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文档简介

1、第一节 绪论1、临床检验分析技术的分类 临床化学检验分析技术 临床免疫学检验分析技术 临床血液学检验和尿液检验分析技术 临床微生物学检验分析技术 临床分子生物学检验分析技术2,临床检验仪器有哪些?1、半自动生化分析仪;2、血气分析仪3、电解质分析仪4、血细胞分析仪5、尿液分析仪6、尿沉渣分析仪3、各仪器用途。自己对应仪器名字看书吧第二节 光电比色法1、朗伯-比尔定律:当用一束单色光照射到吸收溶液时,其吸光度与液层厚度及溶液浓度成正比。A=kbc C:溶液浓度b:液层厚度 A:吸光度k:吸光系数成立条件:待测物为均一的稀溶液、气体等,无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射;入射光为单色平行光2、吸收光谱

2、的定义:当依次将各种波长的单色光通过某一有色溶液,测量每一波长下有色溶液对该波长光的吸收程度(吸光度A),然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得到一条曲线,称为该溶液的吸收曲线,亦称为吸收光谱。3、对于吸收光谱曲线: (1)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长max (2)不同浓度的KMnO4溶液的光吸收曲线形状相似,其最大吸收波长不变; 不同物质吸收曲线的形状和最大吸收波长均不相同。光吸收曲线与物质特性有关,故据此可作为物质定性分析的依据。(3)同一物质不同浓度的溶液,在一定波长处吸光度随溶液的浓度的增加而增大。这个特性可作为物质定量分析的依据。在测

3、定时,只有在max 处测定吸光度,其灵敏度最高。 因此,吸收曲线是吸光光度法中选择测量波长的依据。4、光电比色计原理:利用光电池或光电管等光电元件作检测器来测量通过有色溶液的透射比和吸光度,进而求出物质含量的方法叫光电比色法,基于这种方法而设计的仪器叫光电比色计。6光电比色计结构光源滤光片比色皿检测器放大显示7、分光光度计结构光源单色器(解释)比色皿检测器显示系统8、标准比色皿:国际规定,液层厚度为10mm的比色皿为标准比色皿。(选择)9、光电检测器:把光信号转换为电信号的装置 工作原理: 光电效应10、单色器:是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置组成:入射狭缝色散元件准

4、直镜出射狭缝作用:1)入射狭缝:限制杂散光进入;2)色散元件:将复合光分解为单色光,有棱镜和光栅两种;3)准直镜:1.从入射狭缝来的光线经准直镜反射,变为平行光投照到色散元件上;2.将来自色散元件的平行光束聚集在出射狭缝上;4)出射狭缝:将固定波长范围的光射出单色器,可以限制通带宽度。11、双波长分光光度计工作原理:将从同一光源发出的光分为两束,分别经两个单色器分光后得到两束不同波长 两个单色器分光后得到两束不同波长(p ,s)的单色光,经斩光器使两束光以一定频率交替照射同一样品,测定两个波长下的吸光度差值(A=Ap -As ),将A 用于计算结果。根据朗伯- -比尔定律得: 当p s相差不太

5、大时,由同一待测溶液产生的光散射吸光度和背景吸光度大致相等,即 光散射吸光度和背景吸光度大致相等,即Ap=As,则有: A= A p -A s = ( p - -s)LC 双波长差吸光度法可以克服溶液浑浊的影响,共存组分吸收谱线吸收叠加的干扰,以及减少比色杯光线不均等优点。第三节 生化分析技术1、 生化分析仪最常用分类:流动式、离心式、分立式、干片式。2、 结构与工作过程 此空格内为“控制单元”3、恒温系统恒温方法:1)水浴式恒温2)空气浴恒温第四节、流式细胞术1、 流式细胞仪分类:临床型(分析功能)、科研型(分析与分选功能)2、 分析原理:3、 分选原理:4、 鞘液原理: 5、 带通滤波片波

6、长范围: 上下限为滤波片数值加减15,如525nm对应的是510-540nm6、 氩离子激光器光谱为488nm第五节、血细胞分析仪1、 库尔特原理:微小粒子通过特殊的小孔时可产生电阻变化这一现象,其称为库尔特原理.2、 电阻抗血细胞计数原理: 当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外电极之间恒流源电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电压脉冲信号。产生的脉冲信号数,等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比。3、 小孔换能器4、 血细胞分类计数:实际进行血细胞分析时,有两个计数池,一个池计数红细胞、血小板,另外一个池加溶血剂后计数白细胞,并对血红蛋白进行测定。;红细胞和血小板共用一个小

