第03章药物的杂质检查

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查第一节第一节 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源 第二节第二节 药物的杂质检查法药物的杂质检查法第三节第三节 一般杂质检查一般杂质检查第四节第四节 特殊杂质检查特殊杂质检查第一节第一节 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源 一、药物的纯度一、药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。含有杂质是影响药物纯度的主要因素。药物中杂质超过质量标准规定，就有可能使药药物中杂质超过质量标准规定，就有可能使药物的外观性状、物理常数发生变化，甚至影响物的外观性状、物理常数发生变化，甚至影

2、响药物的稳定性，使活性降低、毒副作用增加。药物的稳定性，使活性降低、毒副作用增加。杂质（杂质（impuritiesimpurities）是指：）是指： 有毒副作用的物质。有毒副作用的物质。 本身无毒副作用，但影响药物的稳定本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质。性和疗效的物质。1.1.本身无毒副作用，也不影响药物的稳本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质。的物质。二、药物中杂质的来源二、药物中杂质的来源生产过程中引入生产过程中引入原料、反应中间体及副产物原料、反应中间体及副产物试剂、溶剂、催化剂类试剂、溶剂、催化剂类生产中

3、所用金属器皿、装置以及其他生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质在药物生产过程中引入杂质的途径为在药物生产过程中引入杂质的途径为原料不纯或部分未反应完全的原料造成原料不纯或部分未反应完全的原料造成合成过程中产生的中间体或副产物分离不合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成净造成需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成混晶等造成所用金属器皿及装置等引入杂质所用金属器皿及装置等引入杂质a.a. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质解引入的杂质 贮藏过

4、程中产生贮藏过程中产生 水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等聚合、潮解和发霉等 三、杂质的分类三、杂质的分类 药物中的杂质按来源分为一般杂质药物中的杂质按来源分为一般杂质和特殊杂质：和特殊杂质： 一般杂质一般杂质是指在自然界分布较广泛，在多种药是指在自然界分布较广泛，在多种药物生产和储藏过程中容易引入的杂质。如：氯物生产和储藏过程中容易引入的杂质。如：氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录

5、中。查方法收载在中国药典的附录中。 特殊杂质特殊杂质指某一个或某一类药物的生产或贮指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不同而不同。如阿司匹林中的游离水杨酸、异同而不同。如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。品的质量标准中。药物中的杂质按毒性可分为毒性杂药物中的杂质按毒性可分为毒性杂质和信号杂质：质和信号杂质： 重金属盐、砷盐为毒性杂质；信号杂质一重金属盐、砷盐为毒性杂质；

6、信号杂质一般无毒，但其含量的多少可反映出药物的般无毒，但其含量的多少可反映出药物的纯度情况，如果药物中信号杂质含量过多，纯度情况，如果药物中信号杂质含量过多，提示该药的生产工艺或生产控制有问题。提示该药的生产工艺或生产控制有问题。 氯化物、硫酸盐属于信号杂质。氯化物、硫酸盐属于信号杂质。药物中的杂质按其理化性质可分为药物中的杂质按其理化性质可分为有机杂质、无机杂质及残留溶剂：有机杂质、无机杂质及残留溶剂： 无机杂质可能来源于生产过程，如使用无机杂质可能来源于生产过程，如使用的仪器的仪器、原料、干燥剂、过滤辅助器、原料、干燥剂、过滤辅助器、反应试剂、重金属、无机盐、活性炭等，反应试剂、重金属、无

7、机盐、活性炭等，它们一般是已知的和确定的。它们一般是已知的和确定的。四、药物的纯度与化学试剂的纯度四、药物的纯度与化学试剂的纯度n 药物的纯度考虑杂质的生理作用，药药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。品只有两个等级：合格或不合格。n 化学试剂有很多等级，如基准试剂、化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（优级纯（GRGR）、分析纯（）、分析纯（ARAR）、化学）、化学纯（纯（CPCP）、色谱纯、光谱纯。）、色谱纯、光谱纯。例例. . 临床所用药物的纯度与化学品及试剂临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别是：纯度的主要区别是：A. A. 所含杂质的生理效应不同所

8、含杂质的生理效应不同B. B. 所含有效成分的量不同所含有效成分的量不同 C. C. 所含杂质的绝对量不同所含杂质的绝对量不同D. D. 化学性质及化学反应速度不同化学性质及化学反应速度不同E. E. 所含有效成分的生理效应不同所含有效成分的生理效应不同第二节第二节 药物的杂质检查法药物的杂质检查法一、杂质限量一、杂质限量指药物中允许杂质存在的最大量，通常用指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几（百分之几或百万分之几（parts per parts per millionmillion，ppmppm）来表示。）来表示。100%供试品量杂质最大允许量）杂质限量（药物中杂质限量的

