高级生化思考题31题

1、“高级生化”思考题1 写出下列涉及细胞信号转导的酶促反应方程式：精氨酸、PIP2、ATP、GTP 。精氨酸： L-精氨酸 NOS 胍氨酸+NOPIP2：PIP2 PLC DAG+IP3ATP:ATP AC cAMP 磷酸二酯酶 5AMP Mg2+PPi H2O Mg2+GTP:GTP GC cGMP 磷酸二酯酶 5GMP Mg2+PPi H2O Ca2+或者Mg2+-(GTPGDP) +-GDP (PiH2O) GDP2 细胞信息物质按化学性质的分类并分别举例。细胞间信息物质：1)蛋白质和肽类，如生长因子、细胞因子、胰岛素等；2)氨基酸及其衍生物，如甘氨酸、甲状腺素、肾上腺素等；3)类固醇激素

2、，如糖皮质激素、性激素等；4)脂酸衍生物，如前列腺素；5)维生素类，如维生素A、维生素D、维甲酸；6)气体，如NO、CO、H2S等。细胞内信息物质：1)无机离子：如钙离子；2)脂类衍生物：如DAG、Cer；3)核苷酸：如cAMP、cGMP；4)糖类衍生物：如IP3；5)信号蛋白分子：如Ras、底物酶(如JAK、Raf)；6)气体分子：如CO、NO。第一信使：由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质的细胞外信息物质。蛋白质和肽类（如生长因子、细胞因子、胰岛素等）氨基酸及其衍生物（如甘氨酸、甲状腺素、肾上腺素等）类固醇激素（如糖皮质激素、性激素等）脂酸衍生物（如前列腺素）维生素类（如维生素A、维生

3、素D、维甲酸） 气体（如一氧化氮、一氧化碳、H2S）等第二信使：在细胞内传递信息的小分子物质，如：Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、cGMP、花生四烯酸及其代谢产物等。第三信使：负责细胞核内外信息传递的物质，称为第三信使，多为DNA结合蛋白，是一类可与靶基因特异序列结合的核蛋白，能调节基因的转录。如立早基因(immediate-early gene)的编码蛋白质。3 DNA、RNA、蛋白质主要存在部位，它们各种结构的类型及特点。(1)、DNA：主要存在于细胞核和线粒体内，核糖体、细胞质、叶绿体中也有存在。DNA病毒的遗传物质是DNA。分为一级结构、二级结构和高级结构。一级结构：脱氧核

4、苷酸从5'-末端到3'末端的排列顺序。二级结构：DNA的双螺旋结构。特点：1)反向平行，右手双螺旋、；2)双链碱基遵循碱基互补配对原则；3)维持该结构稳定的主要作用力是疏水作用和氢键。高级结构：DNA的超螺旋结构，是在DNA双螺旋结构的基础上进一步盘绕折叠形成的致密结构。1、原核生物DNA是环状超螺旋结构；2、真核生物DNBA的高度有序和高度致密结构：染色质、染色体(2)、RNA：存在于细胞质、细胞核、线粒体、核糖体、叶绿体中。结构类型分为一级结构，局部双螺旋结构和高级结构。结构特点：1)大部分真核细胞mRNA的5'末端都以7-甲基鸟嘌呤核苷为起始结构，而3'末

5、端是多聚腺苷酸尾；2)tRNA含有多种稀有碱基，和茎环结构。(3)、蛋白质：分布广泛。分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。一级结构：蛋白质分子中N-端到C-端氨基酸的排列顺序。化学键：肽键和二硫键。二级结构：蛋白质分子中多肽链的局部空间结构，也就是肽链主链骨架中C原子的相对空间结构。分为-螺旋、-折叠、-片层和无规线团。主要作用力是氢键。另外，模体是具有特殊功能的超二级结构。-螺旋的特点：1)以多肽链a-碳原子为转折点，以肽单元为单位，每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈，螺距为0.54nm；2)相邻螺旋之间，每个肽键的亚氨基氢<N-H>与第四个肽键的羰基氧<c=o>

