发酵饲料对断奶仔猪肠道肠黏膜形态的影响

1、发酵饲料对断奶仔猪肠道肠黏膜形态的影响摘要：本试验旨在研究发酵饲料对断奶仔猪肠道肠黏膜形态学的影响。将27头平均体重683kg的28日龄断奶仔猪分为3个处理。即试验I组(正对照组，含基础日粮)、试验组(负对照组，含基础日粮+20%的过夜水)、试验组(负对照组，含基础日粮+菌液+20%过夜水)。试验结果表明：水拌发酵组和菌液发酵组的空肠、盲肠和结肠的绒毛高度显著高于对照组(p<005)，菌液发酵组十二指肠和空肠的隐窝深度显著低于水拌组和干粉组 (p<005)，发酵组的V/C值也显著高于其它两组(p<005)，水拌发酵组和菌液发酵组的空肠、回肠和结肠的黏膜厚度也显著高于对照组(p

2、<005)。发酵饲料可改善断奶仔猪肠黏膜的形态结构，有助于减少仔猪腹泻和增强仔猪对营养物质的消化吸收能力。关键词：发酵饲料；肠黏膜；形态；断奶仔猪随着养猪生产集约化程度的不断提高。仔猪早期断奶变得越来越重要。但早期离乳易造成仔猪肠道功能紊乱，仔猪肠道绒毛高度下降，隐窝深度加深，因而造成仔猪消化道消化吸收的面积减少，进而影响生长性能（徐春兰等，2004），诱发“仔猪断奶应激综合症”（郑秋锋，2002）。而发酵饲料是以饲料为基础物质，添加有益微生物使其大量繁殖，先进行体外消化，分解饲料中的抗营养物质，当动物采食后，营养物质得到充分吸收，有益微生物又可定殖在肠道中，从而改善仔猪的肠道结构，弥补

3、了早期断奶带来的缺点。1材料与方法1.1实验材料 发酵用菌液成分：含有乳酸菌、枯草芽孢杆菌。总均数5×1010CFU/g，菌液和基础日粮均由沈阳爱特杰牧业有限公司提供。1.2试验动物和日粮配制 选用28日龄美系大白和长白断奶仔猪27头，按体重相近原则随机分为3个处理，每个处理3个重复，每个重复3头仔猪。试验I组即正对照组(PD)，含有基础日粮；试验组即负对照组(ND)，含有基础日粮+20%过夜水；试验组为负对照组(ND+P)，含基础日粮+20%过夜水+ 菌液。基础日粮组成见表1。预饲为7天，试验期为15天。仔猪采用分栏饲养。自由采食和饮水。猪舍温度保持在28左右。仔猪由沈阳市畜牧兽医

4、科学研究所种猪场提供。表1 日粮组成及营养成分 %原料比例营养水平玉米50.00%消化能14.25MJ/kg膨化玉米10.00%粗蛋白质CP(%)17.80%去皮豆粕16.00%钙Ca(%)0.80%膨化大豆粉5.00%有效磷Ap(%)0.48%优质进口鱼粉5.00%赖氨酸Lys(%)1.15%石粉0.75%蛋+胱氨酸Met+Cys(%)0.68%磷酸氢钙CaHPO41.20%苏氨酸Thr(%)0.81%食盐NaCl0.25%酸化剂0.30%蔗糖3.50%乳清粉3.00%玉米油1.00%复合预混料4.00%总计100.00%注：预混料为饲粮提供（mg/kg）:A,11500IU；D3 2800

5、IU；E 60； K33.5；B12.5；B26.5，B63mg/kg，B120.04，烟酸30，泛酸15，叶酸1.5，生物素0.2，铜180，铁120，锌120，锰45，碘0.4，硒0.25。Note: premix for the diet provided (mg / kg): A, 11500IU; D3 2800IU; E 60; K33.5; B12.5; B26.5, B63mg/kg, B120.04, niacin 30, pantothenic acid 15, folic acid 1.5, biotin 0.2, copper 180, iron 120, zinc 1

