不同灭活条件对新型冠状病毒qPCR检测结果的影响.docx

1、B胜旧团彻离阊蹴艘蚣册瞬【摘要目的探讨不同灭活温度、时间对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）实时荧光定量案合酶链反应（qPCR）核酸检令麻曲方搂蛆*f醐诲曲城卿雄暨我公旅缺鞅临颉质独雄藤新如翩fe角策曲盏建硼j囹夹滴为武;岭核酸的哦游口拥1豚比较布间灭活策件的核检弘明均循环斌膻妫Wh窿thrtsofa.dT）d采用不同温结果寸，甘赫柘枷钮祀炙潜姓噬相蜒杭燃叔掩而放而漏翎她JM）酶检洌-布浙她阁补原加MgW的hnld灰宿篇黑PGR拓增?FU&QS值君躲宠时用憾成（P涮15i）u顾检S、命商。的而的例谕&的小天活固的标本4丽缺检测1未思哪常军辱诒均（璋墟磴辞的以卅事枣落姗麒高到Q5木湘/mbhi

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3、为太扇魂-怠oLW同啪英柄母曲绑薪甫解炎心疾病重新命竹为冠状病毒性疾满到必的的时乱踌偷名为“SARS-CoV-2”,同时,WHO也将“新冠肺炎“疾嗨斑黝伽件2传染性强湖悌谪学调查发现l而症状感染者也可成为传染源，传播途径包括飞沫、我视礼摩功璃曝,勘群葡洞景辱输遮掘成网髅必渔漪知麴麋料转腕町囹辄沫、目蔽翘廊朔斡.耦版Bq啷陵醪果制胎一嗽呀瞬测m髀%?%9融查*宓1瞬扉曜串长时尚票参芋嵩浓度汽落般懵斯牛荏缨仆和诊断COVID-19的重要手段。新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版）新增：“在相对封闭的尚融做g牒.通讯作者陈英剑Emailyjqchcn作者单位250031山东济南.料放军第960医院检

4、验科（吴艳花.刘晓斐，包慧.陈英剑）通讯作者陈英剑,Email:yjqchen气溶胶传播的可能，说明实验室检测人员处于高蹙褓胰瞻括周可理歹宥睁瞬虐;，帛朗实蟹窘年潸麝髓嬲I都新.郴彳蜓舌件滞实翻棘我WSilHtlBW-F1翌晚醵崇耆斜霸就蟠施催甜品。古逸雄翔奴械废塑詹伊蟾囊如事芯诳机度剁芬锢M瀚毒衲s/4熙寿株1映株）地彳乎灭活，研究发现楠初詹亦而r妁构慰果性的宛活率为必街晚海|们5溯俪橱slAMs感染性的网静为你宛质现顼是必60】的E阱源能他俩宓涌病毒、癖遇延长灭活时间而幽增为味活魏春陈启前陵验羸揄测标相急麒大房样衲8水浦滴筑泳辩耕坤建烤摘厢府衩常,漠箱薮簟不物险呻澄球咿呻醴响蜒度织&病蜒翰

5、i某看魏飕:啪倒馥螭盟峪兼高跟融阍恻物牝饨勘陶城繇襁硼蟾c榷:徐苗提蒿灾活匾匿獭缺涌岫摭膺蒿V避满毒核酸检测结栗的影耐关脸设计r不同的火活温度、时间条件，比较不同火活条件核酸扩增CT值，探讨提高灭活温度、延长灭活时间对SARS-CoV-2病毒核酸检测结果的影响。H资料与宠法小，藤系与蝴喉集送辕金等者侏院例旅型屈林痛鬻廖睡薪褊仰牌耕布晒昔V徐南束岬苧匕围11袜秦醐W浦雅8#玲8骚8珞酬麟瘤霞I瑛瓣湖愿件零醐车曲或虐样管）。PCR扩增仪RocheLightCycler480LQ芬强实验人员严格按照国家卫生健康委办斯翌n雄粉佥篁翻鲤毓办徨*麒娜巽膈狒陶暇腿城嚣点艘蚤0呆搭啬彳第驾前州雄卖装窿祚箱望物

6、妾细晚二版）相关文件进行实验操作和生物安全防2.1标本处理及灭活条件（干浴温度、时间）12标;海涵威壁傍浦俺匿申）每璧枷A编部n，劾纹由布祖ii.页活祥也W）祯抛响除M嘻蛹/B粘扁n您沸西务儡城担捅&西65250（）W小翊65,曾弟制彳如兔傩*5输帝&翎5拓制布虺盛毛*1仰球点）75常iA询95廖吊席时伽乎妈褊时nun；95Tt0n您毓j敢系响PC度成：30（而提取，按照上述辄件对标本道特爽洒处曜屈使用硕世超物新冠核酸提取试剂本班格按照诚剂说明1鼬饬聊物融1取核酸提取扶蹭。固曲硕世生岫冠核酸检测敞剂（2。2卯哪）,縻应体廓使粗以麻璨牌原癖海膈以刊布洞命海）附甑翠融麻翻2印R屎麟财机仁毒阱疑呢I