6、;形成氢键；3)它是按顺时针方向的右手螺旋，肽单元平面与螺旋中心轴平行，而氢键的方向与螺旋中心轴大致平行，肽链中的全部肽键都可形成氢键，使a螺旋非常稳固。三级结构指多肽链中所有原子的空间排布。主要作用力有疏水键、盐键、氢键、范德华力。四级结构指2条或2条以上含有三级结构的多肽链(也称亚基)，以非共价键相连接所形成的整体布局。主要结合力是氢键和离子键。模体、结构域、分子伴侣4 简述受体增敏、脱敏、上调、下调的概念及其结构特点。受体增敏：对外界(化学信号)刺激的敏感性或反应性增加的现象。受体脱敏：对外界(化学信号)刺激的敏感性或反应性降低的现象，包括同种脱敏和异种脱敏。受体上调：受体的数量增加。受

7、体下调：受体数量减少。结构特点：与配体结合具有：高度特异性、高度亲和力、可逆性、饱和性、可竞争性、H与R结合量与生物效应成正比。5 解释化学修饰、变构调节的概念，与变构调节比较，化学修饰有哪些特点。别构调节共价修饰定义小分子化合物作为变构效应剂与酶蛋白分子活性中心外的某一部位发生特异性结合，引起酶分子构象的改变，从而导致酶活性的改变，称为酶的变构调节。酶蛋白肽链上某些残基在不同摧化单向反应的酶的催化下发生可逆的共价修饰，从而引起酶活性的改变，这种调节称为酶的化学修饰调节又称共价修饰调节。相同点都属于细胞水平的调节，属酶活性的快速调节方式。化学键非共价键共价键性质酶与某些化合物距离非常近，但还是

8、“两种物质”酶与某些化学基团结合成了“一种物质”作用物小分子的化合物（变构效应剂）另一种酶影响因素由细胞内变构效应剂浓度的改变而影响酶的活性激素等信息分子通过酶的作用而引起共价修饰酶分子改变变构效应剂通过非共价键与酶的调节亚基或调节部位可逆结合，引起酶分子构象改变，常表现为变构酶亚基的聚合或解聚化学修饰调节是酶蛋白的某些基团在其他酶的催化下发生共价修饰而改变酶活性特点及生理意义变构调节的动力学特征为S型曲线，在反馈调节中可防止产物堆积和能源的浪费最常见的是磷酸化和去磷酸化。化学修饰调节耗能少，作用快，有级联放大效应，是经济有效的调节方式6 解释Domain、Chaperon、Motif、核小体

9、、核酸杂交、核酶概念及主要功能。Domain：结构域，是蛋白质分子三级结构层面上的局部折叠。功能Chaperon：分子伴侣，一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质。通过提供一个保护环境从而加速蛋白质折叠成天然构象或形成四级结构。Motif：模体，是具有特殊功能的超二级结构，由2个或3个具有二级结构的肽段，在空间上相互靠近形成的特殊空间构象。功能核小体：染色质的基本组成单位，由DNA和蛋白质构成。功能核酸杂交：具有碱基配对关系的核酸单链(DNA或RNA)形成杂化双链的过程。包括DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA等类型。可用于研究DNA中某一基因的位置，鉴定不同核酸分子间的序列相似

10、性等。核酶：具催化作用的小RNA。可催化特定RNA的降解，在RNA合成后的剪接修饰中具有重要作用。7解释DNA 变性、复性、退火、Tm值概念，用公式计算小分子核酸（<20bp）退火温度。DNA变性：某些理化因素(温度、pH等)会使DNA互补碱基对之间的氢键断裂，从而使DNA双链解离为两条单链的过程。复性：当变性条件解除后，原来的两条互补DNA单链重新配对，恢复双螺旋结构的现象。退火：热变性的DNA缓慢冷却后可以复性，这一过程称为退火。Tm值：DNA的解链温度，也成为融解温度，指DNA变性解链过程中，紫外吸收度的变化A260达到最大变化值的一半时所对应的温度。计算：Tm=4(G+C)+2(

11、A+T)退火温度Ta = Tm - 5= 4(G+C)+ 2(A+T) -5如果G+C的含量为50%，则退火温度为55.8 巴斯德效应、脂肪动员的概念。巴斯的效应：有氧氧化抑制糖酵解的现象。脂肪动员：指储存在脂肪细胞中的甘油三酯，在脂酶催化下逐步分解为游离脂酸和甘油并释放入血，通过血液运输至其他组织氧化利用的过程。9 解释糖酵解、有氧氧化、糖异生、磷酸戊糖通路的概念和生理意义。糖酵解：在机体缺氧条件下，葡萄糖经一系列酶促反应生成丙酮酸进而还原生成乳酸的过程。主要生理意义是在机体缺氧时快速供能；是某些细胞在氧供应正常情况下的重要供能途径。有氧氧化：葡萄糖在供氧充足时被彻底氧化成CO2和H2O，并