9、控制方法一般分为两种：一药物中杂质限量的控制方法一般分为两种：一种为限量检查法（种为限量检查法（limitlimit，testtest），另一种是），另一种是对杂质进行定量测定。限量检查法通常不要求对杂质进行定量测定。限量检查法通常不要求测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量。测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量。定量测定法则要求测定杂质的绝对含量定量测定法则要求测定杂质的绝对含量。二、杂质限量检查法二、杂质限量检查法 对照法：对照法：取一定量的被检杂质标准溶取一定量的被检杂质标准溶液和一定量的供试品溶液，液和一定量的供试品溶液，在完全相在完全相同的条件下处理同的条件下处理，比较反应结果

10、，以，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。确定杂质含量是否超过限量。100%供试品量标准溶液体积标准溶液浓度）杂质限量（100%SVCL）（ 灵敏度法灵敏度法：指在供试品溶液中加入一指在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定反应条件下，不定量的试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现，从而判断供试品种得有正反应出现，从而判断供试品种所含杂质是否符合限量规定。该法不所含杂质是否符合限量规定。该法不需用对照品溶液对比。需用对照品溶液对比。 比较法：比较法：指取供试品一定量依法检查，指取供试品一定量依法检查，测定特定待检杂质的参数（如吸光度测定特定待检杂质的参数（如吸光度等）与规定的限量比较，不

11、得更大。等）与规定的限量比较，不得更大。三、药物中杂质限量的计算（示例）三、药物中杂质限量的计算（示例） 示例示例1 1：茶苯海明：茶苯海明* *中氯化物的检查中氯化物的检查取本品取本品0.30g0.30g置于置于200ml200ml量瓶中，加水量瓶中，加水50ml50ml、氨试液、氨试液3ml3ml和和10%10%硝酸铵溶液硝酸铵溶液6ml6ml，置于水浴上加热，置于水浴上加热5min5min，加硝酸银试液，加硝酸银试液25ml25ml，摇匀，再置于水浴上加热摇匀，再置于水浴上加热15min15min，并时时振摇，放冷，加水，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，放置稀释至刻度，摇匀，放置

12、15min15min，滤过，取滤液，滤过，取滤液25ml25ml置纳氏置纳氏比色管中，加稀硝酸比色管中，加稀硝酸10ml10ml，加水稀释成，加水稀释成50ml50ml，摇匀，在暗处，摇匀，在暗处放置放置5min5min，与标准氯化钠溶液（，与标准氯化钠溶液（10gCl/ml10gCl/ml）1.5ml1.5ml制成的制成的对照液比较，求氯化物的限量。对照液比较，求氯化物的限量。注：茶苯海明又名乘晕宁、晕海宁；为苯海拉明与茶碱的复合物，用注：茶苯海明又名乘晕宁、晕海宁；为苯海拉明与茶碱的复合物，用于防治乘车、机、船引起的眩晕、恶心和呕吐，也可用于过敏性疾病。于防治乘车、机、船引起的眩晕、恶心和

13、呕吐，也可用于过敏性疾病。0.04%100%2002530. 05 . 11010100%6-SVCL）（示例示例2 2：谷氨酸钠中重金属的检查：谷氨酸钠中重金属的检查取本品取本品1.0g1.0g，加水，加水23ml23ml溶解后，加溶解后，加2ml2ml醋酸盐缓冲醋酸盐缓冲液液 ( p H = 3 . 5 )( p H = 3 . 5 ) ， 依 法 检 查 ， 与 标 准 铅 溶 液， 依 法 检 查 ， 与 标 准 铅 溶 液(10gPb/ml)(10gPb/ml)所呈现所呈现颜色相比较，不得更深，重金颜色相比较，不得更深，重金属限量为百万分之十，求取标准铅溶液多少毫升？属限量为百万分之

14、十，求取标准铅溶液多少毫升？)ml(0.110100.11010100%6-6-CSLV示例示例3 3：肾上腺素中酮体的检查：肾上腺素中酮体的检查取本品取本品0.20g0.20g，置于，置于100ml100ml量瓶中，加盐酸溶液量瓶中，加盐酸溶液（9200092000）溶解并稀释至刻度，摇匀，在）溶解并稀释至刻度，摇匀，在310nm310nm处处测定吸光度不得超过测定吸光度不得超过0.050.05，酮体的，酮体的E1cm1%为为435435，求，求酮体的限量。酮体的限量。)/(101.1510014350.0510015-1%1cmmlgEAC酮体)/(100.21000.23mlgC样品0.