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8、圾图h明冷响伽海旗而喝9丽项清扁的林未舵翎秦硼咐曲壅SARS-CoV-2感,染的肺炎传染燃强、I床表现多样、谕*矗瓷1曹腐耕翼麒霜*塞鹿章瘢敞峰膝治速早裾都或藉荐展成版4讷踌握由弗垢量金!晦第独期就谖雷息蛔愤修明篥曲技光礴衣旅检测质崖蹶祷染的性的髭雯手案中实时荧光RT-PCR检测仍是感染确诊的为字保既实验室生物安全，杜绝SARS-CoV-2病毒夜实验座传播的丽能胜令藕妍始首先采取聊E祯咖耳无活病愈ii粗对封翎的虾棒兜杭瞰阕暴霞布鬲沼毓赣瞬情秘所有奔税俑海膀侑辑的耐熊履声淳船障勉照鹿府愤李W：I凝落容裤俾席悟箱峪融懂斜设翻畿林榆格思度嵩华牖实雀蕃命撞鼓护塔结巢辑策影蛾商垠由锢筑凿规卖疆人贾尊艘为

9、备为巡窟趋缈批疯标奉同时进彳为天活道程暇很有可锥由罗的间鼬蒲当导致灭活阈倾遂长员一般为2人，通常是多批次标本笔者曜用而同温度心b物654能T15XIM,延长炎活时间搜间巩啊顿E0min）,保证病毒充分灭活,比较歪衲静烤而飕翱如掂增羯果，（濮星会析宿梆h信眇仍湘徐盛薜桐柘糅h陶海袒赚9论我刷林澎5肿脂梆微础稗修,猝篥辱臆瓣f裕盼富没料姑嫌湖离痼时间56X60min/90min65X60min/9Q.舛in孩酸56（赖j豌能酸提蛛尚，瞬盗甲奶她输惭滞荐芮信耕5湍场梭椒扩臂依傀蜥响免鲫遒手弧布审通驼蛹唐咳酸横痂辟偿通过龄潮寸潮拓向射按敝湖扩增，该实验中95C5min/10min/15min/30mi

10、n均未见核酸扩增，说明95弋灭活不适于SARS-CoV-2病毒核酸检测。笔者通过对不同时间、不同时K的火活表1不同疝缺qPCB检测结果（CT值，：）冒成:CT:指环N标伸娜徂廉-灭活条件12349h?Hr1觥灿和钥M：81将明蜥*3317：48华3谢1N37：史7：179免99希.捋第耕招跄时胴脚第明18：12耳明难.褪Nni箝明眦郭:韵弗:勇婀胴昇0138：11耕:能卵:的装:径mi3却辎:明算射稔衍37J0卵所4A阶灿跄的独刊?：y界前.粕牌粕郁粕耐4N.装36J1.柚别笄:邕.粕:现14萸:明珀由2冲灿狐就娜而1将:韵M3挪粕:臾巍明捅羽稔奖6砌财球抑窕:匏犯.科6N我俩瞬9奸观37：4

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12、拊:药病毒进行核酸提取效果的检测，证实了适当延长灭活娜嵋就警戡躺衫翊鼬赢1富膈酬蜩睡蝌舞时曾臆魂册效塞姆副映诡碱醐皈僵制火釉翎悦3寸陵翳赧柚瓣漕象释磨申禅铮液翎蜉建洗匠厕凶狼基偷朔洪毒绿真菌拭世会曲演!曲分您冻保抽有床液物缱冲翔阂癫怠酸!.【油I而炒基础B上,添加阳央倒即睇篓痫毒横定成叙可在Hn冠的温度范围内纳持惭龈悒解保痞禳危艘涛,腐:样房僻德财阑阿嘟跻愉蒂M?鞘燃Wt漫标都饵嘛利翎闷叫氏XI岳滉席案陶隔藤碱懿潮癖衲格辩晰销耗在-定温度总之，该实验提示在今后的实验中，适当提高灭活福赢疆K灭活时间不影响S/RS-CoV-2病毒核酸检测梭源究的不足之处在于：临床病例有限仅采取切店部岛咨慝智四扁娘

13、闹稣诲J以成将标本例帼醐俺厨手标I砌陶的藤床是否有胎峋尚需断峻验硕，仇逖次谕验娅由芥吴神府家的检删试剂？硕世隹物卫wtai踮抢该批显试剂题内豢糖野泗蒯割?家枪涮嶙剂撕械怜验诚因（,41魅融提醐纳徭鲫脚t格诺学菠壬菟胰瘁濯成朝瑞蔡瓣带砸槊用的吸附柱法，对卜常用的磁珠提取方法有无魅而映啊页）范围内进行病毒灭活时提高病毒核酸的可检出量。（下转第56页）仰募金花.一商翻&瘁思者墨靡帼寺胤？梆推蜓酬翊|如).剥忡期申aw熟知威遍我岛皱.%-Wil瞬餐蓟啤:W?辎酬.11丰瞬.翊吏嘴*#4澈麟翎窗眇WI骤WWOOWr新瓠情舞3徵:112-113.较J.检验医学与临床.2017.14(12):1X28-18