12、释放出大量能量的过程。生理意义：是机体获得ATP的主要方式。它不仅产能效率高，而且由于产生的能量逐步分次释放，相当一部分形成ATP，所以能量的利用率也高。糖异生：指由非糖物质(乳酸、甘油、生糖氨基酸等)转化成葡萄糖或糖原的过程。生理意义：1、维持血糖浓度恒定：保证某些主要依赖葡萄糖供能的组织的供能；2、补充肝糖原：机体摄入的葡萄糖先分解为丙酮酸、乳酸等三碳化合物，通过血液循环转运到肝脏，后者再异生成糖原的途径成为三碳途径，也称间接途径，是肝糖原生成的主要方式。3、调节酸碱平衡。磷酸戊糖通路：指在胞质中由6-磷酸葡萄糖开始，经过脱氢、脱羧生成核糖5磷酸和NADPH的途径。NADPH可以为生物合成

13、提供还原当量，核糖5磷酸及其衍生物用于合成合适、NAD+、FAD、ATP和COA等重要生物分子。它是生物体内葡萄糖代谢的一条重要途径。该代谢途径在细胞质中进行，其过程分为两个阶段：第一阶段是氧化反应，生成磷酸戊糖、NADPH和CO2，第二阶段是非氧化反应，包括一系列基团转移。生理意义：1)为核酸的生物合成提供核糖；2)提供NADPH作为供氢体参与多种代谢反应。NADPH对维持还原型谷胱甘肽的正常含量有很重要的作用，且有杀菌作用。NADPH参与体内羟化反应。10 胞内受体的结构及各结构区的功能。（胞内受体：位于胞浆和细胞核中的受体，全部为DNA结合蛋白）高度可变区位于N端，具有激活转录功能DNA

14、结合区含有锌指结构激素结合区位于C端，结合激素、热休克蛋白，使受体二聚化，激活转录铰链区三种膜受体的结构和功能特点特性离子通道受体七次跨膜受体单次跨膜受体内源性配体神经递质神经递质、激素、趋化因子、外源刺激（味、光）生长因子、细胞因子结构寡聚体形成的孔道单体具有或不具有催化活性的单体跨膜区段数目4个7个1个功能离子通道激活G蛋白激活蛋白激酶细胞应答去极化与超极化去极化与超极化、调节蛋白质功能和表达水平调节蛋白质的功能和表达水平，调节细胞分化和增殖11简述糖皮质激素介导的信号转导过程。肾上腺分泌的糖皮质激素经血循环到相应的靶细胞后，与胞质内的糖皮质激素受体结合形成复合物，受体与HSP解离，形成受

15、体二聚体，进入胞核。入核的受体二聚体通过与糖皮质激素应答元件结合，诱导基因开放，转录出mRNA，翻译出一些酶类，进而引起生物学效应。12高氨血症诱发肝昏迷的机理。肝功能障碍导致氨的解毒功能障碍，血氨升高，通过血脑屏障氨进入脑组织。氨进入脑组织后，与脑细胞中的-酮戊二酸反应生成谷氨酸，氨也可以继续跟谷氨酸反应生成谷氨酰胺。因此，血氨升高时，脑细胞中-酮戊二酸大量减少，导致三羧酸循环减弱，ATP供应减少，导致大脑功能障碍，严重时发生昏迷。另一可能是谷氨酸和谷氨酰胺浓度升高导致渗透压增大，引起脑水肿。13阐述胰高血糖素和胰岛素对糖原的合成和分解的双重调节。胰高血糖素是体内主要的升血糖激素,与肝细胞质