15、6%100%102.0101.15100%(%)3-5样品酮体CCL示例示例4 4：卡比马唑片：卡比马唑片( (规格：规格：5mg)5mg)中甲巯咪唑的检查中甲巯咪唑的检查取本品取本品2020片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比马唑溶液，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液马唑溶液，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液与洗液，置与洗液，置10ml10ml量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取甲巯咪唑对照品，加摇匀，作为供试品溶液；另取甲巯咪唑对照品，加三氯甲烷制成每三氯甲烷制成每1ml1ml中含有中含有100100

16、 g g的溶液，作为对照的溶液，作为对照品溶液；分别吸取上述两溶液个品溶液；分别吸取上述两溶液个10 10 l l，分别点于，分别点于同一硅胶同一硅胶G G薄层板上，以三氯甲烷薄层板上，以三氯甲烷- -丙酮（丙酮（4:14:1）为）为展开剂，展开后，晾干，喷以稀碘化铋钾试液使显展开剂，展开后，晾干，喷以稀碘化铋钾试液使显色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品主斑点比较，不得更深，求杂质限量。颜色与对照品主斑点比较，不得更深，求杂质限量。注：卡比马唑片又名甲亢平，属于抗甲状腺注：卡比马唑片又名甲亢平，属于抗甲状腺1.0%100%101

17、000205100100%C%样品杂质）（CL第三节第三节 一般杂质的检查一般杂质的检查药品检验操作标准药品检验操作标准 遵循平行操作原则遵循平行操作原则仪器的配对性，如：纳氏比色管应配对，刻度仪器的配对性，如：纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过线高低相差不超过2mm2mm。1.1. 对照品与供试品的同步操作。对照品与供试品的同步操作。一、一般杂质检查规则一、一般杂质检查规则 正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围, ,如如: : 1g1g不不 超过超过2%2%，1g1g不超过不超过1%1% 正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对检

18、查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份供试管和对照管各复查二份 二、氯化物检查法二、氯化物检查法（一）原理：（一）原理：对照法对照法 白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 Vc除另有规定外，取各药品项下规定量的供试除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成品，加水溶解使成25ml25ml（溶液如显碱性，可（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m110m1；溶；溶液如不澄清，应滤过；置液如不澄清，应滤过；置50ml50ml纳氏比色管中，纳氏比色管中，加水使成

19、约加水使成约40m140m1，摇匀，即得供试溶液。，摇匀，即得供试溶液。（二）检查方法：药典附（二）检查方法：药典附录录另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置置50ml50ml纳氏比色管中，加稀硝酸纳氏比色管中，加稀硝酸10m110m1，加水，加水使成使成40m140m1，摇匀，即得对照浴液。于供试溶，摇匀，即得对照浴液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m11.0m1，用水稀释使成，用水稀释使成50m150m1，摇匀，在暗处，摇匀，在暗处放置放置5 5分钟，同置黑色背景上，从比色管上分钟，同置黑色背景上，

20、从比色管上方向下观察，比较，即得。方向下观察，比较，即得。（三）测定条件（三）测定条件 标准标准NaClNaCl溶液溶液 1010 gCl/mlgCl/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含50508080 g g的的ClCl 所显浑浊梯度明显，相当所显浑浊梯度明显，相当于标准于标准NaClNaCl溶液溶液5 58ml8ml。 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml50ml供试溶液中含稀硝酸供试溶液中含稀硝酸10ml10ml为宜。为宜。加速加速AgClAgCl浑浊的形成；浑浊的形成；产生较好的乳浊；产生较好的乳浊；避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银避免弱酸

21、银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。沉淀的形成。 试剂：硝酸银试剂：硝酸银 供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀使生成白色浑浊而不是白色沉淀 。 避光、暗处放置避光、暗处放置5 5分钟后比浊，因氯化银分钟后比浊，因氯化银见光易分解。见光易分解。 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。观察。 平行操作原则平行操作原则（四）干扰及排除（四）干扰及排除 若供试品有色，需经处理后方可检查。若供试品有色，需经处理后方可检查。 。内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物内消色法：倍量法，如枸橼酸

22、铁铵中氯化物的检查。的检查。外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。 不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物加水振摇，过滤，取滤液进行检查。加水振摇，过滤，取滤液进行检查。 溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查或丙酮溶解后进行检查 药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（）浊，所用的稀酸是（）A. A. 硫酸硫

23、酸 B. B. 硝酸硝酸 C. C. 盐酸盐酸 D. D. 醋酸醋酸 E. E. 磷酸磷酸 自测题自测题 中国药典（中国药典（20052005年版）规定，检查氯化年版）规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（1010gClgCl/ml/ml）5 58ml8ml的原因是（）的原因是（）A. A. 使检查反应完全使检查反应完全B. B. 药物中含氯化物的量均在此范围药物中含氯化物的量均在此范围C. C. 加速反应加速反应D. D. 所产生的浊度梯度明显所产生的浊度梯度明显E. E. 避免干扰避免干扰 采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝采用硝酸银试液检查氯化物

