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1、上海交通大学网络教育学院医学院分院生物化学技术课程习题册答案专业：检验技术层次：专升本绪论一、名词解释1 .生物化学技术：是研究生物体的化学组成、结构、功能以及在生命活动中化学物质的代谢、调节限制等的实验方法.2 .盐溶：蛋白质、酶及其它们与其它物质的复合体在离子强度低的盐溶液中,其溶解度随着盐溶液浓度的升高而增加,此现象称为“盐溶.3 .盐析：当溶液中盐浓度不断上升,到达一定程度,蛋白质等的溶解度反而逐渐减小,并先后从溶液中析出,称为“盐析.4 .透析：利用溶液组分能否通过半透膜并由引起膜两边溶液的化学势能不同,而到达去除溶液中的小分子物质.5 .超滤(反向渗透)：利用压力或离心力,迫使水和

2、其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质不能透过半透膜仍留在膜上.6 .凝胶层析法(GelChromatography):利用各种物质分子大小不同,在固定相上受到阻滞程度不同而到达别离的一种层析方法.二、单项选择题1 .凝胶层析不可应用于：(B)A.脱盐B.一步别离纯化生物大分子物质C.高分子溶液的浓缩D.测定高分子物质的分子量E.别离分子大小不同的物质2 .核酸在紫外区有强吸收,其最大吸收值是在波长：(C)A.206nmB.240nmC.260nmD.280nmE.304nm3 .对260nm波长的紫外有强吸收主要是由于(E)A.核糖的环式结构B.脱氧核糖的环式结构C.喋吟的双环结构D.喀咤的单

3、环结构E.喋吟和喀咤环中的共轲双键4 .蛋白质在紫外区有强吸收,其最大吸收值是在波长：(D)A.206nmB.240nmC.260nmD.280nmE.304nm5 .用紫外分光光度法测定蛋白质,由于蛋白质在紫外区有个最大吸收峰,其峰值波长是：DA.220nmB.245nmC.260nmD.280nmE.340nm6 .用吸收光谱法测量双链DNA勺含量为：(A)A.C(ug/ml)=A260X50x稀释倍数B.C(ug/ml)=A260X40x稀释倍数C.C(ug/ml)=A260X30x稀释倍数D.C(ug/ml)=A260X20x稀释倍数E.C(ug/ml)=A260X10x稀释倍数7 .

4、用吸收光谱法测量单链DNA勺含量为：(B)A.C(ug/ml)=A260X50X稀释倍数B.C(ug/ml)=A260X40x稀释倍数C.C(ug/ml)=A260X30x稀释倍数D.C(ug/ml)=A260X20x稀释倍数E.C(ug/ml)=A260X10x稀释倍数8 .用吸收光谱法测量RNA的含量为：(B)A.Cug/ml=A260X50X稀释倍数B.Cug/ml=A260X40X稀释倍数C.Cug/ml=A260X30x稀释倍数D.Cug/ml=A260X20x稀释倍数E.Cug/ml=A260X10x稀释倍数9 .以下哪一个比值说明DNA纯度较高：CA.A260/A280=1.4B

5、.A260/A280=1.6C.A260/A280=1.8D.A260/A280=2.0E.A260/A280=2.210 .以下哪一个比值说明RNA屯度较高：DA.A260/A280=1.4B.A260/A280=1.6CA260/A280=1.8D.A260/A280=2.0E.A260/A280=2.211 .某人提取DNA后,将DNA溶液稀释20倍,然后经紫外分光光度计检测结果为A260nm=0.44,A280nm=0.25,比色皿光径1cm,该DNA样品的浓度为：DA.250gg/mlB.264gg/mlC.352gg/mlD.440gg/mlE.220gg/ml12 .以下哪一种方

6、法不属于物理破碎细胞法：CA.组织匀浆法B.组织捣碎法C.有机溶剂法D.超声波法E,反复冻融法13 .以下哪一种方法适用于破碎细菌：DA.组织匀浆法B.组织捣碎法C.有机溶剂法D.超声波法E,反复冻融法14 .盐析时最常用的盐是：CA.硫酸钾B.硫酸钠C.硫酸镂D,硫酸镁E,氯化钠15 .测定蛋白质分子量的方法有：CA.不连续PAGE琼脂糖凝胶电泳、醋纤薄膜电泳B.IEF、聚酰胺薄膜双向层析、凝胶过滤C.超滤、SDS-PAGE凝胶过滤D.超速离心、透析、超滤E.SDS-PAGE、PAGEIEF16 .以下哪一种方法根据蛋白质的分子大小不同来别离：DA.离子交换层析B.聚酰胺薄膜双向层析C.亲和

