《生物化学实践》教学大纲

1、生物化学实践教学大纲课程代码：14114课程英文名称：Experiment of Biochemistry 开课对象：临床医学、口腔医学，本科（五年制）学时：51/51一、课程性质、任务和作用生物化学是研究生物体内化学分子与化学反应的科学，它从化学的分子水平来探讨生命现象的本质。近年来，生物化学生物化学与分子生物学的发展突飞猛进，已成为医学基础学科中的先进领域，成为其它多种学科发展的必不可少的核心。生物化学不仅是生命科学的基础学科，而且也是一门重要的实验性学科，生物化学理论是在科学研究实验基础上高度总结的结论性观点。因此，要掌握生物化学知识，必需要进行生物化学实践。目前生化实验的基础理论与技术

2、手段已广泛地应用于生命科学研究的各个领域，生物化学实验技术成为生命科学尤其是医学研究的基本技术。开展生物化学实践课程的教学，可以让医学生在生化课堂之外亲自动手做实验，以应证并深入了解生化反应的原理，熟悉各种生化研究方法与技术，以培养独立进行研究的能力。最终使学生巩固和加深对生物化学基础理论的理解，掌握生物化学基本技术的操作，培养基本的科研思维和实验数据的整理和分析，为其临床学习和将来的科学研究打下扎实的基础。即通过本课程的实验教学要达到以下三方面的目的：1. 培养学生严谨的科学态度，开拓创新的思维能力，实验设计的思维方法，以及规范的书写实验报告论文等知识，提高分析问题和解决问题的能力。2. 掌

3、握基本的生物化学实验方法和技术，通过本课程的严格训练，为学生进一步学习，掌握复杂的综合性的生物化学技术打下扎实的基础。3. 通过实验，进一步加深对生物化学理论知识的理解。 二、教学目的要求和内容（一）基础验证性实验实验一、 血浆蛋白质含量测定教学目的 1掌握紫外分光光度法测定蛋白质的原理与方法。 2熟悉紫外分光光度计的操作使用。 3了解用中性盐盐析法进行血浆蛋白质的沉淀分离教学内容 1盐析法进行血浆蛋白质的分离。 2蛋白质测定标准曲线的制作。3血浆蛋白质含量的测定。主要仪器 754紫外分光光度计 离心机 移液器 学时： 4实验二、肝组织中核酸的分离提取与鉴定教学目的 1掌握从动物组织中提取核酸

4、的原理、操作技术及核酸组分的鉴定方法。2. 熟悉离心计的操作使用。3. 了解核酸的组成。教学内容 1肝组织中核酸的提取 。 2核酸的水解。 3核糖、脱氧核糖、嘌呤、磷酸的定性鉴定主要仪器 离心机 学时： 4实验三、 酶的性质教学目的 1掌握酶的专一性，酶促反应动力学的基本原理 。 2掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响的实验方法。 3. 熟悉酶的制备。 4. 了解不同酶其最适温度、最适pH不同。 5. 了解玻璃仪器的洗涤。教学内容 1唾液淀粉酶的制备。 2唾液淀粉酶、蔗糖酶的专一性实验。 3. 温度对唾液淀粉酶活性影响。 4. pH、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性影响主要仪器 水浴箱 生

5、化加样器 玻璃仪器 学时： 4实验四、 酶的竞争性抑制作用与胃蛋白酶原的激活教学目的 1掌握酶的竞争性抑制作用的基本原理 。 2掌握酶原激活的基本原理。 3熟悉研钵的使用。 4. 了解缓冲溶液的性质及其在生物试样中使用。教学内容 1肝组织中琥珀酸脱氢酶的提取。 2丙二酸对琥珀酸脱氢酶活性的影响。 3. 胃蛋白酶原激活及对纤维蛋白的水解作用。主要仪器 研钵，剪刀，水浴箱 学时： 4实验五、 血糖浓度、血浆总胆醇的测定教学目的 1掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的方法与原理。 2掌握血浆总胆醇测定的方法与原理。 3熟悉酶标仪、离心机、移液器、可见分光光度计的使用教学内容 1 血糖浓度的测定。 2 血

