蛹虫草（Cordycepsmilitaris）生物学特性及发酵研究

1、蛹虫草（Cordyceps militaris）生物学特性及发酵研究    英文题名 Biological Characteristics and Fermentation Research of Cordyceps Militaris  关键词 蛹虫草; 液体发酵; 生物学特性; 双向固体发酵; 英文关键词 Cordyceps militaris; submerged fermentation; biological characteristics; new solid cultivation; 中文摘要 冬虫夏草是著名的传统中药和保健品,从

2、17世纪开始就作为一种滋补药在东西方国家得到广泛应用。蛹虫草作为我国传统的民间药食两用真菌,由于其活性成分和药理作用与冬虫夏草相似,因此具有很高的开发利用价值。但生长条件的特殊性决定了蛹虫草野生资源稀少,再加上人们的过度采挖,造成了野生蛹虫草资源短缺、价格昂贵,不能满足巨大的市场需求。因而,探讨蛹虫草的高效人工培养方式成为药用真菌研究领域的一大热点。 该论文在本实验室原有研究的基础上对蛹虫草Cordyceps militaris Link.的鉴定、性质及人工培养条件进行了研究。根据供试菌株菌丝的显微结构、子实体形态特征并结合ITS序列明确了其分类地位;以胞外多糖和虫草素为考察指标,对该菌的液体

3、发酵条件(营养因素、环境因子)进行了优化;此外,还对蛹虫草的双向固体发酵进行了初步探讨。 通过观察蛹虫草菌丝和子实体的显微结构,发现野生和人工培养的蛹虫草子实体在外观形态上差别较大;菌丝为有隔菌丝,在菌丝体顶端可形成分生孢子梗,孢子梗顶端不膨大,无分枝,分生孢子呈球状或椭圆状,成串地着生于孢子梗上,这些特征与青霉极为相似;蛹虫草子囊壳呈瓶状,子囊线形、细长,平行排列在子. 英文摘要 Cordyceps sinensis as a well-known traditional Chinese medicine and health product was widely used in easte

4、rn and western countries since 17th century. Cordyceps militaris is a traditional folk medicinal and edible fungus, and it possesses very utilizational value, because of the similar components and pharmacological activity to Cordyceps sinensis. The fact of the particularity of the living conditions

5、and peoples over-excavation lead to the shortage of fungi s resources, and the high price; 摘要 8-9 Abstract 9-10 前言 11-12 第一章 蛹虫草的研究进展 12-26     1 引言 12-13     2 蛹虫草的研究进展 13-20         2.1 命名与分类地位 13-14      

6、60;  2.2 寄主与资源分布 14-15         2.3 生物学特性 15-16         2.4 人工栽培 16-17         2.5 化学成分 17-19         2.6 药理活性 19-20     3 结语 20-21  

7、60;  参考文献 21-26 第二章 蛹虫草的形态观察和ITS序列测定 26-34     1 引言 26     2 材料与方法 26-28         2.1 实验材料 26-27         2.2 供试培养基 27         2.3 试验方法 27     

8、;    2.4 ITS序列测定 27-28     3 结果 28-32         3.1 野生和人工培养子实体形态比较 28-29         3.2 蛹虫草菌丝结构及产孢类型 29-30         3.3 子囊壳、子囊、子囊孢子及其萌发产生的菌丝、菌落的形态 30    

9、60;    3.4 ITS序列测定 30-32     4 结论 32     参考文献 32-34 第三章 蛹虫草菌丝的生长特性 34-41     1 引言 34     2 材料与方法 34-36         2.1 实验材料 34         2.2 供试培养基 34-35  &#

10、160;      2.3 试验方法 35-36         2.4 数据处理 36     3 结果 36-39         3.1 碳源对菌丝生长的影响 36         3.2 氮源对菌丝生长的影响 36-37       

11、0; 3.3 pH值对菌丝生长的影响 37-38         3.4 光照条件对菌丝生长的影响 38-39         3.5 不同培养基对菌丝生长的影响 39     4 讨论 39-40     参考文献 40-41 第四章 蛹虫草多糖的提取分离 41-48     1 引言 41     2 材料与方法 41-43 

