水产微生物与免疫学复习资料

1、水产微生物学复习资料水产养殖07级 一、名词解释菌落：colony，clone ：由一个或者数个同种细菌或其他微生物在固体培养基上生长繁殖而形成的肉眼可见的，具有一定形态的独立群体，也叫克隆。细菌：广义： 原核细胞型微生物：细菌、立克次氏体、衣原体、霉形体、螺旋体、放线菌等；狭义：自然界中分布极为广泛，与人类关系密切的、数量大、种类多、具有细胞壁和原始核质、无核仁和核膜、分裂繁殖的单细胞微生物，属于原核生物界。芽孢：在一定条件下，某些细菌（球、杆、螺）菌体内生长发育成一个细胞浆浓缩含水量低，折光性较强的、圆形或椭圆形的、厚壁、抗逆性强的休眠小体。消毒disinfection：是指用化学或物理的

2、方法杀灭物体上病原微生物的方法。灭菌sterilization：杀灭所有的微生物包括病原微生物、非病原微生物及其芽孢、霉菌的孢子的方法，使物体的内部和外部都没有微生物的存在。致病性pathogenicity：病原菌在一定条件下，能在宿主体内引起感染的能力。又称致病力或病原性。免疫：生物机体识别自己和异己、排除异己，维持自身稳定和平衡的保护性反应。疫苗：利用动物疾病病原人工制备的可以引起自动免疫用于预防疾病的一种生物制品，包括虫苗、菌苗、疫苗（狭义）、用于预防肿瘤和自身免疫等非传染性疾病的治疗性制剂和生理调控制剂。抗原抗体反应：抗原与相应的抗体无论在体内或者体外相遇，均可发生的各种特异性免疫反应

3、。血清学实验：抗原和相应的抗体在体内和体外均能发生特异性结合反应，因为抗体主要是来自血清，因此在体外进行抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。生物制品Veterinary Biologics：诸如疫苗、虫苗、类毒素、抗血清、诊断试剂和微生态制剂等根据免疫学、生物化学和生物工程技术的理论和方法把微生物（寄生虫、细菌、病毒、螺旋体、支原体、立克次氏体、衣原体等）或其代谢产物或其免疫应答产物经过一定程序和技术加工而成的用于动物疾病的防控（预防、治疗或诊断）的产品。类毒素toxoid：外毒素在0.4%甲醛溶液作用下，经过一段时间可以脱毒，但仍保留原有抗原性，称之为类毒素。1IUNDV：指微升新城

4、疫病毒。微生物（microorganism）：广泛存在于自然界中，个体细小，肉眼看不见，必须用显微镜才能观察到的一群结构简单繁殖迅速的最微小的生物的总称病原微生物：能够使动物致病的微生物叫做病原微生物。外毒素：是病原菌在生长繁殖期间分泌到周围环境抗原性强、毒性也强的一种蛋白质类代谢产物，主要由革兰氏阳性菌产生，少数革兰氏阴性菌也能产生，其活性不稳定，对热和某些化学性菌也能产生，容易受到破坏。抗原Ag：凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能与之在体内或体外发生特异性反应的物质称为抗原。抗体Ab：机体在抗原的刺激下由活化的B细胞产生的一种具有可与该抗原发生特异性反应的免疫球蛋白lg。单克隆抗体M

5、cAb：只针对完全抗原上某一个抗原决定簇的特异性抗体，具有高纯度、专一性、均质性等特点。MLD最小致死量：能使特定的实验动物感染后一定时限内死亡的最小的活的微生物量或者毒素量。LD50半致死量：能使特定的实验动物在感染后一定时限内半数死亡的活的微生物量或者毒素量。病毒（狭义）：目前个体最微小，结构最简单的生命形式，仅具有一种核酸，缺少完整酶系不能单独完成物质代谢，不能在人工培养基上生长，只能在特定的动物体内一定部位的活的细胞中依靠核酸复制生长繁殖和遗传变异的非细胞结构微生物。培养基：是用人工的方法配制而成的，专供微生物生长繁殖的混合营养制品。毒力（virulence）：病原微生物治病力的强弱程