6、浆总胆醇的测定。主要仪器 酶标仪 移液器 离心机 生化培养箱 可见分光光度计 学时： 4实验六、 血浆脂蛋白HDL的测定；醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质教学目的 1掌握HDL的测定原理；掌握电泳的基本原理与技术，掌握醋酸纤维素薄膜电泳的原理及操作方法。 2熟悉可见分光光度计、电泳仪的使用。 3熟悉移液器的使用HDL的正常范围及临床意义；了解醋酸纤维素薄膜电泳所分离的血清蛋白质的各带谱及其临床意义。教学内容 1血浆中HDL的提取分离。 2HDL含量测定。3. 血清在醋酸纤维薄膜上点样。 4. 电泳。5. 染色观察结果。主要仪器 移液器 可见分光光度计 离心机 电泳仪 培养器 学时：4实验七、 转

7、氨基作用与氨基酸纸层析教学目的 1掌握转氨基作用的原理。 2掌握纸层析的原理，掌握纸层析法分离和鉴定氨基酸的原理和操作技术。 3了解RF值及计算。教学内容 1转氨基作用。 2纸层析。 3喷印三酮，计算RF值主要仪器 层析缸 离心机 喷液器 电吹风 学时： 4实验八、丙氨酸转氨酶ALT含量测定教学目的 1掌握丙氨酸转氨酶ALT含量测定的基本原理。 2熟悉用标准曲线法进行血清中丙氨酸转氨酶ALT含量测定的基本操作技术。 3. 熟悉酶活性单位。 3了解丙氨酸转氨酶ALT催化反应的特点。教学内容 1标准曲线的制作。 2丙氨酸转氨酶ALT比色测定。主要仪器 722S分光光度计 移液管 容量瓶 学时：4（

8、二）综合性实验实验一、SOD的提取、分离及酶促动力学研究教学目的 1掌握SOD提取、分离的基本原理。 2掌握酶促动力学研究的方法。 3. 熟悉Km值测定。教学内容 1SOD提取、分离。 2SOD酶促动力学研究。主要仪器 722S分光光度计 移液管 容量瓶 柱层析管 水浴箱 学时：8（三）设计性实验实验一、多因子对小鼠血糖浓度的影响教学目的 1掌握生物化学实验设计基本思路。 2熟悉那些因子可对小鼠血糖浓度的影响。 3了解小鼠取血技术，血糖浓度的测定。教学内容 1设计出多因子对小鼠血糖浓度影响的实验方案。 2进行多因子对小鼠血糖浓度影响的实验。 3. 小鼠血糖浓度的测定。主要仪器 鼠笼 722S分

9、光光度计 离心机 移液器 学时：8实验二、多因子对小鼠血脂含量的影响教学目的 1掌握生物化学实验设计基本思路。 2熟悉那些因子可对小鼠血脂含量的影响。 3了解小鼠取血技术，血脂含量的测定。教学内容 1设计出多因子对小鼠血脂含量影响的实验方案。 2进行多因子对小鼠血脂含量影响的实验。 3. 小鼠血脂含量的测定。主要仪器 鼠笼 722S分光光度计 离心机 移液器 学时：8三、教材及参考书教材：生物化学实验指导 浙江中医学院基础医学系生物化学教研室编 2004。参考书目：1. 生物化学实验教程 第 一 版 主编：刘粤梅，朱怀荣 北京，人民卫生出版社（第一版），1997 2生物化学实验方法和技术 主编：张龙翔 人民教育出版社，19813. 生物化学与分子生物学实验技术主编：厉朝龙 浙江大学出版社，2000四、考核方法本实践课程成绩为100分。成绩由参加实验、实验操作技能考核及实验报告三部分组成。对不来参加实验者，成绩记零分。 五、 时汇总表实验序号实 验 项 目实验类型0演示1验证2综合3设计学时数0102030405060708091011血浆蛋白质含量测定肝组织中核酸的分离提取与鉴定酶的性质酶的竞争性抑制作用与胃蛋白酶原的激活血糖浓度、血浆总胆醇的测定血浆脂蛋白HDL的测定；醋酸