16、膜上Gs蛋白偶联受体结合形成配体受体复合物；复合物与Gs蛋白结合后使Gs蛋白游离出s亚基；Gs蛋白s亚基与AC结合，激活AC;活化AC催化ATP生成cAMP；cAMP变构激活依赖cAMP的蛋白激酶(PKA)；1、活化的PKA使磷酸化酶激酶b磷酸化变为有活性的磷酸化激酶a，后者可使无活性的磷酸化酶b磷酸化成有活性的磷酸化酶a，进而分解糖原中1-4糖苷键，分解下一个葡萄糖基，生成1-磷酸葡萄糖，继而转变为6-磷酸葡萄糖后，在6-磷酸葡萄糖酶的作用下水解成葡萄糖。2、PKA使活性糖原合成酶磷酸化变成无活性的糖原合成酶，从而抑制糖原合成。3、PKA使无活性的抑制物Ia磷酸化变为有活性的抑制物Ib，后者

17、可抑制磷蛋白磷酸酶，从而使磷酸化激酶a和磷酸化酶a难以脱磷酸，从而加速糖原分解。所以说，胰高血糖素能使肝糖原合成减少而分解增加，血糖升高。胰岛素是一种降血糖激素，通过减少糖异生酶的合成，抑制肝的糖异生作用，另外通过抑制PKA活性，使糖原合酶活性增加而磷酸化酶活性减弱，从而使糖原合成增加而分解减少。（书上写胰岛素抑制糖原分解，促进糖原的合成的机制还未完全肯定？）14 胆固醇合成和酮体合成的区别。胆固醇合成酮体合成反应部位主要在肝和小肠 肝脏 亚细胞部位 胞液及内质网线粒体原料 乙酰CoA和NADPH 乙酰CoA主要中间代谢物丙二酸单酰CoA乙酰辅酶a脂肪酰基的运载体ACPCoA限速酶 HMG C

18、oA还原酶 参与的辅酶NADPH+H+FAD、NAD+需要HCO3-不需要HCO3-ADP/ATP比值在比值降低时发生在比值升高时发生柠檬酸发挥的作用激活无激活作用脂酰辅酶A的作用抑制无抑制所处膳食状况高糖膳食状况下进行禁食或者饥饿时主要去路转化成胆汁酸及类固醇激素 经TCA循环彻底氧化分解功能15 丙酮酸脱氢酶复合体的别构调节和化学修饰。（待定）丙酮酸脱氢酶复合体是一种催化丙酮酸脱羧反应的多酶复合体，由三种酶（丙酮酸脱氢酶、二氢硫辛酸转乙酰基酶、二氢硫辛酸脱氢酶）和六种辅助因子（焦磷酸硫胺素、硫辛酸、FAD、NAD、CoA和Mg离子）组成，在它们的协同作用下，使丙酮酸转变为乙酰CoA和CO2

19、。别构调控：丙酮酸脱氢酶复合体受它的催化产物ATP、乙酰-CoA和NADH有力的抑制，这种别构抑制可被长链脂肪酸所增强，当进入三羧酸循环的乙酰-CoA减少，而AMP、CoA和NAD+堆积，酶复合体就被别构激活。化学修饰：当丙酮酸脱氢酶中的丝氨酸残基被ATP磷酸酯化之后，复合物会失去活性；反之如果磷酸酯化产生的磷酸酯基被水解掉，则复合物会再度活化。另外磷酸酯化作用本身又受到丙酮酸的抑制；并且当ATP/ADP、乙酰辅酶A辅酶A，以及NADH/NAD+的比值高时，将有促进磷酸酯化的效果。16 试画出4条主要信号传递途径。1)cAMP-蛋白激酶途径细胞外信息物质受体G蛋白第二信使（cAMP）蛋白激酶（

20、PKA）功能蛋白质磷酸化生物学效应2)cGMP-蛋白激酶途径配体-受体复合物激活受体鸟苷酸环化酶（GC）GTPcGMPPKG效应蛋白磷酸化生物学效应3）酪氨酸蛋白激酶（TPK）途径分两类，受体型TPK与非受体型TPK，二者信息传递途径有所不同，分别为：受体型TPK-Ras-MAPK途径：胰岛素、胰岛素样生长因子等受体型TPK中介蛋白（Grb2/Sos等）RasRaf有丝分裂原激活蛋白系统（MAPK）生物学效应JAKs-STAT途径：干扰素、生长素等非受体型TPK（JAKs）信号转导子和转导激动子（STAT）调节转录4)核因子B（NF-B）途径肿瘤坏死因子等结合相应受体后，通过第二信使（Cer等