6、度，构成病原毒力的物质成为毒力因子，主要包括两大要素侵袭力、毒素。干扰现象（interference）：两种病毒感染同一种细胞或机体时，常常发生一种病毒抑制另一种病毒复制的现象，称为干扰现象。变态反应allergy： 在一定条件下由于机体免疫功能失调，受到抗原刺激后，机体产生超出正常范围的特异性Ig或致敏淋巴细胞，当受到同一抗原的再次刺激，引发的以组织损伤或生理功能紊乱为特征的异常特异性免疫的病理反应也叫超敏反应。凝集反应：细菌、红细胞等颗粒型抗原，或吸附在乳胶、白陶土、离子交换树脂和红细胞等物质上的抗原，与相应的抗原结合，在适当的电解质存在下，经过一段时间，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集实

7、验。沉淀反应：可溶性抗原（如细菌外毒素、内毒素、菌体裂解液、病毒可溶性抗原，血清，组织侵初液等）与相应抗体结合，在适量的电解质存在下，形成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀实验。中和实验：根据抗体是否中和病毒的感染性而建立的免疫学反应实验。免疫耐受：指正常情况下可以引起免疫系统免疫应答反应的抗原而不引起免疫应答的现象或不反应状态，包括天然性和获得性两种。共生：(Symbiosis)两种或多种生物共同生活在一起，互相依赖，互得其利者叫共生（共栖、中立、互生）。天然免疫：又称为先天性免疫，是指生物与生俱来的免疫能力。是生物在长期的特种发育与进化过程中，不断地与外界入侵的病原微生物等抗原相互作用而建立起来

8、的一般性的非特异性防御机制。获得性免疫：又称为后天免疫，是动物机体在生活过程中因接触异种免疫原（包括病原体或者及其产物）而形成的免疫。这种免疫的特点是针对性强，具有明显的特异性，即只对某种病原微生物具有抵抗力，而对其他病原微生物仍具有易感性。二、填空题：微生物常见变异现象有(P121)：细菌形态和结构的变异、毒力的变异、代谢的变异、地区性变异、菌落的变异、耐药性的变异；微生物发展史：1676年列文虎克细菌呼吸分类：根据细菌代谢对分子氧的需要与否,可分为5类：需氧型、微需氧型、兼性厌氧型、厌氧型、专性厌氧型。（p29）三、简答题：1免疫的基本功能包括？答： 防疫感染，即机体对由消化道、呼吸道、皮

9、肤、粘膜等途径进入体内的病原体的抵抗力，通过机体的特异性或非特异性免疫杀死病原体； 免疫稳定：免疫的第二个重要功能是把新陈代谢中衰老和死亡细胞清除出体内，以维护机体的生理平衡； 免疫监视：清除自身突变细胞的功能称为免疫监视。2湿热灭菌法的种类：答：煮沸法： 巴氏消毒法：常压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌法3病毒的复制过程：答：总的而言，病毒一方面以特殊的自我复制，即以病毒核酸为模板，在多聚酶等必要因素作用下，复制子代病毒核酸；另一方面以病毒核酸为模板转录mRNA，利用细胞蛋白体翻译子代病毒蛋白，然后组装完整的病毒颗粒，释放在细胞外。基本过程：1）吸附, 是病毒表面蛋白（也叫吸附蛋白）与细胞表面特定的

10、病毒受体结合的过程 ,是病毒感染细胞第一步； 2）穿入,指病毒吸附在宿主细胞上，通过几种方式使核衣壳进入细胞内的过程，病毒特征不同，穿入方式不同； 3）脱壳,病毒在宿主细胞内脱去核壳,病毒核酸随后进入细胞的一定部位； 4）病毒大分子的生物合成,病毒基因组进入宿主细胞后,一方面表达与合成病毒复制过程中所必需的结构蛋白和非结构蛋白,另一方面进行复制合成子代病毒核酸；5）装配与释放,病毒核酸与壳体蛋白合成完毕后,在细胞核内或胞浆内装配成熟为病毒颗粒(核衣壳),此即子代病毒体,然后子代病毒体以不同方式从感染细胞中释放到细胞外环境。4细菌病毒的分类依据：（p135）答：细菌分类依据：A 、根据形态特征；

