，作为对照药材溶液。取熊果酸

6、对照品，加甲醇制成每1毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法8试验，吸取供试品溶液5 l、对照药材溶液510 l、对照品溶液4 l，分别点于同一含0.2%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（2040.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇试液，105加热数分钟。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图1。   1,2,3.供试品  4.山楂对照药材  5.熊果酸对照品  6.阴性对照   图1  山楂精降脂胶囊薄层鉴别 &

7、#160; 2.2   熊果酸的含量测定            3  讨论   山楂精降脂胶囊是由山楂药材提取物组成的单方制剂。山楂中含有山楂酸、酒石酸、胡萝卜素、维生素B1、维生素B2、维生素C、黄酮类、内酯、糖类及苷类、有机酸、鞣质、蛋白质、脂肪、钙、磷、铁等。迄今为止，国内外学者从山楂中已分离得到槲皮素、金丝桃苷、芦丁等。原片剂标准中有两个理化鉴别和1个含量测定指标（以槲皮素为对照品，运用UV法进行总黄酮的含量测定），理化鉴别由于专属性不强

8、而被删去，而总黄酮含量在山楂提取物原料中已控制，制剂中再控制同一指标意义不大，且供试品处理方法繁琐，故在新制剂中未采用该法。山楂中有机酸类含有熊果酸，它有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、保肝、降血脂等作用，选择其作为控制质量标准的指标之一，具有一定的实际意义。因此，本研究中选用熊果酸对照品和山楂对照药材为对照，新建立了制剂薄层鉴别，彩照斑点清晰，阴性无干扰，与理化鉴别相比，专属性大大增加，提高了制剂质量的可控性。结合本制剂的实际情况，通过对流动相不断摸索，采用高效液相色谱法测定制剂中熊果酸的含量，取得成功，方法简便可行，准确可靠，使制剂的质量更加可控。【参考文献】  1 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂,第9册S.2 石岩鹏, 丁杏苞. 山楂化学成分的研究J. 中草药, 2000, 31 (3) :173.3 孙敬勇, 杨书斌, 谢鸿霞, 等.山楂化学成分研究J. 中草药, 2002, 33(6):483.4 罗玉梅, 王贺振. 山楂的化学成分及药理研究进展J. 时珍国医国药, 2004, 15(1):53.5 王月刚, 陈素云. 山楂对心血管系统的药理作用研究J. 中医药信息, 2000, 6:29.6 李贵海, 孙敬勇,