12、0;       2.1 实验材料 41         2.2 虫草多糖提取工艺研究 41-42         2.3 虫草多糖的提取及分离纯化 42-43         2.4 苯酚-硫酸法测定虫草多糖含量的方法 43     3 结果 43-46    

13、60;    3.1 虫草多糖最佳提取工艺 43-44         3.2 虫草多糖提取得率和粗多糖CP-1的柱层析分离 44-45         3.3 虫草多糖含量测定方法 45-46     4 讨论 46     参考文献 46-48 第五章 虫草素含量测定方法 48-54     1 引言 48   &

14、#160; 2 材料与方法 48-50         2.1 实验材料 48-49         2.2 虫草素含量测定 49         2.3 液相色谱法的考察 49-50     3 结果 50-52         3.1 线性关系 50    

15、;     3.2 精密度、重复性、稳定性及加样回收率 50-51         3.3 样品中虫草素的含量 51-52     4 讨论 52     参考文献 52-54 第六章 蛹虫草液体发酵培养条件的优化 54-62     1 引言 54     2 材料与方法 54-57        

16、; 2.1 实验材料 54-55         2.2 供试培养基 55         2.3 固体菌种平板培养 55         2.4 液体菌种培养 55         2.5 液体发酵 55-56         2.6 液体发酵主要

17、指标测定方法 56-57     3 结果 57-60         3.1 摇瓶培养过程中菌丝体生长量和胞外多糖产量的变化 57-58         3.2 碳源对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 58         3.3 氮源对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 58-59       

18、60; 3.4 起始pH值对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 59-60         3.5 温度对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 60     4 结论 60-61     参考文献 61-62 第七章 NH_4+对发酵菌丝体中虫草素含量的影响 62-71     1 引言 62     2 材料与方法 62-64         2

19、.1 实验材料 62-63         2.2 摇瓶培养 63         2.3 添加铵根离子实验 63         2.4 干燥菌丝体生物量及发酵液的酸碱度测定 63-64         2.5 菌丝中虫草素含量的测定 64       &#

20、160; 2.6 发酵液中胞外多糖含量测定 64     3 结果 64-68         3.1 NH_4+对菌丝生物量和虫草素含量的影响 64-65         3.2 NH_4+及酸度对菌丝产量的影响和发酵液pH值变化 65-66         3.3 NH_4+及pH对虫草素和胞外多糖产量的影响 66-68   

21、0; 4 讨论 68-69     参考文献 69-71 第八章 蛹虫草的双向固体发酵初探 71-78     1 引言 71     2 材料与方法 71-73         2.1 实验材料 71         2.2 培养基 71-72         2.3 蛹虫草固体发酵培养 72 &

22、#160;       2.4 样品中多糖及虫草素测定方法 72         2.5 数据统计分析 72-73     3 结果 73-76         3.1 不同培养基中子实体产量的变化 73-74         3.2 不同培养基中子实体及发酵菌质的多糖含量变化 74  &

23、#160;      3.3 不同培养基中子实体及发酵菌质的虫草素含量变化 74-76     4 讨论 76-77     参考文献 77-78 第九章 结论 78-80         3.5 温度对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 60     4 结论 60-61     参考文献 61-62 第七章 NH_4+对发酵菌丝体中虫草素含量的影响 62-7

24、1     1 引言 62     2 材料与方法 62-64         2.1 实验材料 62-63         2.2 摇瓶培养 63         2.3 添加铵根离子实验 63         2.4 干燥菌丝体生物量及发酵液的酸碱度测定

25、63-64         2.5 菌丝中虫草素含量的测定 64         2.6 发酵液中胞外多糖含量测定 64     3 结果 64-68         3.1 NH_4+对菌丝生物量和虫草素含量的影响 64-65         3.2 NH_4+及酸度对菌丝产量的影响和发

26、酵液pH值变化 65-66         3.3 NH_4+及pH对虫草素和胞外多糖产量的影响 66-68     4 讨论 68-69     参考文献 69-71 第八章 蛹虫草的双向固体发酵初探 71-78     1 引言 71     2 材料与方法 71-73         2.1 实验材料 71   