11、B、生活方式；C、营养特性；D、生理生化特性；E、对抗生素及其它化学物质的敏感性；F、对噬菌体的敏感性； G、抗原结构；H、病原性；I、遗传学特性；病毒分类依据：A） 分子结构特征（大小、形状、衣壳对称性、壳粒多少、有无囊膜等）；B） 核酸特征：（核酸类型；股数、节段、极性和GC含量）；5鱼类的免疫器官和免疫细胞有哪些？（有问题p197、203）答：免疫器官：胸腺、肾脏、脾脏、免疫细胞：单核细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、K细胞、NK细胞、鱼类淋巴细胞中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、红细胞、鱼类吞噬细胞；6鱼类免疫接种途径有哪些？答：注射免疫接种浸泡免疫接种喷雾免疫接种口服免疫接种7鱼类

12、抗体产生的特点？答：1）鱼类的种类、抗原种类、抗原接触途径、环境因素对鱼类抗体产生的量、持续时间和再次应答效果均有显著直接影响，免疫记忆也受到温度影响。2）圆口鱼类产生抗体特异性和再次应答能力都较弱；软骨鱼类和硬骨鱼类都有产生较强特异性抗体的能力和产生广泛的再次应答；真骨鱼类有较强的抗体产生能力和特异性较大提高，但是再次应答能力不强。3）在适宜条件下，真骨鱼类能迅速产生较强的初次免疫应答，且抗体产生诱导期和持续期因鱼类差异有较大差异；4）与哺乳动物相比鱼类再次免疫应答较弱，且初次和再次应答抗体可维持期都较短；与哺乳动物相同血清中抗体浓度最高；5）口服免疫的免疫应答较弱。8细菌和真菌繁殖的条件?

13、答：细菌：1）充足的营养：必须有充足的营养物质才能为细菌的新陈代谢及生长繁殖提供必需的原料和足够的能量。    2）适宜的温度：细胞生长的温度极限为-790。各类细菌对温度的要求不同，病原菌最适温度为人体的体温，即37，故实验室一般采用37培养细菌。    3）合适的酸碱度：在细菌的新陈代谢过程中，酶的活性在一定的PH范围才能发挥。多数病原菌最适PH为中性或弱碱性（pH7.27.6）。人类血液、组织液PH为7.4，细菌极易生存。胃液偏酸，绝大从数细菌可被杀死。个别细菌在碱性条件下生长良好，如霍乱孤菌在PH8.49.2时生长最好；有的细菌最适pH偏酸，如结

14、核杆菌（pH6.56.8）。    4）必要的气体环境：氧的存大与否和生长有关，有些细菌仅能在有氧条件下生长；有的只能在无氧环境下生长；而大多数病原菌在有氧及无氧的条件下均能生存。真菌：1）营养物质（主要是糖类等） 2）酸碱度（多数喜酸性，pH3-6，pH2-10也可生长）3）温度（大多数为20-30 C，种类不同而不同）4）湿度（潮湿环境为主）5）气体（多数为需氧菌）9补体结合反应判断标准？答：补体结合反应(Complement fixation reaction)是在补体参与下，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应。整个试验需要有补体、待检系统（已知抗体或抗原

15、、未知抗原或抗体）及指示系统（绵羊细胞和溶血素）五种成份参加补体无特异性，能与任何一组抗原抗体复合物结合而引起反应，但是补体不单独和抗原或抗体结合。1) 如果补体与绵羊红细胞、溶血素的复合物结合，就会出现溶血现象（如果与细菌及相应抗体复合物结合，就会出现溶菌现象）如果出现溶菌/不溶血，是补体与待检系统结合的结果，说明抗原抗体是相对应的；2) 如果出现溶血，说明抗原抗体不相对应。此反应操作复杂，敏感性高，特异性强，能测出少量抗原和抗体，所以应用范围较广。10抗体的生物活性？答：（1）特异性：在体内或体外，只能与相应的抗原发生的抗原抗体反应。（2）激活补体：抗原抗体结合后，Ab 构象变化，重链恒定