7、层析D.凝胶层析E.薄层层析17 .以下哪一种方法根据蛋白质的带电性质差异来别离：AA.离子交换层析B.聚酰胺薄膜双向层析C.亲和层析D.凝胶层析E.薄层层析18 .要别离血浆蛋白取得某一单独组分,以下方法不能使用：CA.色谱法B.电泳法C.染料结合法D.盐析法E.层析法三、问做题1 .什么是生物化学技术？答：生物化学技术是研究生物体的化学组成、结构、功能以及在生命活动中化学物质的代谢、调节限制等的实验方法.2 .生物大分子的一般制备需要哪些步骤？答：选择材料和预处理；组织细胞的破碎及细胞器的别离；生物大分子的别离纯化；浓缩、枯燥和保存.3 .组织细胞破碎的方法有哪些？答：物理方法：匀浆器；研

8、钵；高速组织捣碎器；超声波；渗透压法；反复冻融法等.化学方法：有机溶剂破坏细胞膜的脂质双分子层.酶法：自溶法蛋白酶、酯酶；酶解法溶菌酶破坏微生物细胞壁的-1,4-糖昔键.4 .请归纳生物大分子别离纯化的方法,并简述方法原理.答：根据蛋白质溶解度不同：盐溶、盐析；根据蛋白质分子大小不同：透析和超滤、凝胶层析；根据蛋白质带电性不同：电泳、离子交换层析；根据蛋白质配体特异性：亲和层析；根据蛋白质分子密度不同：离心技术.5 .生物化学技术的特点有哪些？答：条件温和；实验条件与机体内环境尽量符合.6 .什么是盐溶和盐析？答：蛋白质、酶及其它们与其它物质的复合体在离子强度低的盐溶液中,其溶解度随着盐溶液浓

9、度的升高而增加,此现象称为“盐溶.当溶液中盐浓度不断上升,到达一定程度,蛋白质等的溶解度反而逐渐减小,并先后从溶液中析出,称为“盐析.7 .什么是透析和超滤？答：透析：利用溶液组分能否通过半透膜并由引起膜两边溶液的化学势能不同,而到达去除溶液中的小分子物质.超滤反向渗透：利用压力或离心力,迫使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质不能透过半透膜仍留在膜上.分光光度法原理一、名词解释1 .光谱技术：根据物质具有吸收、发射或辐射能散射的特征而建立起来的一类分析方法具有灵敏度高、测定简便、快速、不破坏试样等优点.2 .发射光谱分析法：根据物质受到热能或电能等物质激发所发射的特征光谱线进行定性及定量

10、分析的一种方法.3 .吸收光谱分析法：根据溶液能吸收由光源发出的某些波长光后所形成的光谱,利用这种光谱鉴定物质的性质和含量的一种方法.4 .散射光谱分析法：测定光线通过溶液混悬颗粒后光吸收或光散射程度的一类定量方法.5 .吸光系数：吸光系数是吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度.二、单项选择题1 .现测得某物质的透光度为10%那么其吸光度A为：DA.0.01B.0.1C.0.1D.1E.22 .现测得某物质的透光率为1%那么其吸光度A为：EA.0.001B.0.01C.0.2D.1E.23 .波长200400nm的电磁波为：CA.红外光B.可见光C.紫外光D.无线电波E.远红外4 .波长40

11、0760nm的电磁波为：BA.红外光B.可见光C.紫外光D.无线电波E.远红外5 .下面关于吸光度A与透光度T的关系的表达哪条是正确的？DA.吸光度是透光度的倒数B.吸光度是透光度的对数C.吸光度是透光度平方的对数D=吸光度是透光度倒数的对数E.吸光度是1-T的负对数6 .用同一个有色溶液,在同一波长处,分别使用光程为2mm4mm6mm8mmB勺比色皿在同一台分光光度计上测定其吸光度,问所测结果将会是：CA.用各种比色皿测得的吸光度相同B.它们的吸光度与光程呈对数关系C.它们的吸光度依次分别为：x、2x、3x、4xD.它们的吸光度依次分别为：x、x/2、x/3、x/4E.它们的吸光度之间没有一

