Rh血型鉴定操作规程

1、.对象：全院职工医疗药事制度文件名称： Rh （ D）血型鉴定编写日期： 2014.1修订日期： 2017.4执行日期： 2017.4注：本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印本文件最终解释权归输血科1 / 4.Rh （ D ）血型鉴定【原理】 Rh 血型系统是输血医学中仅次于ABO 系统的第二大血型系统。Rh 血型系统常见的抗原有D 和 C、c、E、e 五种，分别由RHD 基因和 RHCE 基因编码， RhD 和 RhCE 蛋白均是反复穿膜的蛋白质。使用相应的抗D、抗 C、抗 c、抗 E、抗 e 五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D 抗原是 Rh 抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有

2、临床意义的抗原，一般只做D 抗原鉴定， 凡带有 D 抗原者称为Rh 阳性，不带 D 抗原者称为Rh 阴性。1.试管法【样本】 抗凝或不抗凝的样本均可用于 Rh 鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。【试剂】（ 1） IgM 抗 D 试剂（ 2） Rh 对照试剂【操作】（ 1）加 1 滴抗 D 到一洁净试管，并做好标记（ 2）加 1 滴 Rh 对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记（ 3）分别加 1 滴 2% 5% 红细胞悬液到每支试管中（ 4）轻轻混匀，通常（ 900 100 ）×g 离心 15 秒（ 5）轻轻重悬细胞扣，检查凝集（ 6）评价反应强

3、度，记录试验管和对照管得试验结果【结果判定】（ 1）抗 D 管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD 阳性（ 2）对照管和抗D 管均阴性，说明待测红细胞是RhD 阴性结果（ 3）对照管凝集则试验无效2.玻片法2 / 4.【样本】 用玻片法进行RhD 定型时，待检红细胞悬液的浓度是40% 50%【试剂】 适合用于玻片法的低蛋白抗D 试剂【操作】（ 1）加 1 滴抗 D 到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记（ 2）加 1 滴适合的对照试剂到另一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记（ 3）向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1 滴混匀的 40% 50% 待检红细胞悬液（ 4）充分混合抗

4、体试剂和细胞，用搅拌棒将混合物均匀分散（ 5）不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2 分钟（ 6）读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果【结果判定】（ 1）抗 D 试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD 阳性（ 2）抗 D 试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD 阴性（ 3）对照管凝集则试验无效【注意事项】 玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于检测弱D 表型3.柱凝集法【样本】同玻片法和试管法【试剂】已加入抗D 试剂的柱凝集血型卡【操作】（ 1）配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液.通常配制为0.8% 1.0% 浓度。（ 2）在专用微柱凝集卡的RhD 检测管中加入样本红细胞悬液50ul（ 3）在专用血型血清学用离心机内离心（ 4）判读并记录凝集反应结果【结果判定】根据红细胞在凝胶柱内的反应情况解释凝集强度