16、区补体结合位点暴露，可与补体结合，激活补体系统。（3）与Fc片段受体结合：Ab可与一些细胞上FcR结合，传递免疫信息，如IgE与肥大、嗜碱性粒细胞结合引起I型变态反应。（4）膜传递作用：Ig可以通过胎盘进入胎儿的血液中，具有重要的抗传染免疫意义。（5）双重性：Ab是免疫球蛋白，有抗体作用，同时 也是蛋白质，对于异种/体动物也属抗原Ag。（6）不均一性：抗体（单抗除外），尤其血清抗体是由于抗原免疫产生的，抗原往往具有多种抗原决定簇，因此抗体一般含有多种针对不同决定簇的抗体，并且抗体又根据重链、轻链分分多种型和亚型，因此免疫抗体中含有不同类型的免疫球蛋白，具有不均一性。11构成抗原的条件有哪些？答

17、：（1） 异物性：“非自身”物质；同种异体；自身抗原。（2） 分子大小：一般在10,000道尔顿以上抗原性较好。（3） 化学组成、分子结构与立体构象的复杂性：必需具备抗原性最小的化学基团，且分子结构和立体构性越复杂免疫原性越好。（4） 物理状态：颗粒性抗原的免疫原性一般较可溶性抗原好点。12细菌外毒素与内毒素主要区别？答：外毒素是病原菌在生长繁殖期间分泌到周围环境抗原性强、毒性也强的一种蛋白质类代谢产物，主要由革兰氏阳性菌产生，少数革兰氏阴性菌也能产生，其活性不稳定，对热和某些化学性菌也能产生，容易受到破坏。抗原性未完全抗原，抗原性强；毒性强；能够制成类病毒；稳定性在60100摄氏度半小时即被

18、破坏；存在细胞外，游离态；活菌随时分泌；不同外毒素致病性不同。 内毒素大多数革兰氏阴性细菌能产生内毒素，实际上它存在于细菌细胞壁的外层，属于细胞壁的组成部分，化学成分为脂多糖（LSP）一般情况下并不分泌到环境中，只有当细菌溶解后才释放出来的。不能制成类病毒，耐热性很强；常结合在细胞壁上；抗原性为不完全抗原。抗原性弱或无；不同病原微生物的内毒素作用基本相同。13、动物体内的非特异免疫因素主要有哪些？答（1）天然抗体 （2）补体（3）C反应性蛋白（4）干扰素（5）溶菌酶（6）天然溶血素四、简述题：1简述免疫应答的基本过程？答：特异性免疫应答过程：（1）感应阶段 sensitization stag

19、e 抗原进入动物机体被噬取和识别阶段，也叫致敏阶段。（2）反应阶段 reactive stage淋巴细胞被激活，母细胞化分裂增殖为致敏T、B淋巴细胞、记忆细胞和释放抗体、淋巴因子的过程。（3）效应阶段 effective stage抗体和细胞因子和免疫细胞清除抗原物质的过程。非特异性应答过程：（1） 皮肤和黏膜的保护性屏障；（2） 种的易感性（3） 吞噬作用2细菌群体生长繁殖可分为几个时期，各个时期的特点有哪些？答：细菌群体生长可分为四个时期，各时期的特点如下： 迟缓期：细菌进入新环境后的短暂适应期。该时期菌体增大，代谢活跃，为细菌的分裂繁殖合成并积累充足的酶、辅酶和中间代谢产物。但分裂迟缓，

