加味当归补血汤对肿瘤转移过程中血液流变学的影响

1、加味当归补血汤对肿瘤转移过程中血液流变学的影响 龚继勇1 张奉梅2 王兴武1 齐宝凤1 （1 山东省肿瘤医院 山东济南 250117 2 滨州医学院 山东烟台 264003）摘要：目的：探讨加味当归补血汤是否具有改变肿瘤转移过程中血液流变学状态从而抑制肿瘤转移的作用。方法：小鼠U14宫颈癌肺转移造模，于10d、19d、25d测全血粘度、血小板聚集率、红细胞压积、血小板计数及计算红细胞聚集指数率。结果：10d、19d，中药组与模型组相比全血粘度三个切变率均有所降低，尤其低切变率较模型组显著下降，P<0.05。血小板最大聚集率较模型组显著下降，P<0.05。25d，中药组低切变率较模型

2、组显著升高，P<0.05；其余指标各组比较差异不明显，P>0.05，血小板最大聚集率较模型组显著下降，P<0.01。结论：加味当归补血汤通过降低肿瘤小鼠升高的血液黏度、降低血小板聚集率升高来影响血液流变学从而具有一定的抑制肿瘤转移的作用。关键字：加味当归补血汤，肿瘤转移，血液流变学Modified Dangguibuxue Tang on tumor metastasis in the course of the impact of hemorheologyGong Jiyong1 Zhang Fengmei 2 Wang XingWu1 Qi Baofeng 1 (1 Ca

3、ncer Hospital in Shandong Province, Jinan, Shandong 250117 2 Binzhou Medical College Yantai, Shandong 264003)Abstract: Objective: To investigate whether the Modified Dangguibuxue soup with changes in the process of tumor metastasis hemorheology state to inhibit tumor metastasis role. Method: U14 cer

4、vical cancer in mice lung metastases model, in the 10 d, 19d, 25d measuring blood viscosity, platelet aggregation, hematocrit, platelet count and red blood cell aggregation index was calculated. Results: 10 d, 19d, the Board compared with the model of whole blood viscosity three shear rate has decre

5、ased, especially low-shear rate than the model group dropped significantly, P <0.05. Platelet aggregation model group than the rate dropped significantly, P <0.05. 25 d, the Board of low shear rate than the model group were significantly higher, P <0.05; other indicators of the difference b

6、etween the groups was not obvious, P> 0.05, platelet aggregation A significant decline in the model group, P <0.01. Conclusion: Modified Dangguibuxue soup tumors in mice by reducing elevated blood viscosity, reducing platelet aggregation rate increased to influence hemorheology thus has a role

7、 in inhibiting tumor metastasis.Keyword: Modified Dangguibuxue soup, tumor metastasis, hemorheology现代研究已经证实恶性肿瘤患者血液呈高凝状态，血流变慢，使脱落的肿瘤细胞不易被冲刷而附壁；同时产生的血栓也易产生涡流，为分散的癌细胞提供了整合、粘附机会，脱落的癌细胞易从轴流处移向管壁边流，可能陷入内皮细胞不规则处或附于血栓表面被包裹，从而逃避了免疫系统及化疗药物的攻击，发生肿瘤转移1。加味当归补血汤在我院用来辅助放化疗，具有升白，提高免疫功能的作用23。为探讨它是否可以改变肿瘤转移过程中血液流变学状

8、态从而抑制肿瘤转移的作用，我做了如下实验，。1材料 1.1瘤细胞株 小鼠腹水型U14子宫颈癌瘤株，由山东省肿瘤医院基础研究中心提供。 1.2动物 昆明种健康小白鼠90只，体重1822g，雌性，SPF级，由鲁抗实验动物中心提供(合格证书号：SDXK鲁20070145)。 1.3药品 加味当归补血汤(黄芪、当归、灵芝、鸡血藤、补骨脂等），山东省肿瘤医院制剂中心生产，批号：070318。肝素钠注射液：上海第一生化药业公司，批号：061016。 1.4主要仪器,LBY-NJ6型旋转式血液粘度计及LBY-NJ2型血小板聚集仪，普利生集团生产。 2方法 2.1子宫颈癌细胞株的制备：采用种鼠为腹腔生长U14

9、腹水型子宫颈癌的昆明小鼠，传代7天后消毒小鼠腹部皮肤，局部穿刺抽取腹水0.2ml，腹水原液以无菌生理盐水3倍稀释。实验用昆明小鼠下腹部皮肤消毒，经腹腔注射稀释腹水0.2ml，传代的成功率为100，每7天传代一次，经5次传代后的小鼠腹水用于移植接种。 2.2肿瘤细胞悬液的制备：选取接种7天的U14腹水瘤小鼠6只，腹部皮肤消毒，使用1ml的注射器每只小鼠抽吸腹水(为乳白色的浓稠液体)lml，放入无菌EP管中混匀。 2.3 U14子宫颈癌肺转移模型的复制每只实验小鼠经背侧皮下注射0.2ml子宫颈癌u14瘤细胞悬液，并继续给药25天。 2.4分组与给药：接种24小时后，小鼠随机分为2组,每组各30只。