21、）使抑制性蛋白磷酸化并从NF-B脱落，激活NF-B，后者进入细胞核启动或抑制有关基因的转录。5) 离子受体介导的信号转导途径6) Ca2+-依赖性蛋白激酶途径7) TGF-途径TGF-诱导TR I和TR II形成异源性的复合物，开始跨膜信息转导。17 从结构组成、活化、失活及所介导的信号转导比较Ras蛋白和G蛋白。G蛋白是一种位于膜胞浆面的外周蛋白，由、三个亚基构成，有非活化型和活化型两种，当、的三聚体与GDP相结合时为非活化型，若亚基与GTP结合时为活化型，同时G蛋白还有GTP酶的活性。活化型可以激活腺甘酸环化酶，促使ATP生成cAMP。在信息传导中的作用：1.调节腺苷酸环化酶（AC）的活性

22、：Gs激活腺苷酸环化酶cAMP；Gi抑制腺苷酸环化酶- cAMP。2.调节磷脂酶C的活性，促进IP3及DG的生成。3.调节离子通道的功能。Ras蛋白是癌基因las的编码产物，人类有3种ras基因，即HFaS、Klas和NFas，分布于不同染色体上，能编码蛋白质P21。所有的RasP21均有结合鸟核苷酸(GTP和GDP)和GTP酶的活性(水解GTP为GDP)。当结合GTP时，RasP21处于活性状态；当结合GDP时，则处于非活性状态。在RasGTP和RasGDP这两种构象中，只有RasGTP能激活Ras以下的信号转导过程，所以Ras蛋白可以通过两种构象的互换控制细胞信号转导，从而调节细胞分化、增

23、殖和凋亡过程。信号传导：生长因子受体(受体酪氨酸蛋白激酶)一含有SH2结构域的接头蛋白(如Grb2)一鸟嘌呤核苷酸释放因子(如SOS)一Ras蛋白一MAPKKK(如Raf)一MAPKKMAPK一转录因子一DNA合成。结构组成活化失活介导的信号转导Ras蛋白（小G蛋白）为原癌基因的产物，是一种单体蛋白，相对分子质量为21KD，性质类似于G蛋白中的Ga亚基。相对分子量小于与七次跨膜螺旋受体偶联的G蛋白。Ras-GTP活化型RasGDP非活化型主要参与Ras-MAPK信号转导G蛋白、三个亚基组成，亚基上有鸟苷结合位点、GTPase的活性结构域和ADP核糖化位点。当亚基与GTP结合并导致二聚体脱落时则

24、变成活化型。以三聚体存在并与GDP结合者为非活化型1、调节腺苷酸环化酶的活性，2、调节磷脂酶C的活性，3、调节离子通道的功能18 阐述脂肪分解代谢的过程及饱食、饥饿的调节。甘油三酯的分解代谢主要是脂酸的氧化：1) 脂肪动员是甘油三酯分解的起始步骤：脂肪动员是指储存在脂肪细胞中的甘油三酯，被脂酶逐步水解为游离脂酸和甘油并释放入血，通过血液运输到其他组织氧化利用的过程。脂肪动员过程中，甘油三酯脂肪酶为脂肪动员的限速酶，因受多种激素调节，故又被称为激素敏感性脂肪酶。2) 甘油经甘油激酶催化生成3-磷酸甘油，在脱氢生成磷酸二羟丙酮，进入糖酵解途径进行分解或异生成糖。3) 脂酸经B氧化分解功能：游离脂肪

25、酸在脂酰辅酶A合成酶催化下生成脂酰辅酶A，称为脂肪酸的活化，反应需消耗ATP。脂酰辅酶A经肉碱转运体进入线粒体；脂酰CoA进入线粒体后进行-氧化，即脱氢、加水、再脱氢、硫解，最终生成1分子乙酰辅酶A，碳链缩短两个碳原子，同时伴有5分子ATP生成。一部分乙酰辅酶A在线粒体内通过三羧酸循环彻底氧化分解，一部分缩合生成酮体，经血液运输至肝外组织氧化利用。脂酸氧化是体内能量的重要来源。4) 在骨骼肌、心脏等肝外组织线粒体内，脂酸B氧化产生的乙酰辅酶A直接进入三羧酸循环彻底氧化功能。而肝细胞产生的大量乙酰辅酶A除氧化生成ATP功能外，还在线粒体内转化成酮体。5) 脂酸还有其他氧化方式。如奇数碳原子脂酸进

