膳食纤维菊粉分别干预小鼠2型糖尿病与多囊卵巢综合征的作用与机制研究

1、膳食纤维菊粉分别干预小鼠2型糖尿病与多囊卵巢综合征的作用与机制研究目的评估菊粉对不同阶段T2DM、鼠的干预效果及机制；评估菊粉对PCOS、鼠的干预效果及机制。方法1.造模与分组:（1）根据空腹血糖（fastingbloodglucose,FBG）、口服葡萄糖耐量试验（oralglucosetolerancetests,OGTT）和是否给予菊粉干预将90只db/db小鼠分成糖尿病前期组（PDM）、早期糖尿病组（EDM、糖尿病组（DM、PDMt粉干预组（INU/PDM、EDMW粉干预组（INU/EDM和DMff粉干预组（INU/DM），干预组小鼠用菊粉连续干预6周；（2）将40只C57BL/6J雌

2、性小鼠随机分为4组:对照组（CON、模型组（MO以菊粉组（INU）、二甲双月瓜组（MET，最后三组给予20天的6mg/100g脱氢表雄酮和60%b脂饮食来形成PCOS、鼠模型，INU和METfi分别给予菊粉、二甲双月瓜干预21天。2.实验方法:（1）菊粉干预后,每周监测一次db/db小鼠和C57BL/6J小鼠的体重（bodyweight,BW）,并且db/db小鼠还需要每周监测一次FBG每两周监测一次OGTT（;2）C57BL/6J小鼠在21天的干预结束后,进行胰岛素耐量试验（insulintolerancetest,ITT）观察胰岛素抵抗情况；（3）用ELISA检测db/db小鼠中血清糖化血

3、红蛋白（glycatedhemoglobin,GHb）和C57BL/6J小鼠血清中激素六项水平;（4）用AU400自动生化分析仪检测db/db小鼠血清甘油三酯（triglyceride,TG）和总胆固醇（totalcholesterol,TC）的变化情况;（5）用HE染色观察C57BL/6J小鼠卵巢的形态结构变化；（6）用显色基质邕试剂盒检测db/db小鼠和C57BL/6J小鼠血浆中脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）的水平;（7）用微量样本多重蛋白定量技术（CytometricBeadArray,CBA）检测db/db小鼠、C57BL/6J小鼠血浆中炎症因子的水平；（8）免

4、疫组化法检测db/db小鼠肝脏中巨噬细胞变化情况；(9)用16SrRNA肠道菌群测序检测db/db小鼠和C57BL/6J小鼠肠道菌群的变化情况；(10)Spearman相关分析检测db/db小鼠和C57BL/6J小鼠血浆炎症因子与肠道菌群之间的相关性。结果第一部分：菊粉能够显著降低不同阶段T2DM、鼠的BWFBGGHbTGTC以及LPSIL-6、TNF-a、IL-17A的水平，但IL-17A在PD防口INU/PDM组之间没有显著差异。止匕外,INU/PDM和INU/EDMfi小鼠血浆中IL-10与相应未干预组相比显著升高，而在INU/DM组中无显著差异。肝脏免疫组化显示：菊粉能够降低不同阶段T

5、2DM、鼠肝脏中的巨噬细胞和脂肪空泡。16SrRNA肠道菌群测序显示：菊粉能够使不同阶段T2DM、鼠肠道菌群蓝藻门(Cyanobacteria)、拟杆菌属(Bacteroides)显著升高,Ruminiclostridium₆显著下降。与相应的未干预组相比,脱铁杆菌门(Deferribacteres)和软壁菌门(Tenericutes)在INU/DM组中显著下降，而Mucispirillum在INU/PDMff口INU/EDMS中显著降低。SpearmaM关分析显示：Cyanobacteria、Bacteroides分别与IL-10,Deferri

6、bacteres、Tenericutes、Mucispirillum分别与IL-6和TNF-a,Mucispirillum、Ruminococcaceae₆另与IL-17A和LPS,Ruminococcaceae₆与TNF-a呈正相关，而Cyanobacteria、Bacteroides分别与IL-6和TNF-aCyanobacteria与IL-17A,Ruminococcaceae₆与IL-10呈负相关。第二部分:膳食菊粉能够显著降低PCOS、鼠的BW睾酮(Testosterone")、TNF-a、IL-6、IL-17A水平,增加血清雌二醇(Estradiol,E2)水平,改善胰岛素抵抗,但IL-10在INU和MOD!之间没有显著差异16S rRNA卵巢HE染色显示：菊粉能够使PCOS、鼠卵泡内颗粒层和黄体增加肠道菌群测序显示：与MODE相比,INU组小鼠双歧杆菌属(Bifidobacterium)显著升高,并且变形杆菌门(Proteobacteria)、螺杆菌属(Helicobacter)和Parasutterella显著降低。Spearman关分析显示：Bfidobacterium与TNF-a、IL-6、IL-17A呈负