6、20, manganese 45, iodine 0.4, selenium 0.25.1.3检测指标 十二指肠、空肠、回肠和盲肠组织结构：迅速截取十二指肠(端部)、空肠(胆总管入口远端10cm)、回肠(盲肠交界处近端l0cm)各1cm及盲肠盲端l cm。放入10%中性福尔马林溶液中固定，经洗脱、透明、浸腊、包埋等处理后在室温下切成5µm的切片，HE染色。在光学显微镜下选5个典型视野(绒毛完整，走向平直)，用目镜测微尺测量每个视野中绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度，并计算绒毛高度与隐窝深度的比值。1.4数据分析 将试验所测得的各项数据进行处理，数据整理及作图（使用Excel2003软件）

7、，试验结果用SPSS13.0统计软件进行方差分析和邓肯氏法进行多重比较。试验数据采用平均值±标准误表示。2结果与分析2.1发酵饲料对早期断奶仔猪肠道绒毛高度影响 从表2可以看出，对于十二指肠绒毛高度，各组间差异不显著(P>005)。对于空肠的绒毛高度组、组比I组分别增加了8.1%、14.48%，差异显著(P<005)；对于回肠的绒毛高度组比I组增加了8.6%，差异显著(P<005)；对于盲肠的绒毛高度组、组比I组分别增加了18.53%、47.57%，差异显著(P<005)；对于结肠的绒毛高度组、组比I组分别增加了36.33%、53.95%，差异显著(P<

8、005)。表2发酵饲料对断奶仔猪肠绒毛高度影响项目I组组组十二指肠293.41±1.88307.31±9.26289.73±7.89空肠379.41±13.01a410.08±1.00b434.33±7.96b回肠399.95±5.33a416.41±5.76ab434.33±7.96b盲肠439.70±7.83a521.19±10.51b648.85±29.42c结肠441.06±23.18a601.29±31.86b679.01±8.77b注

9、：同行数据肩注完全不同表示差异显著 (p<0.05)。 I组 空肠组 空肠10×10倍光镜下 组 空肠 10×10倍光镜下表3发酵饲料对断奶仔猪肠隐窝深度影响项目I组组组十二指肠186.20±3.74b246.02±0.56c154.67±3.74a空肠187.16±2.25b200.37±9.30b163.95±1.24a回肠221.45±6.19240.28±6.14215.39±10.00注：同行数据肩注完全不同表示差异显著 (p<0.05)。2.2发酵饲料对早期断奶

10、仔猪肠道隐窝深度影响 从表3中可以看出，对于十二指肠的隐窝深度I组、组和组间差异显著(P<005)；对于空肠的隐窝深度组比I组、组分别低12.4%、18.18%，差异显著(P<005)；对于回肠的隐窝深度各组间差异不显著(P>005)。2.3绒毛高度与隐窝深度比值的比较 从表4可以看出，对于十二指肠的V/C值，各组间差异显著(P<005)；对于空肠的V/C值组比I组、组分别提高了31.84%、28.64%，差异显著(P<005)；对于回肠的V/C值，各组间差异不显著(P>005)。表4 绒毛与隐窝深度比值的比较o项目I组组组十二指肠1.58±0.0

11、4b1.25±0.04a1.88±0.09c空肠2.01±0.08a2.06±0.09a2.65±0.04b回肠1.80±0.031.74±0.072.03±0.13注：同行数据肩注完全不同表示差异显著 (p<0.05)。2.4发酵饲料对早期断奶仔猪肠道黏膜厚度影响 从表5中可以看出，对于十二指肠的黏膜厚度，各组间差异不显著(P>005)；对于空肠的黏膜厚度，组和组比I组分别提高了50.18%、53.64%，差异显著(P<005)；对于回肠的黏膜厚度，组和组比I组分别提高了18.30%、15.01

12、%，差异显著(P<005)；对于盲肠的黏膜厚度，各组间差异不显著(P>005)；对于结肠的黏膜厚度，组和组比I组分别提高了12.73%、14.59%，差异显著(P<005)。表5发酵饲料对断奶仔猪肠黏膜厚度的影响项目I组组组十二指肠833.53±5.02851.31±4.07840.76±7.26空肠651.24±16.48a978.01±12.26b1000.56±7.16b回肠669.98±12.83a792.59±17.89b770.54±17.58b盲肠600.81±2