12、定规律7 .调节分光光度计上狭缝的大小对单色光纯度的影响是：CA.狭缝愈大光纯度愈大B.狭缝愈小光纯度愈小Co狭缝愈小光纯度愈大D.狭缝的大小不影响光的纯度E.狭缝大小与光纯度成正比8 .以下两种方法同属于吸收光谱的是DA.原子发射光谱和紫外吸收光谱B.原子发射光谱和红外光谱C.红外光谱和荧光分析法D.原子吸收光谱和可见光分光光度法E.原子吸收光谱和透射比浊法9 .辐射能作用于粒子原子、分子或离子后,粒子选择性地吸收某些频率的辐射能,并从低能态基态跃迁至高能态激发态,这种现象称为CA.折射B.发射C.吸收D.散射E,透射10 .在检查一病人血红蛋白溶液时,在630nm波长处,出现一吸收峰,这说

13、明该病人血液中何种血红蛋白增高？CA.氧合血红蛋白B.脱氧血红蛋白C.高铁血红蛋白D.厥氧血红蛋白E.氧化高铁血红蛋白三、问做题1.什么是物质的吸光光谱？答：溶液中的物质在光的照射下激发产生了对光吸收的效应.物质对光的吸收具有选择性不同的物质具有不同的分子结构,不同物质对同一波长的单色光可有不同的吸光系数,各种不同的物质都有其各自的吸收光谱.吸收光谱是物质的特征曲线.一种物质在一定条件下pH、浓度、温度等具有一定形状的吸收光谱曲线,可用于化合物的鉴定和结构分析2.光吸收的根本原理和根本定律是什么？答：光的吸收和发射时分子或原子是不连续的量子化能级,只有当照射光的能量与被照射物质粒子的基态和激发

14、态能量差相当时才能发生吸收或发射.因此由于不同的物质具有不同的分子结构,不同物质电子跃迁时所需的能量差不同,其电子只能吸收与其相同的能量差并跃迁至一定能级,所以物质对光的吸收是选择性吸收.Lamber-Beer定律是说明吸光物质对单色光吸收的强弱与该物质的浓度和厚度间关系的定律,是光吸收的根本定律.3.吸光度和吸光系数两者有何关系？答：吸光系数是吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度.在给定条件单色光波长、溶剂、温度下,吸光系数是物质的特征性常数,只与该物质分子在基态和激发态之间的跃迁几率有关,是定性的依据,其值愈大测定灵敏度愈高.吸光系数常有两种表示方法：摩尔吸光系数即1摩尔浓度的溶液在厚度

15、为1cm时吸光度.A=cLo百分吸光系数E1%即浓度为1%w/v的溶液在厚度为1cm时的吸光度.A=E1%cL.电泳原理、醋酸纤维簿膜电泳CAME、琼脂糖凝胶电泳AGE一、名词解释1 .电泳：带电粒子在直流电场中向着电性相反电极移动的现象.2 .电泳分析技术：利用电泳现象对样品进行别离、鉴定或提纯的技术.3 .迁移率Mobility:带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度.M=V/E=Q/6%r刀.4 .等电点：蛋白质为两性电解质,兼有酸性基团-COOH及碱性基团-NH2.当在特定的pH溶液中所带的正负电荷数恰好相等,即分子的净电荷为零,此时蛋白质在电场中不再移动,溶液的这一pH称为该蛋白质的等电

16、点.5 .电渗：液体在电场中对于固体支持介质的相对移动,称电渗.6 .分子筛：在凝胶电泳中,支持介质的筛孔大小对待别离物质的电泳迁移速度有明显的影响,筛孔大泳动速度快；反之,那么泳动速度慢.7 .凝胶电泳：是由琼脂、琼脂糖、淀粉胶或聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳.、单项选择题1 .在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中,以下哪种物质带负电荷量最多？AA.白蛋白B.“1-球蛋白C.“1-球蛋白D.3-球蛋白E.丫-球蛋白2 .在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中,以下哪种物质带负电荷量最少？EA.白蛋白B.“1-球蛋白C.“1-球蛋白D.3-球蛋白E.丫-球蛋白3 .在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中,以下哪种物