7、孔管,正常人红细胞体积和血小板体积间有一个明显界限,血小板计数准确容易。5、 电阻抗法只能分辨出红细胞、白细胞和血小板,不能区分白细胞的三个亚群,要区分亚群,就要用到下面的白细胞分类技术6、 白细胞分类技术(一)容量、电导、光散射检测技术;(二)体积和细胞化学分类计数;(三)阻抗与射频联合法;(四)光散射与细胞化学技术联合法;(五)多角度偏振光散射技术。7、哪种分类没有用电阻抗分类技术(四)光散射与细胞化学技术联合法;(五)多角度偏振光散射技术 这两种分类方法没有用电阻抗技术(这题树昌不肯定,ppt没有讲清楚,这题如果考试出了的话自己抉择)第六节、尿沉渣分析仪1、流式细胞术尿沉渣分析仪工作原理

8、:1.) 稀释、染色的标本通过鞘液池2.) 氩激光照射3.) 测定荧光、散射光和电阻抗2、影像式尿沉渣分析仪工作原理与人工显微镜相似,其检测主要靠两个快速移动的CCD摄像头对样品计数池扫描,两个镜头的放大倍数分别为100和400倍,镜头所得影像数据化,取六个平均数据,经染色后,屏幕显示尿沉渣有形成分,图象可以贮存。3、尿沉渣分析仪与显微镜检查比较1)影像式尿沉渣分析仪:经过严格的定时、定速离心,留取定量的尿沉渣,以标准单位定量报告,因此同手工显微镜方法相比,它的分析标准定量、视野清晰、精确度较高,但许多步骤仍需人为操作,故仍可能存在人为误差。2)流式细胞术尿沉渣分析仪尿液不需离心,标本用量少,

9、检测细胞多,每一标本分析量相当于显微镜检测50个高倍视野;检测速度快,每小时可检测100个尿液标本;每一标本检测步骤模式一致,且易于质量控制和标准化,因而检测精确度较高。沉渣自动分析仪目前尚不能检出滴虫、脂肪滴或药物、结晶等,也不能鉴别异常细胞,大量细菌、酵母菌还会干扰计数,对影红细胞容易漏诊;尤其不能明确病理性管型的分类。4、 干化学试剂带结构:试剂带采用多层结构:第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质对反应的污染,保证试剂带的完整性;第二层绒制层,它包括过碘酸盐区和试剂区,过碘酸盐区可破坏维生素C的干扰物质,试剂区含有试剂成分,主要与尿液所测定物质发生化学反应,产生颜色变化;第三层是吸水层

10、,可使尿液均匀快速地浸入,并能抑制尿液流到相邻反应区;最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。5、尿液干化学分析仪的组成和工作原理尿液分析仪一般由光学系统(光电转换系统)、扫描机构(光学驱动部分)、控制机构、I/V转换器、CPU板、残尿吸取机构、试剂带位置检测及打印机、显示器、功能键等部分组成。仪器系统由CPU控制,当试剂带放到试剂架上后,CPU根据试剂带位置检测信号和控制键的信号指挥控制机构和扫描机构,驱动光学系统对试剂带进行扫描。光电系统上光电转换元件将各试剂的反射光信号(测定光和参考光)变成电信号(电流信号),再经I/V转换器把电流信号变成电压信号并放大,再经电子开关和A/D转换送到C

11、PU板。CPU具有存储数据产生控制信号及各有光信号的及各有关的检测信号处理后,由打印机打印出测试结果。第七节、电化学分析技术1、 人体电解质正常指标及临床意义。体液中电解质以Na+ 、K+、CL-的含量最高,对维持体液的渗透平衡及酸碱平衡起重要作用。2、 离子选择性原理利用各种活性膜直接测量溶液中特定离子浓度的电极叫离子选择性电极(Ion-Selective Electrode),简称ISE.它能选择性的响应待测离子的浓度(活度)而对其他离子不响应,或响应很弱,其电极电位与溶液中待测离子活度的对数成线性关系,即遵循能斯特方程。3、 能斯特方程4、原电池:若要得到某一指示电极的电位,还需要用一个能提供稳定的电极电位的参考电极与参考电极组成电池。这种由指示电极、参比电极与被测溶液构成,能产生电能的电池称为原电池。两电极间的电位差称为电池电动势。指示电极:在原电池中,借以反映离子活度的电极。即电极电位随溶液中待测离子活度的变化而变化,并能指示待测离子活度。参比电极:电极电位稳定且已知,用作比较标准的电极。电化学分析中常用的参比电极是:甘汞电极和Ag/AgCl电极。5、 PH玻璃膜电极:6、 电化学法测量血液pH值7、离子选择性电极作作正极时: 对阳离子响应的电极,取正号; 对阴离子响应的电极,取负号8、 PCO2分压电极测定原理9、 PO2电极测定原理PO2 电极

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