26、行-氧化时，最终会生成1分子丙酰辅酶A。丙酰辅酶A经-羧化酶及异构酶作用转变为琥珀酰辅酶A，进入三羧酸循环而被氧化。化学修饰：当禁食、饥饿或交感神经兴奋时，肾上腺素、去甲肾上腺素、胰高血糖素等分泌增加，作用于脂肪细胞膜表面受体，激活腺苷酸环化酶，促进cAMP的合成，激活依赖cAMP的蛋白激酶，使胞液内甘油三酯脂酶磷酸化而活化。后者使甘油三酯水解成甘油二酯及脂酸。甘油二酯甘油二酯酶进一步水解成甘油一酯和脂酸，甘油一酯最终被甘油一酯水解成甘油和脂酸。胰高血糖素、肾上腺素、生长素还通过增加蛋白激酶A活性使乙酰辅酶A磷酸化而降低其活性，抑制脂酸的合成，也抑制甘油三酯的合成。饱食时则胰岛素分泌增加，胰岛

27、素可以诱导乙酰辅酶A、脂酸合成酶、ATP-柠檬酸裂解酶等得合成从而促进脂酸合成。同时胰岛素还能促进脂酸合成磷脂酸，还增加脂肪的合成。变构调节：进食高脂食物，肝细胞内脂酰辅酶A增多，变构抑制乙酰辅酶A羧化酶，从而抑制体内脂酸的合成。进食糖类而糖代谢加强，NADPH以及乙酰辅酶A供应增多，有利于脂酸的合成，同时糖代谢加强使细胞内ATP增多，抑制异柠檬酸脱氢酶，造成异柠檬酸及柠檬酸堆积，透出线粒体，变构激活乙酰辅酶A羧化酶，是脂酸合成增加。饥饿时则相反。饥饿时，肉碱脂酰转移酶活性增加；饱食，反之。19 cAMP-PKA对基因表达的调节。1、信息分子（如胰高血糖素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素等）与膜上

28、Gs蛋白偶联受体结合形成配体受体复合体。2、复合物与Gs蛋白结合后使Gs蛋白游离出亚基。3、Gs蛋白亚基与AC结合，激活AC。4、活化的AC催化ATP生成cAMP。6、cAMP变构激活PKA。在细胞核中，活化的PKA通过使CREB磷酸化而调节相关基因的表达，参与细胞增殖调控。20酮体生成的意义及饱食、饥饿调节作用。生理意义：酸在体内正常的中间代谢产物，酮体是肝脏输出能源的一种形式。正常值为：0.03-0.5mmol/l。并且酮体能透过血脑屏障和毛细血管壁，是肌肉尤其是脑组织的重要能源。脑组织不能氧化脂酸，却能利用酮体。长期饥饿或血糖供应不足时，酮体可以代替葡萄糖成为脑和肌等组织的主要能源。另外

29、，酮体利用的增加可减少糖的利用，有利于血糖水平的恒定，节省蛋白质的消化。病理意义：酮血症、酮尿症、酮症酸中毒调节：饱食时，胰岛素分泌增加，抑制脂解，脂酸B氧化减少，酮体生成减少；反之，胰高血糖素等脂解激素分泌增加，促进脂解，脂酸B氧化增加，酮体生成增加。21 简述各种脂蛋白的代谢途径。（待完善）一般说来, 人体内血浆脂蛋白代谢可分为外源性代谢途径和内源性代谢途径。外源性代谢途径是指饮食摄入的胆固醇和甘油三酯在小肠中合成CM及其代谢过程;而内源性代谢途径则是指由肝脏合成VLDL,后者转变为IDL和LDL,LDL被肝脏或其它器官代谢的过程。此外, 还有一个胆固醇逆转运途径, 即HDL的代谢。1、新