17、质分子量最大？EA.白蛋白B.“1-球蛋白C.“1-球蛋白D.3-球蛋白E.丫-球蛋白4 .在血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳中,以下哪种物质分子量最小？AA.白蛋白B.“1-球蛋白C.“1-球蛋白D.3-球蛋白E.丫-球蛋白5 .在血清脂蛋白琼脂糖电泳中,以下哪种物质带负电荷量最多？AA.a-脂蛋白B.前3-脂蛋白C.3-脂蛋白D.乳糜微粒6 .在血清脂蛋白琼脂糖电泳中,以下哪种物质带负电荷量最少？DA.a-脂蛋白B.前3-脂蛋白C.3-脂蛋白D.乳糜微粒7 .在血清脂蛋白琼脂糖电泳中,以下哪种物质分子量最大？DA.a-脂蛋白B.前3-脂蛋白C.3-脂蛋白D.乳糜微粒8 .在血清脂蛋白琼脂糖电泳中

18、,以下哪种物质分子量最小？AA.a-脂蛋白B.前3-脂蛋白C.3-脂蛋白D.乳糜微粒9.有一混合蛋白质溶液,各种蛋白质的pl为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3,电泳时欲使其中四种泳向正极,缓冲液的pH应该是AD.4.0E.3.0pl分别为4.6、5.0,电泳时欲使它们泳向正极,缓D.3.0E.2.0A.7.0B.6.0C.8.610 .有一混合蛋白质溶液,其中蛋白质的冲液的pH应该是AA.6.0B.5.0C.4.011 .血清蛋白在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳,如其他条件相同,不同的仅是电场强度不同,问在何种情况下蛋白质泳动最快？BA.5v/1cmB.20v/1cmC.8v/1cmD.1

19、5v/1cmE.12v/1cm12 .血红蛋白在不同离子强度的pH8.6巴比妥缓冲液中电泳,如其他条件相同,在何者中电泳速度最快？AA.0.02M巴比妥缓冲液B.0.03M巴比妥缓冲液C.0.04M巴比妥缓冲液D.0.05M巴比妥缓冲液E.0.06M巴比妥缓冲液13 .现有一血清清蛋白和血红蛋白的混合液,欲用电泳法使其别离,问在何种pH值时别离最为有效血清清蛋白等电点为4.9,血红蛋白的等电点为6.8?EA.pH8.6缓冲?夜B.pH6.5缓冲?夜C.pH4.9缓冲液D.pH6.8缓冲?夜E.pH5.85缓冲液三、问做题1 .什么是电泳？什么是电泳技术？答：电泳即带电粒子在直流电场中向着电性相

20、反电极移动的现象.电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待别离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行别离、鉴定或提纯的技术.2 .根据电泳原理不同可将电泳技术分哪几类？答：自由界面电泳：在U形管中进行电泳,无支持介质,别离效果差,现已被淘汰.区带电泳：各组分在支持介质中被别离成许多条明显的区带,如滤纸电泳、醋纤膜电泳.稳态电泳：电泳迁移在一定时间后到达稳态,如等电聚焦和等速电泳.3 .电泳的根本原理是什么？什么是电泳的相对迁移率？答：电泳的根本原理是：一个质点,如能解离或能吸附带电颗粒,在电场中便会向电性相反电极移动.不同的质点,由

21、于带电性质、带电量、分子大小及形状的不同,在一定的电场强度下移动的方向和速度也不同,经一定时间电泳后彼此被分开.电泳的相对迁移率即带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度.M=V/E=Q/6兀r刀.4 .影响电泳速度的因素有哪些？答：影响电泳速度的因素有：电场弓II度；离子强度；缓冲液的pH;电渗；分子筛；待别离物质的性质.5 .醋酸纤维薄膜电泳的根本原理是什么？答：CAME以醋纤膜作支持物的一种区带电泳技术.在pH8.6的缓冲液中电泳时,血清蛋白质均带负电荷移向正极.由于血清中各蛋白组份的pl不同而致带电荷量不等,加之分子大小和形状各异,因而电泳迁移率不同,彼此得以别离.电泳后,CAM经染色和漂洗

22、,可清晰呈现5条区带.再经脱色、比色即可计算出血清各蛋白组份的相对百分数.6 .琼脂糖凝胶电泳的根本原理是什么？答：血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后,以琼脂糖为载体,在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳,由于各种脂蛋白所带的电荷及形状、大小不同而被别离.聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE、等电聚焦电泳IEF一、名词解释1 .聚丙烯酰胺凝胶：是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N-亚甲基双丙烯酰胺通过自由基聚合而成的一种多孔三维网状结构.2 .凝胶总浓度：100ml凝胶溶液中,Acr和Bis的总浓度.凝胶总浓度越大,孔径越小,适合别离小分子物质.3 .交联度：交联剂的百分含量即Bis占Acr与Bis总和的百分比.4 .