24、时，加入硝酸使溶液酸化的目的是（）酸使溶液酸化的目的是（）A A加速生成氯化银浑浊反应加速生成氯化银浑浊反应B B消除某些弱酸盐的干扰消除某些弱酸盐的干扰C C消除碳酸盐干扰消除碳酸盐干扰D D消除磷酸盐干扰消除磷酸盐干扰E E避免氧化银沉淀生成避免氧化银沉淀生成 当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（）用的处理方法为（）A A内消色法内消色法B B外消色法外消色法C C比色法比色法D D差示比浊法差示比浊法E E差示可见分光法差示可见分光法 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最若要

25、进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是（）佳方法是（）A. A. 加入一定量氯仿提取后测定加入一定量氯仿提取后测定B. B. 氧瓶燃烧氧瓶燃烧C. C. 倍量法倍量法D. D. 加入一定量乙醇加入一定量乙醇E. E. 以上都不对以上都不对 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（）要条件（）A. A. 所用比色管需配套所用比色管需配套B. B. 稀硝酸酸性下稀硝酸酸性下(10ml/50ml)(10ml/50ml)C. C. 避光放置避光放置5 5分钟分钟D. D. 用硝酸银标准溶液做对照用硝酸银标准溶液做对照E. E. 在白色背景下观察在白色背景下观察 三、

26、硫酸盐检查法三、硫酸盐检查法（一）原理：（一）原理：对照法对照法白色 浑色BaSOBaClSO药物4HCl224：白色浑色BaSOBaCl)V、(cSOK对照：4HCl242（二）测定条件（二）测定条件 标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含0.10.10.5mg0.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于的所显浑浊梯度明显，相当于标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml50ml供试溶液中含稀盐酸供试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。

27、 试剂：氯化钡试剂：氯化钡 供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。使生成白色浑浊而不是白色沉淀。 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。观察。 药物中硫酸盐检查时，所用标准对照液是（）药物中硫酸盐检查时，所用标准对照液是（）A. A. 标准氯化钡标准氯化钡B. B. 标准醋酸铅溶液标准醋酸铅溶液C. C. 标准硝酸银溶液标准硝酸银溶液D. D. 标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液E. E. 以上都不对以上都不对 自测题自测题若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。若供试品有色，也可用内消色法

28、即倍量法处理。 （三）干扰及排除（三）干扰及排除四、铁盐检查法四、铁盐检查法( (硫氰酸盐法和巯基醋酸法硫氰酸盐法和巯基醋酸法) )1. 1. 原理原理: : 对照法对照法（一）硫氰酸盐法（一）硫氰酸盐法 红色SCNFe6SCN药物36HCl3o23FeFeFe：红色、对照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc2. 2. 检查方法检查方法（药典附录）药典附录）除另有规定外，取各药品项下规定量的供试除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成品，加水溶解使成25ml25ml，移置，移置50ml50ml纳氏比色纳氏比色管中，加稀盐酸管中，加稀盐酸2ml2ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg

29、50mg，用水，用水稀释使成稀释使成35m135m1后，加后，加30%30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml3ml，再加水适量稀释成再加水适量稀释成50ml50ml，摇匀；如显色，立，摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液比较，比较，即得。即得。对照溶液的制备对照溶液的制备取各药品项下规定量的标准铁溶液，置取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml50ml纳氏比色管中，加水使成纳氏比色管中，加水使成25ml25ml，加稀盐酸，加稀盐酸2ml2ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg50mg，用水稀释使成，用水稀释使成35m135m1后，后，加加30%30%硫

30、氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml3ml，再加水适量稀释成，再加水适量稀释成50ml50ml，摇匀。，摇匀。3. 3. 测定条件测定条件 用用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4) )2 212H12H2 2O O（硫酸铁铵）配制标准（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止铁贮备液（加入硫酸防止FeFe3+3+的水解），标的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液1010 g g FeFe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+3+显色显色梯度明显，一般取标准铁溶液梯度明显，一般取标准铁溶液1.01.0

31、5.0ml 5.0ml 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml50ml供供试溶液中含稀盐酸试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。 试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行向正反应方向进行 检查检查FeFe2+2+和和FeFe3+3+。铁盐检查时，加氧化剂氧化。铁盐检查时，加氧化剂氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+。加过硫酸铵可氧化。加过硫酸铵可氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化加硝酸后加热也可氧

32、化FeFe2+2+为为FeFe3+3+ 比色方法：同置于白色背景上，自上向下观比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。察。 4. 4. 干扰及排除干扰及排除 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。色。 具环状结构的有机药物，需经具环状结构的有机药物，需经700700800800炽炽灼破坏处理后再依法检查。灼破坏处理后再依法检查。（二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法 原理：原理：对照法对照法本法灵敏度较高，但试剂较贵！红色药物：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20FeFe233