14、30.邸.骅慨;婚笄翔g;,筹光胪法现册板波裁作并使廨小蛆相森纂梭寝涛敕蔺行警辑窘用1现嫌罪暖赛争莉醐蹶礼39-4、(14)坐金路y析高血脂症对I临床生化检验造成的干扰和消除策甫融中苗医醐蜘他圈耕是辆的干扰和消除策(isi翳莒割晋翳黜iff埋或薜骚熟患者结构脂肪，5犒伟履螭醐蕴I峰舟制抑螂华曜耕佃,目耕糊婷I的使用分析:JL中国临床药理学杂志.20202蚀七面收稿7必凶仲_12修回本文编辑苗冰媛2020-08-14收稿.2020-09-12修回本文编辑：黄冰媛(上接第52页)(上接第52页)鉴者立献IHUANGC,WANG斧,L【孝,ei%.nicalfeaturesofpatientsinf

15、ectedwith2019novelcoronavirusinWuhan,ChinaJ.Lan-1HUANGC,WANGY.LIX,eial.Clinicalfeaturesofpatientscel,2020,395(10223):497-506.2)噩里星模妹戮&蜉J般年幽禅眺味罢壑器也福嘏雷曷策樱弄告叙云普第五版)S/OL(2020-02-04).隔其雄制感艇的zy原祝麟湿耐输淼0液麴护瓯南蜘翔断形涂孺百案(试行第五版S/0L.(2020-02-04.国亚丝浏职.周文由/察暗触级翱瞒妙缺R蜥怆城捌知帘泌榭住戏晰控措施J医药导报,2020,39(3):334-33亚兰，刘聪.周文正.等.新

16、型冠状病毒肺炎与SARS和MEKS国家丑生健位震办公瘁国家中医药管理病办1S南期型冠状病寄感染的肺炎诊疗方案(试行第六版)S/OL(2020-02-19)同旅卫：4咐顺吟敏破gy初喊团6龄0期冲毋加知鬃*潇1料成我幡极硼膳专醐刑知试行第六版)8/01.(2020-02-19)制漆点瞬点乾箫西屈蒂厚瘢勰湖槌浦床腐翳浪乾棉觌物皿借南预防医学，2加,29(3):61-62.协推命部原咿野稀瞧臆蜓豁岳性灭活效果的研究J.华南预防医学,2003.29(3):61-62.(31314)516中华人民共和国国家卫生健康委员会国家卫生健康委办公厅,科技教育司办公室.关于印发新型冠状病毒实验室生物安全指，：(郴

17、艘呻勰胸酬拔哪哄肾。P：技术指南(第三版)S/OL.(2020-()1-28).http/.撷脚戏勰初3成麝燃赚勰却番繇毓测(8|戒械兜而膺部制*氏褊2渤峪潞嗽懿勰褊源碾(麟7湍嗑蝉潟7物辎澈陶觑!1融糖雄擀由曲n,&GMh.C购杖，业既浏江做祚jgitalizcdpatientswith2019NovelCoronavinisinfected赖嫂媛性蜜婷喝家晚:峰叫Al对划M老跚翊应噗蜘皇顾及实验室生物安全防护J-检验医学,2020,35(3):278-魏堤蝮，王宇婷，陈宗倪.等.SARS-Co-2病原学特点、实验宗园家朦谜明徐丹湘警演i型冠状满馨核酸程测福保实验室Ti

18、Oi7(919(1012操作规范的建议J_中华检验医学杂志,2020,43(3):209-10基女清.汪明，徐万洲，等.新型冠状病毒核酸检测临床实验室2020腰衅收做即2(不)7,2修叵也E学杂4奎岐呻i王爨队:2020-06-14收稿.2020-07-12修回本文编辑：王军红7FEE1：杨小平澹丽,王彦龙，等.-非酒精性B翩她月瞬盾险固蒸其慕临界蹄析娅女如峻。页）T11：王丰焦，殊军.瞬时弹性成像技术眯含/WWI对肝硬佬食管翰脉映枷懈iWWfiS宓3.橙顽）1:膀9：?.B1!ISM、APRI及ISM+APRI对EV预测的ROC曲线标.蓼惠狷炎祎耕梆飕菸腐淤楠联哪卿吊寮岑舞街A1A2A3M3A7A8A1A2A3M3A7A8.46&H1214|G1S2(|22mCyclesCvcMiE；主。yg为不同灭活条件A图TJCRFklb基因