23、等电聚焦电泳：是一种利用具有pH梯度的支持介质来别离等点电不同的蛋白质的电泳技术.二、单项选择题1 .本学期所学的电泳中,需进行预电泳的有：CA.PAGEB.SDS-PAGC.IEFD.CAMEE.AGE1.1 EF电泳时DA.上极槽置酸液,下极槽置碱液B.酸液置负极槽,碱液置正极槽C.上极槽置碱液,下极槽置酸液D.碱液置负极槽,酸液置正极槽1.2 EF电泳时DA.上槽置酸液,下槽置碱液B.上槽置碱液,下槽置酸液C.负极槽置酸液,正极槽置碱液D.负极槽置碱液,正极槽置酸液4 .PAGE中,表示凝胶浓度的参数T值：CA. T越大,凝胶网孔越大,适用于别离大分子物质B. T越小,凝胶网孔越小,适用

24、于别离小分子物质C. T越大,凝胶网孔越小,适用于别离小分子物质D. T越小,凝胶网孔越小,适用于别离小分子物质5 .聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高,是由于具有一些特殊的效应,但除外：BA.浓缩效应B.粘度效应C.电荷效应D.分子筛效应1.1. PAGE中,TEMED所起的作用为AA.加速剂B.催化剂C.两者都是D.两者都不是7 .聚丙烯酰胺凝胶电泳不具有以下哪个效应？DA.浓缩效应B.分子筛效应C.电荷效应D.粘质效应8 .不连续与连续聚丙烯酰胺凝胶电泳相比,哪种效应是其特有？AA.浓缩效应B.分子筛效应C.电荷效应D.粘质效应9 .在PAGE中,AP所起的作用为BA.加速剂B.催化

25、剂C.两者都是D.两者都不是10 .过硫酸镂-TEMED系统常用于在制备：CA.淀粉凝胶B.琼脂糖凝胶C.聚丙烯酰胺凝胶D.琼脂凝胶E.淀粉板11 .在制备聚丙烯酰胺凝胶时,其交联剂是：BA.TEMEDB.亚甲双丙烯酰胺C.丙烯酰胺D.核黄素E.过硫酸镂12 .聚丙烯酰胺凝胶的机械性能取决于：DA,成胶后环境的温度B.缓冲溶液的pH值C.催化剂的浓度D.丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺总的浓度和交联度E.亚甲双丙烯酰胺的浓度13 .Ampholine在等电聚焦中的作用是：DA.制备凝胶的催化剂B.蛋白质的染料C.蛋白质稳定剂D.两性电解质载体,在电泳中构成pH梯度E.蛋白质的变性剂三、问做题1 .聚丙

26、烯酰胺凝胶是由哪些物质如何聚合而成的？答：PAG是由单体丙烯酰胺acrylamide,Acr和交联剂N,N-亚甲基双丙烯酰胺N,N,-methylenebisacrylamide,Bis通过自由基聚合而成的一种多孔三维网状结构.通常采用化学聚合,催化剂是AP,加速剂是TEMED2 .什么是凝胶总浓度和交联度？答：凝胶总浓度即100ml凝胶溶液中,Acr和Bis的总浓度.凝胶总浓度越大,孔径越小,适合别离小分子物质.交联度即交联剂的百分含量即Bis占Acr与Bis总和的百分比.3 .不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的根本原理是什么？答：不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳是由四个不连续,即凝胶层的不连续、缓冲液离子