33、2Feml红色对照：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20323FeFeml 中国药典（中国药典（20052005年版）规定铁盐的检查年版）规定铁盐的检查方法为（）方法为（）A. A. 硫氰酸盐法硫氰酸盐法B. B. 巯基醋酸法巯基醋酸法C. C. 普鲁士蓝法普鲁士蓝法D. D. 邻二氮菲法邻二氮菲法E. E. 水杨酸显色法水杨酸显色法自测题自测题 中国药典（中国药典（20052005年版）规定，硫氰酸铵年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是（）（） 使药物中铁盐都转变为使药物中铁盐都转变为FeFe3+3+ 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色防

34、止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 使产生的红色产物颜色更深使产生的红色产物颜色更深 防止干扰防止干扰 便于观察、比较便于观察、比较 中国药典收载的铁盐检查，主要是检中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（）查（） FeFe FeFe2+2+ FeFe3+3+ FeFe2+2+和和FeFe3+3+ 以上都不对以上都不对 五、重金属检查法五、重金属检查法（以铅为代表）（以铅为代表）（毒性杂质，须严控）（毒性杂质，须严控） 中国药典（中国药典（20052005年版）共收载四法：年版）共收载四法： 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 炽灼残渣法炽灼残渣法 硫化钠法硫化钠法微孔滤膜法微孔滤膜法 （一）第一法（一）第一法

35、 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法1. 1. 原理：原理：对照法对照法 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黄色棕黑色药物：PbSSHPbpH3.522 黄色棕黑色、对照：PbSSH)Pb(NOpH3.5223 Vc2. 2. 测定条件测定条件 用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止PbPb2+2+水解），标准铅溶液临用前稀释而成，水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液标准硝酸铅溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，适宜比色，适宜比色范围为范围为27ml27ml溶液

36、中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+2+。 本法用本法用2ml pH=3.52ml pH=3.5的醋酸盐缓冲液控制溶的醋酸盐缓冲液控制溶液液pHpH值为值为3 33.53.5。 显色剂：从显色剂：从Ch.PCh.P（19901990）开始改用硫代乙）开始改用硫代乙酰胺做显色剂。酰胺做显色剂。 供试品如有色，需经处理后方可检查。供试品如有色，需经处理后方可检查。外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。干扰的有色溶液。 内消色法。内消色法。改用第四法，微孔滤膜过滤法。改用第四法，微孔滤膜过滤法。 若供试品中有微量若供试品中有微

37、量FeFe3+3+存在，会氧化硫化氢存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（盐酸羟胺（0.50.51.0g1.0g）还原）还原FeFe3+3+为为FeFe2+2+，可，可消除干扰。消除干扰。3. 3. 干扰及排除干扰及排除 若供试品为铁盐，若供试品为铁盐，FeFe3 +3 +在盐酸中生成在盐酸中生成HFeCl HFeCl ，用乙醚提取除去，剩余微量铁在，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加氨碱性溶液中，加KCNKCN掩蔽，然后用第三法掩蔽，然后用第三法检查。检查。 若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加若药物本身能生成不溶性硫化

38、物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如入掩蔽剂消除干扰。如ZnSOZnSO4 4中重金属的检中重金属的检查，要在碱性下加查，要在碱性下加KCNKCN掩蔽掩蔽ZnZn2+2+后，依第三后，依第三法检查。法检查。26（二）第二法（二）第二法 炽灼残渣法炽灼残渣法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。 500500600600炽灼后的残渣，经处理后，炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。依一法检查。 1. 1. 原理：原理：对照法对照法2. 2. 操作方法操作方法依一法检查氯化物残渣置坩埚中样品：缓冲液左右调节至、炽灼残渣 mlS0 . 25 . 3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6

39、005002323依一法检查对照：空坩埚缓冲液溶液）（标准、ml0 . 25 . 3pHNOPbOHOHNHHClHNO232233含钠盐及氟的有机药物应用铂坩埚、石含钠盐及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）。坩埚，带入大量重金属）。（三）第三法（三）第三法 硫化钠法硫化钠法适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。 1. 1. 原理原理 对照法对照法 黄色棕黑色药物：PbSSNaPbNaOH22 黄色棕黑色、对照：

40、PbSSNa)Pb(NONaOH223 Vc2. 2. 测定条件测定条件 NaOH NaOH 碱性条件下碱性条件下 显色剂：硫化钠显色剂：硫化钠 （四）第四法（四）第四法 微孔滤膜法微孔滤膜法 依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色斑。适用于含斑。适用于含2 25 5 g g重金属杂质及有色供重金属杂质及有色供试液的检查。试液的检查。 重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的液控制最佳的pHpH值是（）值是（）A. 1.5 A. 1.5 B. 3.5 B. 3.5 C C7.57.5D. 9.5 D. 9.5 E. 11.5