10、分别为：模型组、中药组。模型组小鼠每天灌胃生理盐水O.1ml/lOg；中药组每只小鼠灌胃加味当归补血汤O.1ml/lOg；另取30只健康小鼠生理盐水O.1ml/lOg作阴性对照。 2.5观察指标 分别于实验开始后的第10天、19天、25天每组各取10只小鼠，戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉，肝素抗凝，下腔静脉取血，测定各组小鼠全血粘度；由ADP诱导，测血小板最大聚集率，测红细胞压积及血小板计数。红细胞聚集指数：低切变率/高切变率4。2.6统计学处理计量资料采用SPSS统计软件包作单因素卡方检验比较各组之间的差异，当P<0.05时为有意义。3结果3.1加味当归补血汤对接种10天的子宫颈

11、癌小鼠血液流变学变化的影响实验10天后血液流变学的改变为模型组全血粘度三个切变率和中药组低、中切变率较健康组均明显升高，P<0.01；中药组三个切变率较模型组均有所降低，尤其低切变率较模型组显著下降，P<0.05。中药组血小板最大聚集率较模型组显著下降，P<0.05。(见表1)表1 10d 小鼠全血粘度和血小板聚集率比较(±SD)组别n血液粘度(nb)血小板最大聚集率低切变率中切变率高切变率健康组105.0246±0.6754.6341±0.7612.3592±0.41726.425±5.15模型组109.4801±

12、1.326*8.4728±1.783*4.2154±1.259*36.925±22.87中药组107.3567±1.4387.1524±2.4163.4625±1.27724.971±4.98注： ”与健康组比较有显著性差异，P<0.01；与模型组比较有显著性差异，P<0.01。3.2加味当归补血汤对接种19天的子宫颈癌小鼠血液流变学变化的影响 实验19天后血液流变学的改变为模型组全血粘度三个切变率和中药组低、中切变率较健康组均明显升高，P<0.01及P<0.05；中药组三个切变率较模型组均有所降低，

13、尤其高切变率较模型组显著下降，P<0.05。模型组血小板最大聚集率较健康组明显增加，P<0.01；中药组血小板最大聚集率较模型组显著下降，P<0.05。(见表2)表2 19d 小鼠全血粘度和血小板聚集率比较(±SD)组别n血液粘度(nb)血小板最大聚集率低切变率中切变率高切变率健康组105.2421±0.7014.3147±0.8292.3449±0.45526.592±4.90模型组107.4856±1.154*6.6987±1.429*3.9394±1.317*57.74±26.75

14、*中药组106.5740±1.1935.7985±1.6722.7978±1.10735.472±15.31 注：*与健康组比较有显著性差异，P<O.05；*与健康组比较有显著性差异，P<0.01。3.3加味当归补血汤对接种25天的子宫颈癌小鼠血液流变学变化的影响 实验25天后血液流变学的改变为模型组全血粘度高切变率较健康组明显升高，P<0.05；中药组低切变率较模型组显著升高，P<O.05；其余指标各组比较差异无统计学意义，P>0.05。模型组血小板最大聚集率较健康组显著增加，P<0.01；中药组血小板最大聚集率较模

15、型组显著下降，P<0.01。(见表3)表3 25d 小鼠全血粘度和血小板聚集率比较(±SD)组别n血液粘度(nb)血小板最大聚集率低切变率中切变率高切变率健康组102.4341±0.2974.5417±0.5655.3420±0.85627.585±7.03模型组103.2534±0.767*4.9563±1.7314.8714±1.45157.974±20.67*中药组102.6831±1.1254.8334±1.5345.9846±0.80536.987±14.26 注：*与健康组比较有显著性差异，P<0.01；与模型组比较有显著性差异，P<0.01。 4结论由实验结果可见，在肿瘤转移过程中出现了全血黏度和血小板聚集率升高为主要特征的血液流变学改变。加味当归补血汤对肿瘤转移过程中血液流变学影响是降低荷瘤小鼠升高的血液黏度，另外也起到了降低血小板聚集率升高这一肿瘤转移的关键环节的作用。由于其抗血小板聚集的作用，抑制了细胞的黏附性和瘤栓的形成，从而抑制了肿瘤细胞的黏附、游走、穿透而抗转移。由此，可以