减数分裂观察

1、园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学 植物花粉母细胞减数分裂制片植物花粉母细胞减数分裂制片技术和染色体观察技术和染色体观察 一、实验目的一、实验目的 掌握植物花粉母细胞减数分裂制片技术。掌握植物花粉母细胞减数分裂制片技术。熟悉减数分裂的具体过程。熟悉减数分裂的具体过程。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学二、实验原理二、实验原理 减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。一种特殊的细胞分裂方式。 高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小孢子，染色体数目已减半为孢子，染色体数目已减半为n。小

2、孢子进一步发。小孢子进一步发育为花粉粒。育为花粉粒。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学减数分裂过程减数分裂过程( (一一) )、间期、间期( (前间期前间期) )( (二二) )、减数第一分裂、减数第一分裂( (三三) )、中间期、中间期( (四四) )、减数第二分裂、减数第二分裂前期前期I I 中期中期I I 后期后期I I 末期末期I I前期前期II II 中期中期II II 后期后期II II 末期末期IIII园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学 在适宜的时期采集植物的花蕾，经固定液杀死固定，使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理，在显微镜下进行观察，可以看到小孢子母

3、细胞的减数分裂过程，研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学三、材料用品三、材料用品实验材料：玉米雄花序 玉米PMC减数分裂永久制片和照片仪器物品：显微镜、水浴锅、镊子、解剖针实验药品：无水乙醇、95%乙醇浓盐酸 冰醋酸、卡宝品红或醋酸洋红。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学四、实验方法与步骤四、实验方法与步骤取材取材 固定固定 染色压片染色压片 镜检镜检园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学 1.取材：选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。的关键性步骤。

4、不同植物取材时期不同。 玉米：抽雄前两周（大喇叭口期），雄花序所在部玉米：抽雄前两周（大喇叭口期），雄花序所在部位用刀片纵向划一切口，用镊子取出花序分枝。此位用刀片纵向划一切口，用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗颖长时雄花序先端小穗颖长4mm左右，花药长左右，花药长23mm。小麦：挑旗以后，旗叶抽出小麦：挑旗以后，旗叶抽出1-2cm，取出穗子。，取出穗子。 时间一般在上午时间一般在上午9时时10时，不同材料间稍有差异。时，不同材料间稍有差异。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学玉米大喇叭口期玉米小穗玉米雄花序园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学小麦挑旗期小麦的小花园艺植物遗传育

5、种实验教学中心园艺植物遗传学 实验中注意观察：每一分枝是中上部实验中注意观察：每一分枝是中上部还是下部小穗发育最早？还是下部小穗发育最早？园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学 2 2固定：固定：取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。一般采用卡诺氏固定液，无水酒精：冰醋酸一般采用卡诺氏固定液，无水酒精：冰醋酸3:1，可用，可用95 乙醇代替无水乙醇。乙醇代替无水乙醇。如需长期保存，可先用如需长期保存，可先用70%酒精冲洗酒精冲洗2次然次然后转入后转入70%酒精中保存。酒精中保存。注意：固定液时应现配现用，固定时不要在阳光下注意：固定液时应现配现用，固定

6、时不要在阳光下暴晒。暴晒。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学3染色和压片：吸去小穗过多保存液吸去小穗过多保存液 置于载玻片中央置于载玻片中央挑出花药，滴染液挑出花药，滴染液 将花药横向切断将花药横向切断挤压花药，使花粉母细胞从切口处逸出挤压花药，使花粉母细胞从切口处逸出取出花药壁取出花药壁 低倍镜检，加上盖玻片低倍镜检，加上盖玻片酒精灯烤片酒精灯烤片 压片压片注意不要使盖片移动注意不要使盖片移动园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学4.4.镜检观察镜检观察先低倍后高倍。先低倍后高倍。具体使用参见后面显微镜的使用方法。具体使用参见后面显微镜的

7、使用方法。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学5. 利用玉米花粉母细胞的减数分裂永久制片利用玉米花粉母细胞的减数分裂永久制片和照片，在显微镜下观察，并与自己的制片和照片，在显微镜下观察，并与自己的制片比较，掌握各个时期的特点。比较，掌握各个时期的特点。 注意：注意： 怎样区分各个时期？怎样区分各个时期？ 如中如中I 、中、中I I，后，后I I、后、后I ？园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学减数分裂前期减数分裂前期 I I细线期偶线期偶线期园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学粗线期双线期终变期中期后期后期园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学前期II中期II后期II末期

8、II四分体小孢子园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学附：显微镜操作和使用 开关显微镜，移动显微镜。开关显微镜，移动显微镜。调节调节目镜间距和目镜微调目镜间距和目镜微调，使两个眼睛视野相同和，使两个眼睛视野相同和清晰，防止眼睛疲劳。清晰，防止眼睛疲劳。 先低倍镜，后高倍镜观察，高倍镜下不准用粗调。先低倍镜，后高倍镜观察，高倍镜下不准用粗调。 高倍镜下不得取放载玻片。高倍镜下不得取放载玻片。 使用结束：电压或光亮度调至最小，关闭并拔下电使用结束：电压或光亮度调至最小，关闭并拔下电源，降低载物台，最低倍物镜或无目镜的镜筒居中，源，降低载物台，最低倍物镜

9、或无目镜的镜筒居中，防尘罩，填写使用记录，请老师验收方可离开。防尘罩，填写使用记录，请老师验收方可离开。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学调节目镜间距和目镜微调园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学注意事项注意事项 爱护显微镜。爱护显微镜。 一次取材不要太多。一次取材不要太多。取完载玻片，盖上染色缸盖子，以免酒精挥发。取完载玻片，盖上染色缸盖子，以免酒精挥发。 酒精灯使用注意安全。酒精灯使用注意安全。用过的载玻片必须刷洗干净再放回染色缸，用过用过的载玻片必须刷洗干净再放回染色缸，用过的盖玻片丢弃。的盖玻片丢弃。使用过的纱布、滤纸、盖玻片放到废品杯或垃圾使用过的纱布、滤纸、盖玻片放到废品杯或垃圾桶，不得直接冲入水池。桶，不得直接冲入水池。 值日生打扫卫生、检查仪器及门窗值日生打扫卫生、检查仪器及门窗。园艺植物遗传育种实验教学中心园艺植物遗传学五、作业五、作业1写出制片步骤流程图