41、E. 11.5自测题自测题 微孔滤膜法是用来检查（）微孔滤膜法是用来检查（）A.A. 氯化物氯化物 B. B. 砷盐砷盐C. C. 重金属重金属 D. D. 硫化物硫化物E. E. 氰化物氰化物 中国药典中国药典(2005(2005年版年版) )重金属检查法中，重金属检查法中，所使用的显色剂是（）所使用的显色剂是（） 硫化氢试液硫化氢试液 硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 硫化钠试液硫化钠试液 氰化钾试液氰化钾试液 硫氰酸铵试液硫氰酸铵试液 现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用检查，应采用中国药典中国药典上收载的重上收载的重金属检查的哪种方法（）金属检查

42、的哪种方法（）A. A. 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法B. B. 炽灼残渣法炽灼残渣法C. C. 硫化钠法硫化钠法D. D. 微孔滤膜法微孔滤膜法E. E. 以上都不对以上都不对 下面哪些方法为下面哪些方法为中国药典中国药典收载的收载的重金属检查方法（）重金属检查方法（） 500500600600炽灼残渣后炽灼残渣后, ,按一法操作按一法操作 pH3pH33.53.5条件下，加入硫化氢试液条件下，加入硫化氢试液 碱性下，加入硫化钠试液碱性下，加入硫化钠试液 按一法操作，结果用微孔滤膜过滤按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑后观察色斑 以上都对以上都对六、砷盐检查法六、砷盐检查法（毒性杂质，须严

43、控）（毒性杂质，须严控） （一）古蔡法（一）古蔡法(ChP:2005(ChP:2005）遇遇HgBrHgBr2 2试纸生成黄色棕色的砷斑，与试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。1. 1. 原理：原理：对照法对照法 3332AsHAsOHHClZn2. 2. 操作方法操作方法 标准砷斑用标准砷斑用2ml2ml标准标准砷溶液制备。砷溶液制备。 供试品需经有机破坏，供试品需经有机破坏，则标准砷溶液应平行则标准砷溶液应平行操作。操作。滴加滴加KIKI试液试液5ml5ml和和酸性氯化亚锡酸性氯化亚锡5 5滴滴醋酸铅棉花醋酸铅棉

44、花溴化汞试纸溴化汞试纸3. 3. 测定条件测定条件 标准砷溶液临用新配，标准砷溶液临用新配，1 1 gAs/mlgAs/ml。 醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg60mg装管高度装管高度606080mm80mm。 锌粒应无砷锌粒应无砷 酸为反应物，酸量应足够（所以加浓盐酸酸为反应物，酸量应足够（所以加浓盐酸5ml5ml）。）。 砷斑不稳定，应立即观察。砷斑不稳定，应立即观察。 酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：还原还原AsAs5+5+为为AsAs3+3+，加快反应速度

45、；，加快反应速度；碘化钾被氧化生成的碘化钾被氧化生成的I I2 2又可被氯化亚锡还原为又可被氯化亚锡还原为I I- -，I I- -与反应中生成的与反应中生成的ZnZn2+2+能形成稳定的配位离能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；子，有利于生成砷化氢的反应不断进行； 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；氢气均匀而连续地发生；可抑制微量可抑制微量SbSb的干扰，在实验条件下，的干扰，在实验条件下，100 100 gSbgSb存在不干扰。存在不干扰。4. 4. 干扰及排除干扰及排除 供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代

46、硫酸供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加盐时，加HNOHNO3 3，使氧化成硫酸盐，以，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。 供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将液，将FeFe3+3+还原为还原为FeFe2+2+。如枸橼酸铁铵中砷。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。盐的检查。 具环状结构的有机药物，要先行有机破坏具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查后再进行检查。常用的有机破坏方法：常用的有机破坏方法：碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法酸破坏法：如葡萄糖中

47、砷盐的检查酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查 本法适用于不含本法适用于不含SbSb或含或含SbSb量小于量小于100100 g g的供的供试品。试品。 （二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDCAg-DDC）1. 1. 原理：原理：对照法对照法 3332AsHAsOHHClZn3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH33红色）砷化氢与砷化氢与Ag-DDCAg-DDC溶液作用，还原溶液作用，还原Ag-DDCAg-DDC为红为红色胶态银，直接比色或于色胶态银，直接比色或于510nm510nm波长处测定波长处测定吸收度，进行比较。吸收度，进行比较。AgAg（D