13、2.97598.01±2.07622.74±3.09结肠590.96±6.23a666.20±2.07b677.16±2.36b注：同行数据肩注完全不同表示差异显著 (p<0.05)。3讨论3.1发酵饲料对早期断奶仔猪绒毛高度的影响 小肠绒毛是断奶仔猪养分吸收的主要部位，绒毛形态的变化可导致绒毛表面积的改变，影响营养物质的吸收。Caspary(1992)报道绒毛高度增加后会使小肠接触营养物质的面积增大，从而增强小肠对营养物质的吸收，所以肠绒毛的形态直接和机体的生长发育有关。肠黏膜表面有无数绒毛(长度约为300500µm)，因而极

14、大地增加了营养物质的吸收面积。Hampson(1986)、顾宪红等(1999)报道，仔猪断奶后肠道黏膜萎缩、上皮绒毛变短、隐窝变深。R. H. Scholten等（2002）在断奶仔猪饲料中添加发酵小麦，结果表明，饲喂一部分发酵液，可以防止断奶后在黏膜结构的不良变化，明显增加小肠的绒毛高度。Cera(1988a)的研究发现，断奶日龄越早对肠绒毛高度的影响越大，恢复其高度需要的时间就越长。杨全明（1999）的实验结果证明，断奶后虽然小肠绒毛没有明显变短，但是小肠发生了明显的变化，表现为变形，萎缩和表面粗糙，这可能是导致小肠的吸收不良。而在本试验条件下仔猪日粮经过发酵，对仔猪空肠、回肠盲肠和结肠绒

15、毛长度有增加的趋势，说明饲料经过发酵后有助于仔猪绒毛的增长。3.2发酵饲料对早期断奶仔猪隐窝深度的影响 隐窝即为小肠腺（黄奕生，1990），是小肠上皮在绒毛根部下陷到固有膜而形成的单管状腺，与绒毛上皮相连接，并开口于绒毛之间，隐窝内的未分化细胞是肠腺和绒毛上皮细胞的再生来源-未分化细胞自隐窝向绒毛顶端不断移动，逐渐成熟，从而使绒毛顶端不断脱落的细胞得以增生补充。隐窝内未分化细胞的数量及所处位置的深浅对于其自身以及保持肠绒毛的完整形态和正常机能有重要的作用。因此，隐窝增生表明细胞增殖率增加，细胞成熟度下降。顾宪红（1999）的试验结果,肠道粘膜上皮绒毛长度变短，隐窝深度增高意味着绒毛吸收细胞减少

16、，分泌细胞增多，肠道粘膜萎缩，造成吸收能力下降；未被消化吸收的物质不仅使肠道中渗透压升高，引起渗透性腹泻，而且使肠道中大肠杆菌等腐败菌大量繁殖。本试验条件下发酵组隐窝深度明显低于对照组，说明饲喂发酵饲料后，可以使仔猪肠绒毛隐窝深度变浅。表明细胞成熟率上升，分泌功能增强（王子旭等，2003；韩正康，1991）。3.3发酵饲料对早期断奶仔猪绒毛高度和隐窝深度比值的影响 绒毛高度/隐窝深度的值可综合反映小肠的功能状况。比值下降，表示黏膜损伤，消化吸收能力降低，发生腹泻，生长缓慢等现象；比值上升，则黏膜改善，消化吸收功能增强，腹泻率下降，生长加快。断奶后由于应激和饲料抗原引发的过敏反应，可引起不同程度

17、的绒毛变短、隐窝加深以及绒毛高度与隐窝深度的比值下降（陈代文等，1996）。本试验结果表明，发酵组的十二指肠和空场的V/C明显高于对照组，说明饲喂发酵饲料可以增加V/C的值，使肠道成熟细胞增多，细胞的成熟率升高，养分得到充分吸收。3.4发酵饲料对早期断奶仔猪肠道黏膜厚度的影响 肠道的屏障功能主要由肠黏膜屏障来实现。肠黏膜屏障包括机械屏障、生物屏障、化学屏障、免疫学屏障和肠黏膜固有层分子筛等部分。其中，肠黏膜机械屏障由肠黏膜上皮细胞、上皮细胞侧面的细胞连接、上皮基膜和上皮表面的细胞衣组成，它们构成了机体免疫系统的第一道防线（Reynolds J V，1996；Swank G M等，1996；Yi