27、      2.2 培养基 71-72         2.3 蛹虫草固体发酵培养 72         2.4 样品中多糖及虫草素测定方法 72         2.5 数据统计分析 72-73     3 结果 73-76        

28、; 3.1 不同培养基中子实体产量的变化 73-74         3.2 不同培养基中子实体及发酵菌质的多糖含量变化 74         3.3 不同培养基中子实体及发酵菌质的虫草素含量变化 74-76     4 讨论 76-77     参考文献 77-78 第九章 结论 78-80         3.5 温度对菌丝

29、生物量和胞外多糖产量的影响 60     4 结论 60-61     参考文献 61-62 第七章 NH_4+对发酵菌丝体中虫草素含量的影响 62-71     1 引言 62     2 材料与方法 62-64         2.1 实验材料 62-63         2.2 摇瓶培养 63    &

30、#160;    2.3 添加铵根离子实验 63         2.4 干燥菌丝体生物量及发酵液的酸碱度测定 63-64         2.5 菌丝中虫草素含量的测定 64         2.6 发酵液中胞外多糖含量测定 64     3 结果 64-68      

31、60;  3.1 NH_4+对菌丝生物量和虫草素含量的影响 64-65         3.2 NH_4+及酸度对菌丝产量的影响和发酵液pH值变化 65-66         3.3 NH_4+及pH对虫草素和胞外多糖产量的影响 66-68     4 讨论 68-69     参考文献 69-71 第八章 蛹虫草的双向固体发酵初探 71-78     1

32、引言 71     2 材料与方法 71-73         2.1 实验材料 71         2.2 培养基 71-72         2.3 蛹虫草固体发酵培养 72         2.4 样品中多糖及虫草素测定方法 72     &

33、#160;   2.5 数据统计分析 72-73     3 结果 73-76         3.1 不同培养基中子实体产量的变化 73-74         3.2 不同培养基中子实体及发酵菌质的多糖含量变化 74         3.3 不同培养基中子实体及发酵菌质的虫草素含量变化 74-76    

34、4 讨论 76-77     参考文献 77-78 第九章 结论 78-80         3.5 温度对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 60     4 结论 60-61     参考文献 61-62 第七章 NH_4+对发酵菌丝体中虫草素含量的影响 62-71     1 引言 62     2 材料与方法 62-64     &#

35、160;   2.1 实验材料 62-63         2.2 摇瓶培养 63         2.3 添加铵根离子实验 63         2.4 干燥菌丝体生物量及发酵液的酸碱度测定 63-64         2.5 菌丝中虫草素含量的测定 64    &#

36、160;    2.6 发酵液中胞外多糖含量测定 64     3 结果 64-68         3.1 NH_4+对菌丝生物量和虫草素含量的影响 64-65         3.2 NH_4+及酸度对菌丝产量的影响和发酵液pH值变化 65-66         3.3 NH_4+及pH对虫草素和胞外多糖产量的影响 66-6

37、8     4 讨论 68-69     参考文献 69-71 第八章 蛹虫草的双向固体发酵初探 71-78     1 引言 71     2 材料与方法 71-73         2.1 实验材料 71         2.2 培养基 71-72        

38、2.3 蛹虫草固体发酵培养 72         2.4 样品中多糖及虫草素测定方法 72         2.5 数据统计分析 72-73     3 结果 73-76         3.1 不同培养基中子实体产量的变化 73-74         3.2 不同培养基中子实体及发酵菌质

39、的多糖含量变化 74         3.3 不同培养基中子实体及发酵菌质的虫草素含量变化 74-76     4 讨论 76-77     参考文献 77-78 第九章 结论 78-80         3.5 温度对菌丝生物量和胞外多糖产量的影响 60     4 结论 60-61     参考文献 61-62 第七章 NH_4+对发酵菌丝体中虫草素含量的影响 62-71     1 引言 62     2 材料与方法 62-64         2.1 实验材料 62-63