48、DCDDC）的结构）的结构C2H5C2H5NCSSAg 方法方法取一定量的供试品溶液（或取一定量的供试品溶液（或标准砷溶液标准砷溶液5.0ml5.0ml）置于瓶）置于瓶A A中，中，加盐酸加盐酸5ml5ml与水与水21ml21ml，再加碘化，再加碘化钾试液钾试液5ml5ml与酸性氯化锡试液与酸性氯化锡试液5 5滴，滴，在室温放置在室温放置10min10min后，加锌粒后，加锌粒2g2g，立即将导气管立即将导气管C C与与A A瓶密塞，使生瓶密塞，使生成的砷化氢气体导入盛有成的砷化氢气体导入盛有AgAg（DDCDDC）溶液）溶液5.0ml5.0ml的的D D管中，并管中，并将将A A瓶置瓶置25

49、254040o oC C水浴中，反应水浴中，反应45min45min后，取出后，取出D D管，添加三氯甲管，添加三氯甲烷至刻度，混匀。将供试溶液烷至刻度，混匀。将供试溶液D D管和对照溶液管和对照溶液D D管同置白色背景管同置白色背景上，自管上方向下观察比色。上，自管上方向下观察比色。 当当AsAs浓度为浓度为1 1gg10g/40ml10g/40ml范围内，线范围内，线性关系良好，显色在性关系良好，显色在2 2小时稳定，重现性好，小时稳定，重现性好，并可测得砷盐含量并可测得砷盐含量( (测测510nm510nm处吸光度处吸光度) )。 可用于砷盐的限量检查，也可用作微量砷可用于砷盐的限量检查

50、，也可用作微量砷盐的含量测定。盐的含量测定。 用有机碱吸收反应产生的用有机碱吸收反应产生的HDDCHDDC有利于反应有利于反应的进行（的进行（ChP-2005ChP-2005：用三乙胺）。：用三乙胺）。 本法适用于含本法适用于含SbSb量小于量小于500500 g g的供试品。的供试品。 注意事项注意事项 在药物的杂质检查中，其限量须严格在药物的杂质检查中，其限量须严格控制的是（）。控制的是（）。A. A. 氯化物氯化物 B. B. 硫酸盐硫酸盐C. C. 醋酸盐醋酸盐 D. D. 砷盐砷盐 E. E. 淀粉淀粉 自测题自测题 在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞

51、入醋酸铅棉花的目的是（）。醋酸铅棉花的目的是（）。A. A. 除去除去I I2 2 B. B. 除去除去AsHAsH3 3C. C. 除去除去H H2 2S S D. D. 除去除去HBrHBrE. E. 除去除去SbHSbH3 3 古蔡氏法中，古蔡氏法中，SnC1SnC12 2的作用有（）。的作用有（）。A. A. 使使AsAs5+5+AsAs3+3+ B. B. 除去除去H H2 2S SC. C. 除去除去I I2 2 D. D. 组成锌锡齐组成锌锡齐E. E. 除去其它杂质除去其它杂质 Ag-DDCAg-DDC法检查砷盐的原理为：砷化氢与法检查砷盐的原理为：砷化氢与Ag-DDCAg-D

52、DC吡啶作用，生成的物质是（）。吡啶作用，生成的物质是（）。A. A. 砷斑砷斑B. B. 锑斑锑斑 C. C. 胶态砷胶态砷D. D. 三氧化二砷三氧化二砷 E. E. 胶态银胶态银 中国药典收载的古蔡法检查砷盐的基本中国药典收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是（）。原理是（）。 与锌、酸作用生成与锌、酸作用生成H H2 2S S气体气体 与锌、酸作用生成与锌、酸作用生成AsHAsH3 3气体气体 产生的气体遇溴化汞试纸产生砷斑产生的气体遇溴化汞试纸产生砷斑 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小大小 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色

53、强度强度 用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时，用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时，排除下列干扰的方法为：硫化物（排除下列干扰的方法为：硫化物（ ）、）、亚硫酸盐（亚硫酸盐（ ）、硫代硫酸盐（）、硫代硫酸盐（ ）、高）、高铁盐（铁盐（ ）。）。 先用硝酸氧化先用硝酸氧化 先加酸性氯化亚锑还原先加酸性氯化亚锑还原 先加氰化钾掩蔽先加氰化钾掩蔽 先加草酸生成沉淀先加草酸生成沉淀AAAB Ag-DDCAg-DDC法检查砷盐时，所产生的红色溶法检查砷盐时，所产生的红色溶液为（）。液为（）。 HDDCHDDC吡啶溶液吡啶溶液 AgAg吡啶溶液吡啶溶液 AgAg的胶态溶液的胶态溶液 Ag(DDC)Ag(DDC)