30、生的CM可接受HDL的apoC及E，逐渐形成成熟的CM，三酰甘油在LPL作用下逐渐减少，最终降解。2、VLDL在肝细胞形成后接受HDL的apoC激活LPL，三酰甘油逐渐减少，转变为中间密度脂蛋白，进而转变为LDL。3、LDL与细胞膜的LDL受体结合，被吞入细胞与溶酶体结合，载脂蛋白被水解，胆固醇酯水解为胆固醇和脂肪酸。4、HDL主要在肝降解，将肝外组织的胆固醇运输到肝并合成胆汁酸或直接排除体外。22 Ras蛋白的特点及活化、失活过程。Ras是大鼠肉瘤（rat sarcoma，Ras）的英文缩写。Ras蛋白是原癌基因c-ras的表达产物，相对分子质量为21kDa，属单体GTP结合蛋白，具有弱的G

31、TP酶活性。其活性则是通过与GTP或GDP的结合进行调节。其活性受两个蛋白的控制，一个是鸟苷交换因子（GEF），它的作用是促使GDP从Ras蛋白上释放出来，取而代之的是GTP，从而将Ras激活，GEF的活性受生长因子及其受体的影响。另一个控制Ras蛋白活性的是GTP酶激活蛋白（GAP）存在于正常细胞中，主要作用是激活Ras蛋白的GTP酶，将结合在Ras蛋白上的GTP水解成GDP，成为失活型的Ras蛋白GDP。所以在正常情况下，Ras蛋白基本上都与GDP结合在一起，定位在细胞质膜内表面上。23 信号转导的简要步骤。细胞外信号 受体 细胞内多种分子的浓度、活性、位置变化 细胞应答反应24 胞内受体

32、的结构及各结构区的功能。（胞内受体：位于胞浆和细胞核中的受体，全部为DNA结合蛋白）高度可变区位于N端，具有激活转录功能DNA结合区含有锌指结构激素结合区位于C端，结合激素、热休克蛋白，使受体二聚化，激活转录铰链区25 蛋白质分离纯化的方式有哪些，简述其中4种的基本原理。1) 透析法：利用透析膜将蛋白质溶液中的小分子物质分离出来。2) 沉淀法：丙酮沉淀：在丙酮溶液中，蛋白质分子中的侧链极性基团相互接近，导致蛋白质沉淀析出。盐析：加入中性盐破坏蛋白质的稳定条件，即中和表面电荷、破坏水化膜，使蛋白质聚集沉淀。免疫沉淀法：利用特异性抗体识别溶液中的抗原蛋白质并与之结合形成复合物，可从蛋白质混合溶液中

33、分离抗原蛋白。3) 电泳法：不同蛋白质具有不同的等电点，在高于或低于其等电点的溶液中，蛋白质分子带电荷，能向正极或负极移动。包括SDS-PAGE，等电聚焦电泳，双相凝胶电泳。4) 层析法：根据待分离的蛋白质组分的分子大小、电荷多少以及亲和力的不同，将待分离的蛋白质样品在两相中反复分配，并以不同速率流出流动相而达到分离的目的。包括离子交换层析、分子筛层析、亲和层析等。5) 超速离心分离：利用蛋白质在离心场中的沉降系数不同而使蛋白质分离。26 阐述6-磷酸果糖激酶-1的调节。6-磷酸果糖激酶-1对调节糖酵解途径的流量最重要。它的调节包括变构调节和化学修饰两方面。1) 变构调节。变构抑制剂：ATP，

34、柠檬酸。当两者含量增加时，6-磷酸果糖激酶-1活性下降。变构激活剂：ADP，AMP，1,6-二磷酸果糖，2,6-二磷酸果糖。其中2,6-二磷酸果糖是最强激活剂。2) 化学修饰。6-磷酸果糖激酶-2是一种双功能酶，可催化6-磷酸果糖和2,6-二磷酸果糖之间的转化，兼有6-磷酸果糖激酶-2和果糖二磷酸酶-2的活性，这两种酶可在激素作用下进行共价修饰调节。胰高血糖素通过cAMP及依赖cAMP的蛋白激酶磷酸化6-磷酸果糖激酶-2的32位丝氨酸，使其6-磷酸果糖激酶-2活性下降而果糖二磷酸酶-2活性升高，而使2，6-二磷酸果糖转化为6-磷酸果糖，减弱2，6-二磷酸果糖对6-磷酸果糖激酶-1的激活作用，进而抑制糖酵解而升高血糖。27 简述NF-B的途径及其在应激状态下的反应。1、当TNFa（肿瘤坏死因子a）等与受体结合后，可通过第二信使Cer（N-脂酰