27、成分的不连续、pH值的不连续、电位梯度不连续,当电荷和分子大小不一的血清蛋白通过凝胶时,不连续的电泳由于浓缩效应、电荷效应和分子筛效应,各组分被精细的别离开来.4 .等电聚焦电泳的根本原理是什么？答：在电泳介质中参加载体两性电解质,当通入直流电时,两性电解质即形成一个由正极到负极、pH逐渐增加的梯度.蛋白质进入这个环境时,不同的蛋白质带上不同性质和数量的电荷,向着一定的方向移动,当迁移到与其相同的等电点位置时不再移动,即被聚焦于一个狭窄的区带中,得以别离.5 .等电聚焦电泳的关键步骤是什么？答：等电聚焦电泳的关键步骤是是由正极到负极、pH逐渐增加的梯度的形成.层析原理、凝胶层析、亲和层析一、名

28、词解释1 .吸附层析法：固定相是固体吸附剂.利用吸附剂对不同组分吸附水平的不同加以别离的方法.2 .分配层析法：固定相是液体.利用各组分在两液相中分配系数的差异而别离.3 .凝胶层析法：固定相是一种多孔凝胶.利用各组分之间分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度也不同而获得别离.4 .亲和层析法：利用各种待别离组分生物学性质不同的一种层析,固定相只能与一种待别离组分有高度专一性的亲和结合水平,藉此和没有亲和力的其它组分别离.5 .保存值：是表示样品中各组分在层析柱中停留时间的长短或组分流出时所需流动相体积的大小.6 .分配系数：通常被用来表达一种化合物在互不相溶的两个相中分配的状况.对于层析来说

29、,分配系数定为分配平衡时该化合物在移动相中的浓度除以固定相中的浓度.7 .配基：在亲和层析中能被某一生物分子识别和可逆结合的生物专一性物质称作配基.8 .载体：在亲和层析中,与配基共价结合,使配基固相化的物质.9 .分子筛效应：当被别离物质流经凝胶柱时,因各组分的分子大小不同在凝胶中受到的阻值作用有差异,从而造成各组分在凝胶柱中的迁移速度不同得到别离.10 .洗脱体积Ve:指被别离物质通过凝胶柱所需洗脱液的体积.二、单项选择题1.在凝胶层析中,以下哪种说法是错误的？BA.Ve=Vo故Kd=0B.Ve=Vi故Kd=1C.Ve=Vo+Vi故Kd=1D.0Kd1故Ve=Vo+KdVi2.在凝胶层析中

30、,以下哪种说法是正确的?(D)A.Kd=1故Ve=VoB.Kd=0故Ve=ViC.Kd=0故Ve=Vo+ViD.0Kd1故Ve=Vo+KdVi11 Bio-GelP-100允许进入凝胶内部的最大分子量为DA.100B.1000C.10000D.1000004 .在亲和层析中,Kd越大那么BA.Kl越大B.Kl越小C.Kl不变D.Kl不定5 .根据蛋白质分子的配基专一性进行别离的是：DA.离子交换层析法B.凝胶层析法C.超速离心法D.亲和层析法6 .用凝胶层析法别离甲乙两蛋白,甲蛋白Kd=0.25,乙蛋白Kd=0.75,以下表达正确的选项是：AA.甲蛋白分子量大,先被洗脱B.乙蛋白分子量大,先被

31、洗脱C.甲蛋白的洗脱体积大D.甲蛋白在凝胶中受到的阻滞作用大7 .葡聚糖SephadexG50每克凝胶吸水量为：CA.0.05mlB.0.5mlC.5mlD.50ml8 .SephadexG75每克干凝胶的吸水量为：BA.0.75mlB.7.5mlC.7.5LD.75ml9 .凝胶过滤时通过凝胶柱慢的是：BA.大的溶质分子B.小的溶质分子C.形态不规那么的物质D.带电荷小的物质10 .凝胶过滤时通过凝胶柱快的是：AA.大的溶质分子B.小的溶质分子C.形态不规那么的物质D.带电荷少的物质11 .用SephadexG50别离血红蛋白和鱼精蛋白时,鱼精蛋白的Ve减血红蛋白的Ve得该层析柱的：AA.内

32、水体积B.外水体积C.凝胶总体积D.凝胶干体积12 .以下哪种方法可测定蛋白质分子量：CA.不连续PAGEB.IEFC.凝胶层析D.超速离心13 .下面是对亲和层析的一些说法,你认为何者是对的？CA.是吸附层析的另一种说法B.只是一种仅适用于蛋白质别离的方法C.是一种对酶制备极有用的方法D.它对大分子缺少专一性E.它的本质仍是分配层析14 .今将含有X,Y,Z混合物的样品,上样在SephadexG-25凝胶柱,其洗脱顺序是丫在先而Z最后下来,是否可认为：DA.Z是糖类,亲和力大B.Z的溶解度最小C.Z的分子量最大D.Z的分子量比X小E.Z的分子量比Y大三、问做题1 .什么是层析？其两个根本相分