54、溶液溶液 AsAgAsAg3 3溶液溶液 葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有（）。（）。 PbPb2+2+标准液标准液 SnClSnCl2 2试液试液 KIKI试液试液 ZnZn 醋酸铅棉花醋酸铅棉花 古蔡氏法检查所用的溶液是古蔡氏法检查所用的溶液是( )( )。 强碱性溶液强碱性溶液 强酸性溶液强酸性溶液 含稀盐酸含稀盐酸10ml/50ml10ml/50ml溶液溶液 含稀硝酸含稀硝酸10ml/50ml10ml/50ml溶液溶液 含强氧化剂含强氧化剂( (硝酸或过硫酸铵硝酸或过硫酸铵) )溶液溶液 下列杂质检查所用试液为：药物中铁盐检查下列杂质检查所用试液为：

55、药物中铁盐检查（ ）、磺胺嘧啶中重金属检查（）、磺胺嘧啶中重金属检查（ ）、药物）、药物中硫酸盐检查（中硫酸盐检查（ ）、葡萄糖中重金属检查）、葡萄糖中重金属检查（ ）、药物中氯化物检查（）、药物中氯化物检查（ ）。）。 硝酸银试液硝酸银试液 氯化钡试液氯化钡试液C.C.硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 D.D.硫化钠试液硫化钠试液E.E.硫氰酸盐试液硫氰酸盐试液AECBD 下列杂质检查中所用的酸分别是：氯化下列杂质检查中所用的酸分别是：氯化物检查法（物检查法（ ）、硫酸盐检查法（）、硫酸盐检查法（ ）、）、铁盐检查法（铁盐检查法（ ）、重金属检查法（）、重金属检查法（ ）和砷盐检查法（和砷盐检查

56、法（ ）。）。A. A. 稀硝酸稀硝酸 B. B. 稀盐酸稀盐酸 C. C. 硝酸硝酸 D. D. 盐酸盐酸 E. E. 醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液AEBDB检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质中混入的无机杂质( (金属氧化物或无机盐类金属氧化物或无机盐类) )。七、炽灼残渣检查法七、炽灼残渣检查法（控制非挥发性无机杂质）（控制非挥发性无机杂质） 原理原理样品炭化后样品炭化后 + H+ H2 2SOSO4 4湿润湿润700700800800炽灼至恒重炽灼至恒重炽灼残渣（硫酸灰炽灼残渣（硫酸灰分）分） 限量一般为限量一般为0.1%0.1%0.

57、2% 0.2% 2. 2. 操作方法操作方法%100(%)供试品重空坩埚重残渣及坩埚重炽灼残渣残渣（恒重）蒸气除尽至放冷至全部黑色、无烟雾，炽灼至恒重的坩埚样品高温灼烧湿润，直火加热直火缓缓加热8007004215 . 0SOHSOH42ml3. 3. 注意事项注意事项 供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。量误差决定。 若残渣需留作重金属检查，则若残渣需留作重金属检查，则500500600600炽灼至恒重。炽灼至恒重。 含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。埚。 加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，加硫酸处

58、理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化。并帮助有机物炭化。 炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为（）。为（）。A. 500A. 500600600B. 600B. 600700700C. 700C. 700800800D. 800D. 80010001000E. 1000E. 100012001200自测题自测题 炽灼残渣检查后，将残渣留作重金属炽灼残渣检查后，将残渣留作重金属检查时，炽灼温度应为（）。检查时，炽灼温度应为（）。A. 500A. 500600600B. 600B. 600700700C. 700C. 700800800D. 800D. 80

59、010001000E. 1000E. 100012001200 炽灼残渣的限量一般为（）。炽灼残渣的限量一般为（）。A. 1A. 1B. 0.5B. 0.51 1C. 0.4C. 0.40.50.5D. 0.2D. 0.20.30.3E. 0.1E. 0.10.20.2 炽灼残渣检查时，炭化后经硫酸处理炽灼残渣检查时，炭化后经硫酸处理后灰化至完全的称为（）。后灰化至完全的称为（）。A. A. 灰分灰分B. B. 残渣残渣C. C. 硫酸灰分硫酸灰分D. D. 炽灼灰分炽灼灰分E. E. 残余灰分残余灰分八、溶液颜色检查法八、溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质限量的方法。控制药物中有色杂质限量的

60、方法。Ch.P Ch.P 20052005采用以下三种方法检查：采用以下三种方法检查：n分光光度法分光光度法n目视比色法目视比色法n色差计法色差计法观察方法观察方法: : 颜色较深时平视颜色较浅时从上向下 第一法第一法 目视比色法目视比色法即与标准比色液比较的方法，全波长范即与标准比色液比较的方法，全波长范围定性观察。围定性观察。标准比色液的配制标准比色液的配制: : 个色号标准比色液种色调种色调标准贮备液溶液、不同量水稀释不同比例5055CuSOCoClOCrK42722第二法第二法 分光光度法分光光度法 通过控制药物溶液在某波长处的吸光度通过控制药物溶液在某波长处的吸光度来检查药物溶液的颜