2生物安全评估和管理

1、2. 生物安全评估和管理在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部名录组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可，并归档保存。生物安全负责人最终对实验室内的安全负责，其职责之一是指导现行工作以判断潜在的危害（生物安全评估），职责之二是实验开始前采用合适的安全程序（风险管理）。特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。风险评估和风险管理的5个“P”是指：u Pathog

2、en 病原体 危险的生物因子u Procedures 规程 推荐的实验操作和安全的操作规范u Personnel 人员 相应的培训与技能u Protective equipment 防护设备 防护衣和安全设备u Place 地点 实验室所在位置实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的5个“P”。正确地指导和风险评估能帮助免受生物危害的暴露，以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。2.1 风险评估和风险管理表风险评估风险管理病原体u 传染因子类型 (见附录A)u 感染途径u 感染性疾病发生过程病毒性、致病性、数量、浓度、人群中影响程度、昆虫媒介的存在u 登记n 生物安全办公室n 感染机构

3、n 约束机构n 疾控中心 选择机构规程u 气溶胶风险：超声、离心 、混匀、混合、振动u 经皮风险: 针头、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低温刀片/刀等u 飞溅/溅泼风险: 吸液管、接种环u 建立一套结合安全使用的标准操作规程u 遵守基本的生物安全规则u 实验室、工作区域、 BSL-2或更高传染因子实验室内的设备贴上标识u 指导实验室操作和检查实验设备u 用非传染性材料做尝试性试验，以测试新的规程/设备人员u 人员免疫n 赘生物疾病n 感染n 免疫抑制治疗n 年龄、种族、性别、妊娠n 手术 (脾、胃切除)u 免疫力u 后暴露预防u 血清库u 对安全的态度u 安慰u 外伤、破损皮肤、湿疹、皮炎u 安

4、全培训u 以前从事生物危害的经历u 技术的熟练程度u 立即向生物安全负责人和生物安全办公室报告所有的暴露事件、被忽视的事件以及相关疾病的症状u 调查/核实事件/飞溅等，以防止再次发生防护设备u 防护：l 气溶胶-可以吸入粒子直径5ml 飞溅/溅泼l 锐器u 个人防护设备 (PPE):u 口罩 HEPA, N-99, N-95,等u 面部（眼、鼻、嘴）防护-面具和安全眼镜、或盖住下颌的面罩、前面无缝外衣或实验室外衣u 手套u 生物安全柜u 安全离心管/转子地点u 风险组/生物安全等级、设备u 气溶胶风险u 受限制的过道u 基本的实验室-门、易清洁的地方、冲眼器、窗户u 标签u 用直接气流预防2.

5、2 暴露途径生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤），当生物危害物进入人体，它产生疾病还需满足其它条件，它们必须在人体细胞、组织和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。年龄、免疫状况、职业、物理或地理环境等因素会导致个体对疾病的不同易感性。在涉及生物危害时，确定其最低感染量是很困难的。同一病原体相同剂量在一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。暴露途径的更多信息见下图。感染因子的传播途径

6、黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜Mucous Membranes:吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟Exposures to mucous membranes of the eyes, nose and mouth through splashes or splatters.Ingestion:Mouth pipetting, eating, drinking, smoking in the lab.吸入：吸入气溶胶粒子 (直径5m), 离心渗漏物、溢出物、吸液等Inhalation:Breathing in respirable sized aerosols (5m), cen

7、trifuge leaks, spills, pipetting, etc.经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹Percutaneous:Through intact or non-intact skin via needlestick, puncture with contaminated sharp object, animal scratch or bite, through wounds abrasions, or eczema.接触 (间接传播):通过接触污染面（如凳子、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底Contact (in

8、direct transmission):Via mucous membranes or nonintact skin from hands that have been in contact with a contaminated surface (i.e. benches, phones, 实验室内传染因子的传播途径 暴露途径 防护措施黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜通过以下方式进行面部的预防：u 戴护眼镜或面罩u 在生物安全柜内或保护罩后工作u 进行规范的微生物操作吸入：由于离心渗漏、溢出或产生气溶胶的操作如吸液、混匀等而吸入了可吸入的气溶胶粒子 (直径5m)。 通过以下方式避

9、免暴露气溶胶： u 在生物安全柜内工作u 离心时使用密封转子或杯u 进行规范的微生物操作吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟通过以下方式防止经吞咽产生的暴露：u 不在实验室内吃、喝或吸烟u 始终使用手工吸液u 进行规范的微生物操作经皮:被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹通过以下方式防止皮肤破损：u 用塑料制品代替玻璃制品u 使用锐器要非常小心u 用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内u 适当限制动物u 戴不易划破的手套、袖套、u 用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套接触 (间接传播):通过接触污染面（如凳、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底。

10、通过以下方式防止间接暴露：u 工作台面消毒u 工作后、脱去手套后总是洗手。u 不要用戴手套或不戴手套的手触摸脸部（良好的个人习惯）u 实验室内不使用化妆品。在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度：u 不在实验室内吃、喝或吸烟u 工作结束后或脱去手套后总是洗手u 实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备u 不用口吸、始终用手工吸液u 使用锐器格外小心u 用合适的设备抑制气溶胶的产生u 对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒2.3 生物安全等级国家和卫生部对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合使用，以及所选的

