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1、槟榔碱的提取分离及其对胃肠道平滑肌收缩作用的影响摘要槟榔碱(Arecoline)从生药槟榔中提取,含量测定采用酸碱滴定法。实验结果提示,槟榔碱对胃肠道平滑肌活动可能有兴奋作用,其对小鼠的安全剂量为95.2mg/kg体重(按体表面积折算),是人正常用量的13.8倍。关键词槟榔槟榔碱提取分离豚鼠小鼠胃肠道平滑肌收缩作用 槟榔为棕榈科植物槟榔Areca catechu L.的平燥成熟种子,含生物碱0.3%0.6%,以槟榔碱(0.1%0.5%)为主,其余为槟榔次碱、去甲基槟榔碱、槟榔副碱、高槟榔碱均与鞣酸结合而存在,并含鞣质13%27%,脂肪油14%18%,红色素槟榔红等。槟榔中槟榔碱含量生品高于制品

2、,生槟榔饮片含槟榔碱0.3%0.36%1。本文主要探索从槟榔中提取分离槟榔碱的方法,研究槟榔碱对胃肠道平滑肌收缩作用影响的量效关系。1槟榔碱的提取分离及含量测定1.1药材槟榔饮片由广东省药材公司提供。1.2方法与结果1.2.1提取分离取生槟榔饮片10kg粉碎成粗粉,用75%乙醇浸渍24h,装柱,再用75%乙醇渗漉直至渗漉液无色。将渗漉液蒸馏,得总提取物(浸膏),加适量蒸馏水,加入盐酸,混匀后过滤,滤液以氨水调至pH7,用氯仿萃取,取氯仿层,挥干氯仿,加蒸馏水适量,得油状的槟榔碱水溶液2000ml。1.2.2槟榔碱的含量测定2精密吸取槟榔碱水溶液20ml,加入20ml硫酸滴定液,摇匀,加甲基红指

3、示液数滴,用氢氧化钠滴定液滴定。每1ml硫酸滴定液(0.01mol/L)相当于3.104mg槟榔碱(C8H13NO2)。测定结果为1.26mg/ml。2槟榔碱的药理作用实验2.1材料与标本制备2.1.1药物槟榔碱按上述方法从槟榔中提取。吗叮啉片(10mg/片),西安杨森制药有限公司生产。2.1.2动物豚鼠及小鼠由广州市江村动物场提供。豚鼠体重 250300g,雌雄均用。小白鼠体重1822g,雌雄均用。2.1.3标本的制备3锤击后脑处死已空腹24h的豚鼠,剖腹取出近回盲部的回肠,用台氏液洗肠腔,剪成1520cm长的肠段,保存于370.5已通入95%O2和5%CO2的混合气体的台氏液中备用。2.2

4、方法与结果2.2.1不同浓度槟榔碱对离体豚鼠回肠收缩作用的影响取回肠置恒温(37)浴槽(容积20ml)中通入含95%O2和5%CO2的混合气体。肠末端用线与换能器连接,加1g负荷,用LMS-2B型生理二道仪(成都仪器厂出品)记录回肠的收缩。标本平衡30min稳定后开始实验。先描记加药前回肠平滑肌正常节律性收缩曲线。然后依次加入不同浓度的药物,使累积浓度依次为10-4、310-4、10-3、310-3、10-2、310-2/4,记录加药后回肠的收缩曲线,比较给药前后的变化。实验结果显示,加入槟榔碱后豚鼠回肠自发收缩出现明显的兴奋作用,并呈量效关系。从累加量效曲线可看出它是一对称的“S”型曲线,见

5、1。1量效曲线2.2.2三种不同浓度槟榔碱对离体回肠收缩的变化比较分别加入低、中、高三种浓度的槟榔碱,使其终浓度分别为:3.4710-4、6.5210-3、3.0210-2mg/ml,观察30min,比较豚鼠离体回肠收缩幅度、频率的变化。结果表明,加入药物后豚鼠离体回肠自发收缩出现明显促进作用,并呈量效关系。按下式计算5RR=(BR-PR)/(BR)100%RR为促进率,BR为给药前回肠收缩幅度,PR为给药后回肠收缩幅度。豚鼠离体回肠收缩幅度的变化,见表1;收缩频度的变化,见表2。表1回肠收缩幅度的变化(s)槟榔碱终浓度(mg/ml)收缩幅度(mm)n促进率(%)加药前加药后3.4710-45

6、.72.37.62.6*733.36.5210-35.51.48.33.0*750.93.0210-23.62.36.92.9*891.7给药前后比较,*P0.05,*P0.05,说明吗叮啉及槟榔碱在此种剂量下未能促进小鼠胃肠蠕动。表3不同药物与推进率(s)药物剂量中华墨汁输送率(%)n生理盐水0.2ml/10g72.3713.609吗 叮 啉0.022mg/10g61.4611.43?11槟 榔 碱0.104mg/10g71.4912.01?12?P0.05 2.2.4限度试验取小鼠20只,体重1822g,雌雄各半。用1.19mg/ml的槟榔碱以0.4ml/10g*次给小鼠灌胃,观察小鼠的存

7、活情况4。给药后小鼠观察7天,全活,也未见其它异常现象。实验结果显示小鼠安全剂量为95.2mg/kg(按体表面积折算)6,能耐受相当人正常用量的13.8倍7(人常用槟榔剂量为12g)。3讨论3.1本文槟榔碱的提取分离方法效果良好,回收率约70%。鉴于槟榔碱、槟榔次碱性质较为特殊,两者均为两性,均能溶于水,具挥发性;但槟榔碱能溶于脂溶性溶剂,又可溶于任何浓度的乙醇中,而槟榔次碱仅溶于低浓度的乙醇中。本实验采用75%乙醇、渗漉法提取,可使槟榔碱及槟榔次碱均提取较完全。3.2分离过程中,由于槟榔碱既溶于水又溶于氯仿,故以氯仿从总碱水溶液多次萃取槟榔碱。3.3槟榔碱有兴奋拟副交感神经作用,具兴奋胃肠道

8、平滑肌作用。本文实验结果表明,槟榔碱对离体豚鼠回肠自发收缩的影响主要体现在幅度的增加,同时使收缩节律整齐,而其对频率的影响则不明显。3.4安全试验结果表明,槟榔碱是较为安全的药物。影响豚鼠回肠自发收缩作用的最大剂量仅为安全剂量的23.3%,提示较为安全的剂量已能对胃肠道平滑肌的收缩产生显著的兴奋作用。3.5本文进行了槟榔碱对小鼠小肠推进性活动影响的实验,以了解槟榔碱对小鼠小肠?动的促进作用,本实验结果数据无统计意义,说明这种剂量不能引起整体胃肠的兴奋作用。3.6本实验有待进一步探索槟榔碱对胃肠道收缩作用影响的机理,以及槟榔碱对胃液分泌的影响等,为开发槟榔碱应用于临床提供科学依据。作者单位:陈潮燕(广东省卫生防疫站广州 510300)参考文献1.江苏新医学院主编.中药大辞典(下册).上海科技出版社,1977:22432.中国药典(95版)一部.1995:3213.伍爱婵,等.独虎龙煎剂对胃肠道平滑肌收缩作用的影响.广东医药学院学报.1991,7(2):23244.日高木敬次郎,等.药理实验法.化学工业出版社,1987

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