专题22动物细胞工程导学案 时

1、2.2 动物细胞工程导学案 第二课时编制：郭见峰 审核：李波 使用时间：第四周【学习目标】 1、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。2、列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。【学习重点】动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用【课堂合作探究案】一、动物细胞融合动物细胞融合的原理是 ，结果是形成 。常用的诱导方法有 、 、 等。动物细胞融合最主要的应用是 。二、单克隆抗体1、回忆抗体（1）产生细胞：_。 （2）成分：_ _。（3）特点：具有 ，从_中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备(1)过程：给小鼠注射 ，使小鼠产生 反应。然后，把 细胞和 细胞融合，再用特

2、定的 培养基进行筛选，得到 。还需对其进行 和 ，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的 。其特点是 ，最后，将杂交瘤细胞在 条件下做大规模培养，或注射到小鼠的 内增殖，这样，从 或 中提取，就可以获得大量的单克隆抗体了。（2）单克隆抗体的优点：_ _、_ _、_ _。（3）单克隆抗体制备过程中用到的技术手段有 。3、单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂，具有_、_、_、_的优点。2、用于治疗疾病和运载药物： 如果把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“ ”注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常

3、细胞，又减少了用药剂量。三、相关技术比较 1、植物体细胞杂交和单克隆抗体制备植物体细胞杂交动物细胞融合(单克隆抗体制备)理论基础(原理)细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原，免疫处理正常小鼠促融(1)物理法：离心、振动、电刺激等(2)化学法：聚乙二醇(PEG)(1)物化法：与植物细胞融合相同(2)生物法：灭活的仙台病毒过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体的融合(物、化法)动物细胞的融合(物、化、生法)第三步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯用途

4、意义(1)克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围(2)克服有性杂交的母系遗传、获得细胞质基因的杂合子、研究细胞质遗传(1)制备单克隆抗体(2)诊断、治疗、预防疾病，例如：单抗诊断盒、“生物导弹”治疗癌症2、植物体细胞杂交和动物细胞融合的拓展分析(1)植物细胞A、B的体细胞是二倍体，体细胞中的染色体数是2n，则杂种细胞C就是4n，称为异源四倍体。(2)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，其遗传物质的传递不遵循孟德尔的遗传规律，因为生物在进行有性生殖时才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交的过程不属于有性生殖。(3)动物细胞融合后获得的杂种细胞，目前还没有办法让其发育成

5、一个个体，它不同于“克隆”，也不同于植物体细胞杂交。(4)两者在融合过程中都会发生多种融合方式，如AA、BB、AB，因此要进行筛选。(5)两者都要用到细胞融合和细胞培养两个技术手段。(6)动物细胞培养中用选择性培养基先后选择出杂交瘤细胞和能产生抗体的细胞群。(7)植物体细胞杂交的终点不是杂种细胞，而是杂种植株，所以其原理有两个：一是细胞的全能性；二是细胞膜的流动性。动物细胞融合是形成杂交瘤细胞，不是形成新个体，所以其原理只有一个，即体现细胞膜的流动性。1、下列关于细胞工程的叙述，不正确的是 ()A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B.去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

6、C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D.动植物细胞培养都需要经过脱分化处理2、某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列说法正确的是 ()A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象D.仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒3、单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是 (

7、)A.单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选D.只有用物理或化学方法的诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交细胞4、下列关于细胞工程的叙述中，正确的是 ()A.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体B.植物体细胞杂交培育出的新品种一定不是单倍体C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织D.单克隆抗体制备过程，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得杂交瘤细胞5、人CD20 单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方

8、式生产。我国科学家已经培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后，有望使这一特效药的生产成本降至现在的1/10。请回答：(1)单克隆抗体的制备需先将和融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是。(2)动物细胞培养需要在含混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入 等一些天然成分。(3)转基因技术的核心是。该过程用到的工具酶有 和6、有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞融合技术有着广泛的应用。右图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：(1)若a、

9、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是，这种育种方法的优点是。(2)若a、b分别为骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞，则d细胞特点是。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有的特点。生产上，一般不能通过直接培养效应B细胞来生产单克隆抗体，其主要原因是。(3)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是。7.右面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是。(2)图甲中过程常在诱导下完成，过程与体外培养相比，其优点是。(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其。(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？。原因是。(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能。A.有选择地繁殖某一性别的家畜 B.繁殖家畜中的优良个体C.用于保存物种 D.改变动物的核基