33、别是什么？答：层析是一种利用混合物中各理化性质的不同,而使各组分借以别离的方法.其两个根本相分别是固定相、流动相.2 .什么是层析的分配系数？层析的根本原理是什么？答：分配系数是在一定条件下,物质在固定相和流动相间到达平衡时,它在固定相和流动相中平均浓度的比值.层析的根本原理：不同物质在不同的两相即固定相和流动相中具有不同的分配系数,当这些物质随着流动相移动时,它们在两相中反复屡次分配从而使各物质得到完全的别离.3 .什么是凝胶层析的根本原理？答：凝胶层析的根本原理：当被别离物质流经凝胶柱时,因各组分的分子大小不同在凝胶中受到的阻值作用有差异,从而造成各组分在凝胶柱中的迁移速度不同得到别离.4

34、 .凝胶层析的分配系数如何表示？答：Kd=Ve-V0/Vi.5 .亲和层析的根本原理是什么？答：亲和层析是利用生物大分子之间有专一的亲和力而到达别离纯化的层析方法.6 .什么是配基？什么是载体？答：在亲和层析中把能被某一生物大分子识别和可逆结合的生物专一性物质称为配基.载体是在亲和层析中,与配基共价结合,使配基固相化的物质.离子交换层析、双向层析一、名词解释1 .离子交换层析：是以离子交换剂为固定相,以特定的含离子的溶液为流动相,利用离子交换剂对需要别离的各种离子结合力的差异,而将混合物中不同离子进行别离的层析技术.2 .离子交换剂：在惰性载体上引入以共价结合的方式带有电荷的活性基团.3 .阳

35、离子交换剂：载体上带有负电荷的功能基团,能结合溶液中的正电荷.4 .阴离子交换剂：载体上带有正电荷的功能基团,能结合溶液中的负电荷.5 .目数：离子交换树脂的颗粒直径大小,目数越大,颗粒直径越小.6 .活度：吸附剂的吸附水平常称为活度,用罗马数字I、n、出、w、v表示.从I至v,活度逐渐减少,含水量逐渐增大.二、单项选择题1 .用离子交换层析法别离一蛋白质混合物,所用阳离子交换剂为Dowex50,洗脱缓冲液pH为6.0,请问第一个被洗脱下来的氨基酸是：BA.赖氨酸pl9.74B.天冬氨酸pl2.77C.精氨酸pl10.76D.缴氨酸pI5.962 .离子交换层析的主要原理是利用物质的CA.在两

36、相的吸W力不同B.在两相的溶解度不同C.离子交换不同D.分子大小不同3 .在离子交换层析中,分配系数与溶质的关系是决定于：AA.离解状态B.极性大小C.溶解度D.分子大小E.分子结构4 .有一氨基酸混合液,含赖氨酸pl=9.74苯丙氨酸pl=5.48,精氨酸pl=10.76及谷氨酸pl=3.22,在阳离子交换柱上层析,以pH5.38缓冲液洗脱,推测其洗脱顺序是：CA.精-赖-苯丙-谷B.苯丙-谷-赖-精C.谷-苯丙-赖-精D.赖-精-苯丙-谷E.谷-赖-苯丙-精5 .氨基酸与苛三酮反响的终产物是紫蓝色至紫红色,其最大吸收波长是：DA.420nmB.480nmC.540nmD.570nmME.6

37、50nm6 .DNS-Cl可与氨基酸的哪个基团结合成DNS-氨基酸？AA.a-氨基B.3-氨基C.丫-氨基D.8-氨基7 .以下不同活度的吸附剂中吸附水平最强的是：AA.I级B.n级C.出级D.IV级8 .以下不同活度的吸附剂中吸附水平最弱的是：DA.I级B.n级C.出级D.IV级三、问做题1 .什么是离子交换层析？离子交换层析别离氨基酸的根本原理是什么？答：离子交换层析是以离子交换剂为固定相,以特定的含离子的溶液为流动相,利用离子交换剂对需要别离的各种离子结合力的差异,而将混合物中不同离子进行别离的层析技术.离子交换层析别离氨基酸的根本原理是依据离子交换剂对需要别离的各种氨基酸结合力的差异.