18、n Y J，2002）。因此，肠黏膜上皮结构的完整性与肠黏膜机械屏障功能，乃至机体的免疫功能有密切关系。本试验结果表明，发酵饲料可以显著的提高空肠、回肠、盲肠的黏膜厚度，从而起到保护作用。4结论综上可知，枯草芽抱杆菌作为一种好氧有益菌，可与肠道需氧菌竟争氧气，抑制需氧菌的生长。而乳酸杆菌在其生长过程中，产生许多对需氧菌有害的物质如挥发性脂肪酸(甲酸、乙酸、丙酸及丁酸)和乳酸，降低其微生物环境内的pH值，阻止对酸敏感的细菌大量繁殖;乳酸菌还可以产生天然的抗生素，如乳链球菌可产生乳链球菌肽(nisin)多种抗菌蛋白物质，且不同抗菌物质的成分和抗菌范围不同。另外乳酸菌还产生类似细菌素的抑菌物质;可降

19、低消化道内病原菌的数量，使腹泻率明显降低，从而保护了肠黏膜的形态结构的完整，因而有助于增强仔猪对营养物质的吸收能力。参考文献：1王子旭，余锐萍，陈越，等，日粮锌硒水平对肉鸡小肠黏膜结构的影响J中国兽医科技，2003，(7)：1821.2陈代文，杨凤，陈可容，等仔猪补饲不同类型的饲粮蛋白质对仔猪小肠黏膜形态结构的影响J动物营养学报，1996，8(2)：18243郑秋锋添加谷氨酰胺对早期断奶仔猪的作用J。中国饲料，2002，(16)：20234杨全明，仔猪消化道酶和组织器官生长发育规律的研究.中国农业大学博士论文集，1999.5徐春兰，汪以真谷氨酰胺在早期断奶仔猪营养中的作用J畜禽生产，2004，

20、(6)：34356顾宪红.1999.断奶日龄对仔猪肠粘膜形态的影响A.乳猪营养与饲料研究论文集c.中国农业科学院畜牧所7黄奕生主编畜禽组织学与胚胎学M成都科技大学出版社19908韩正康家畜营养生理学M北京农业出版社，1991：16179 CasPary WFphysiology and pathophysiology of intestinal absorptionJ.AmJClinNutr.，1992,55：29930810 CeraK R .et al .Effect of age, weaning and post-weaning diet on a small intestinal g

21、rowth andJejunat morphology in young swineJ.Journal of Animal Science,1988a,66:514584.11 Jacobs L R，Hampson D J. 1986, Alterations in piglet small intestinal structure at weaningJ. J Research in Veterinary Science,40:324112 R. H. Scholten, C. M. van der Peet-Schwering, L. A. den Hartog, M. Balk, J.

22、W. Schrama, and M. W. Verstegen. Fermented wheat in liquid diets: effects on gastrointestinal characteristics in weanling piglets. J Anim Sci 2002 80: 1179-1186. 13 Reynolds J V，Gut barrier function in the surgical patientsJBr J Surg.1996,83：1668167114 Swank G M，Deitch E ARole of the gut in mul

23、tiple organ failure：baterial translocation and permeability changesJ.World JSurg.1996,20：41141515 Yin Y J，Chen Q POrgan and structure of the gut barrierJ.Diagnosis and Treatment of Gastroenterology，2002，(2)：5355Effects of Fermented Feed on Morphology of Small Intestine of Weaned PigletsLI Xuanliang1

24、，LI Jiantao23，PAN Shude2， WU Changde2(1 Bureau of Panjin City Shuangtaizi District Rural Economy；2 College of Animal Husbandry and Veterinary，Shenyang Agricultural University，Shenyang 110866；3 Animal Husbandry Co., Ltd， Shenyang Aite Jie，Shenyang 110165)Abstract：Purpose of this study effects of ferm

25、ented feed on morphology of small intestine ofweaned piglets.Average weight of 6.83kg will be 27 to 28 day old piglets were divided into three treatment.Test I group (positive control group, with basic diet), group (negative control group with basal diet +20% of the overnight water), group (negative control group with basal diet + bacteria + 20% of the overnight water). The res