11、感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。以下是1-4级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括。 所推荐的生物安全等级与相应感染因子生物安全等级感染因子规 程安全设备（第一道屏障）实验室设备（第二道屏障）BSL-1已知对健康成人 和动物不造成疾病。标准微生物操作。不需要。u 开放工作台。u 防止节肢动物和啮齿动物进入。u 实验室靠近出口处有洗手池。u 实验室的窗户有纱窗。u 适当的消毒设备。BSL-2能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。BSL

12、-1操作加：u 限制进入u 生物危害警示标记u 锐器谨慎使用u 制定安全手册，确定所有废物消毒和医疗监督计划I 级or II级生物安全柜或其它物理防护设备，这些设备应用于可能会产生飞溅或气溶胶的感染因子的操作；个人防护设备：外套、手套、所需要的面部防护BSL-1加：u 实验室门应带锁并可自动关闭。u 应设洗眼设施、高压灭菌锅。BSL-3能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。BSL-2操作加：u 控制进入u 所有废弃物消毒u 实验室衣服洗之前对其进行消毒II级（B2）或级生物安全柜和用于所有感染因子操作的其它物理防护设

13、备；个人防护设备：防护衣、手套、需要的呼吸道防护。清洁区设置淋浴装置。BSL-2加：u 自成隔离区，进入实验室的过道用物理方式隔开。u 入口处采用自动关闭双层门。u 独立的送排风系统，空气排至室外，不在室内循环。u 实验室负压u 实验室污染区内设不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器。BSL-4能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与 动物之间传播的病原体。BSL-3操作加：u 进入实验室前更衣u 出口处冲淋u 所有材料在出口处消毒按照级生物安全的所有步骤进行，全身穿上有空气供应系统、正压个人防护衣。BSL-3加：u 远离建筑物或单独的

14、区域u 安装供应、排放真空系统u BMBL上的其它需求根据国家标准GB 19489-2004实验室生物安全通用要求编制生物安全评估目前实验室内开展的病原体检测的范围为：病毒名称危害程度分类未经培养的感染材料的操作英文名中文名分类学地位Hepatitis A virus甲型肝炎病毒小RNA病毒科第三类BSL-2Hepatitis B virus乙型肝炎病毒嗜肝DNA病毒科第三类BSL-2Hepatitis C virus丙型肝炎病毒黄病毒科第三类BSL-2Hepatitis D virus丁型肝炎病毒卫星病毒第三类BSL-2Hepatitis E virus戊型肝炎病毒嵌杯病毒科第三类BSL-2

15、序号病原菌名称危害程度分类样本检测所需生物安全实验室级别学名中文名1.Mycobacterium bovis牛型分枝杆菌第二类BSL-22.Mycobacterium tuberculosis结核分枝杆菌第二类BSL-23.Vibrio cholerae霍乱弧菌第二类BSL-24.Staphylococcus spp葡萄球菌属第三类BSL-25.Streptococcus spp链球菌属第三类BSL-26.Enterococcus spp肠球菌属第三类BSL-27.Micrococcus spp微球菌属第三类BSL-28.Moraxella spp莫拉菌属第三类BSL-29.Neisseria

16、 spp奈瑟菌属第三类BSL-210.Corynebacterium spp棒状杆菌属第三类BSL-211.Bacillus spp芽胞杆菌属第三类BSL-212.Listeria spp李斯特菌属第三类BSL-213.Erysipelothrix spp丹毒丝菌属第三类BSL-214.Rhodococcus equi马红球菌第三类BSL-215.Nocardia spp诺卡菌属第三类BSL-216.Eikenella corrodens啮蚀艾肯菌第三类BSL-217.Enterobacteriaceae肠杆菌科第三类BSL-218.Vibrio spp弧菌属（除霍乱弧菌）第三类BSL-219

17、.Aeromonas spp气单胞菌属第三类BSL-220.Plesiomonas spp邻单胞菌属第三类BSL-221.Pseudomonas spp假单胞菌属第三类BSL-222.Acinetobacter spp不动杆菌属第三类BSL-223.Flavobacterium spp黄杆菌属第三类BSL-224.Haemophilus spp嗜血菌属第三类BSL-225.Pasteurella spp巴斯德菌属第三类BSL-226.Gardnerella spp加德纳菌属第三类BSL-227.Legionella pneumophila嗜肺军团菌第三类BSL-228.Campylobacte

18、r spp弯曲菌属第三类BSL-229.Helicobacter spp螺杆菌属第三类BSL-230.Clostridium spp梭菌属第三类BSL-231.Bacteroides spp拟杆菌属第三类BSL-232.Fusobacterium spp梭杆菌属第三类BSL-233.Peptostreptococcus anaerobius厌氧消化链球菌第三类BSL-234.Actinomadura spp放线菌属第三类BSL-235.Arcanobacterium spp隐秘杆菌属第三类BSL-236.Chlamydia pneumoniae肺炎衣原体第三类BSL-237.Mycoplasma