38、2 .什么是阳离子交换剂？答：离子交换剂即在惰性载体上引入以共价结合的方式带有电荷的活性基团.阳离子交换剂即载体上带有负电荷的功能基团,能结合溶液中的正电荷.3 .什么是吸附层析,其根本原理是什么？答：以固体吸附剂为固定相,利用各组分在吸附剂外表吸附水平的差异而别离的层析法.吸附层析是利用溶质在吸附剂和溶剂中的可逆平衡,以及吸附剂对不同物质吸附力的不同而达到别离的目的.4 .简述薄层层析概念及原理.答：薄层层析法是在平滑的玻板或在聚酰胺薄膜上将吸附剂铺在上面成薄层作为固定相,以溶剂展开剂作为流动相,把样品中各组分别离.使用最多的是吸附层析的原理,层析时将样品点在薄膜上,流动相沿着薄膜一定方向移

39、动,当流经样品点时,待别离组分在两相间进行分配,由于不同组分有不同的分配系数,在薄膜上移动的速度也不同,一定时间后不同组分移动距离远近不一,从而得到别离.5 .DNS-氨基酸的双向聚酰胺簿膜层析原理是什么？答：二甲氨基蔡磺酰氯简称DNS-Cl,可与氨基酸的游离氨基结合成DNS-M基酸,混合氨基酸随流动相通过聚酰胺薄膜时,待别离氨基酸与聚酰月薄膜形成氢键.由于各种氨基酸形成氢键的水平强弱不同,因此决定了各待别离氨基酸吸附力的差异,吸附力强展层速度较慢,吸附力弱展层速度较快.同时展层溶剂与待别离氨基酸在聚酰胺粒子外表竞争形成氢键,选择适当的展层溶剂,就可使待别离氨基酸在溶剂与聚酰胺薄膜外表之间分配

40、系数产生最大的差异.一般讲,易溶于展层溶剂的物质所受到的动力作用大,展层速度快,反之速度就慢.这样通过各物质的吸附力和分配系数不同,使得被别离的物质在聚酰胺薄膜层析中的到别离.组织DNA提取、聚合酶链反响PCR一、名词解释聚合酶链反响：聚合酶链PCR技术是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法.又称无细胞克隆技术.不通过活细胞,操作简便,在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增107108倍,大大提升了DNA勺得率.二、单项选择题1.某人提取DNA后,将DNA溶液稀释10倍,然后经紫外分光光度计检测结果为A260nm=0.44,A280nm=0.25,比色皿光径1cm,

41、该DNA样品的浓度为：DA.250gg/mlB.132科g/ml0.176g/mlD.220gg/ml2.以下几种DNA分子的碱基组成比例各不相同,哪一种DNA的Tm较低？DA.DNA中A-T占15%B.DNA中G-C占25%0.DNA中G-0占40%D.DNA中A-T占80%3 .PCR反响中不需要哪种物质？0A.Mg2+B.引物0.RNA酶D.DNA聚合酶4 .PCR反响中需要哪酶？DA.蛋白酶B.限制性内切酶C.溶菌酶D.TaqDNA聚合酶5 .为制备完整的人体细胞DNA,处理样品时不可AA.剧烈震荡B.将蛋白质除净0.将多糖除净D.加核酸酶抑制剂6 .提取DNA的原那么除外的是：BA.保证核酸一级结构完整性B.保存所有核酸分子C.核酸样品中不应存在有机溶剂和过高浓度的金属离子D.蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度7 .以下关于DNA变性的表达哪一项为哪一项正确的？DA.升高温度是变性的唯一原因B.DNA热变性是一种渐进过程,无明显分界线0.核酸变性是DNA的独有现象,RNA无此现象D.凡引起DNA两股互补链间氢键断裂的因素,都可使其变性8 .组织DNA提取中,苯酚-氯仿抽提离心分三层,DNA位于：AA.上层B.中间层0.下层D.上下层均有9 .组织DNA提取中,苯酚-氯仿抽提离心分三层,变性蛋白质位于：BA.上层B.中间层C.下层