20、繁殖极少。 对数期：又称为指数期。细菌在该时期生长迅速，活菌数以恒定的几何级数增长，生长曲线图上细菌数的对数呈直线上升，达到顶峰状态。细菌的形态、染色性、生理活性等都比较典型，对外界环境因素的作用敏感。 稳定期：由于培养基中营养物质的消耗，有害代谢产物的积累，该期细菌繁殖速度渐减，死亡数逐步增加，细菌形态，染色性和生理状态常有改变。 衰亡期：稳定期后细菌繁殖越来越慢，死亡数越来越多，并超过活菌数。该期细菌形态显著改变，出现衰退型或菌体自溶，难以辨认，生理代谢活动也趋于停止。3什么是病毒？其特点有哪些？答：病毒是目前个体最微小，结构最简单的生命形式，仅具有一种核酸，缺少完整酶系不能单独完成物质代

21、谢，不能在人工培养基上生长，只能在特定的动物体内一定部位的活的细胞中依靠核酸复制生长繁殖和遗传变异的非细胞结构微生物。 特点：形体及其微小，一般可以通过细菌滤器，需用电子显微镜观察其大小与形态；不具备细胞结构，因此称为分子生物；其主要成分为核酸和蛋白质，每一种病毒仅含一种核酸（DNA或RNA）；即无产能酶系，也无蛋白质合成系统，在宿主细胞，通过核酸复制和核酸蛋白装配的形式进行增殖；在离体的条件下，能以无生命德化学分子状态存在，并保持其感染性；对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感。4抗体产生的规律？答：抗原进入外环境，被吞噬细胞吞噬，露出特异性抗原。T细胞分泌淋巴因子，刺激B细胞，B细胞增殖分化，

22、产生浆细胞，分泌抗体。有部分抗原直接刺激B细胞，B细胞增殖分化，产生浆细胞，分泌抗体。在二次免疫时，抗原直接刺激浆细胞，产生抗体。5简述病毒繁殖方式是什么？其繁殖过程及主要培养方式？答：病毒没有独立进行代谢的能力，其增殖必须在宿主细胞内进行，病毒以特殊的自我复制方式进行增殖，即以病毒核酸为模板，在多聚酶等必要因素的作用下，复制子代病毒核酸；另一方面以病毒核酸为模板转录mRNA，利用细胞核蛋白翻译子代病毒蛋白，然后组装完整的病毒颗粒，释放与细胞外。繁殖过程：吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装与成熟、释放等阶段。培养主要方式：，这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等，接种的

23、途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同，选择敏感动物及适宜接种部位。 鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同，可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上。 将离体活组织块或分散的活细胞加以培养，统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型：器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒，根据细胞的来源，染色体特性及传代次数又可分为下列类型：原代和次代细胞培养，二倍体细胞株和传代细胞系。6影响消毒剂作用的因素有哪些？及其作用的主要机制？答：主要因素：1）化学药剂的特异性2）化学药剂的浓度3）微生物的种类及其特性4)作用时间与其他环境条件主要机制：1）损伤细

24、胞膜2)引起菌体蛋白变性3）改变菌体蛋白与核酸功能7简述间接ELISA的反应原理及其过程？（p246）答：原理：包被：使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。标记：使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性（商业化加样：在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。洗涤：用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。显色：加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接

25、相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。过程：1）包被抗原；2 ）洗涤 ；3)加待检抗体； 4）洗涤；5）加酶标抗体； 6）洗涤 ；7）加底物显色； 8）观察结果；8简述革兰氏染色的原理，主要步骤、结果及其实际意义？答：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜

26、迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色原理。主要步骤：1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1-2分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1-3分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒-1分钟后水洗，吸去水分。 7）品红复染染10-30秒后，自来水冲洗。干燥，镜检。结果：革兰氏阴性菌呈现红色，革兰氏阴性菌则仍保留紫色。实际意义：1）鉴别细菌 2）选择药物 3）与致病性有关：革兰氏阳性能产生外毒素，革兰氏阴性能产生内毒素，两者致病作用不同。9单个细菌的微生物检测？ 答：1）、稀释摇管法 对于那些对氧气更为敏感