薄层板的铺制、活化、点板、展层、显色及Rf的计算

1、实验项目一1、实验项目名称：薄层板的铺制、活化、点板、展层、显色及Rf 的计算 。2、实验项目性质：验证性。3、实验要求：必修 。4、计划学时数：6 学时。5、实验内容：（1）硅胶薄层板的铺制 薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。把欲分离的 样品点在薄层板的一端，然后将点样端浸入适宜的展开剂中 , 在密闭的层析缸中展开，使混合物得以分离 的 方法。由于层析在薄层上进行故而得名。薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提 纯 及含量的测定，还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。先做一下准备工作：玻

2、板（约 io x 6cm羧甲基纤维素钠（CMC-N）溶液配成0.5%容液，CMC-N一般是要煮的，煮的时候应该缓 缓加入CMC-Na 否则容易结成团块，影响浓度；煮好后一般放个两三天后，取上层清液使 用，如果急着使用，也可以用过滤 的方法。硅胶 H （小于 260 目）硅胶： CMC-Na=1：g 3mL研磨匀浆的时间， 根据经验来定， 与空气湿度有关， 一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情 况来判断， 越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。铺好的板，用手捏起来，平着一放，摔一摔，让玻板上的硅胶铺得更均匀（2）硅胶薄层板的活化铺好的硅胶板，放置过夜，就可使用

3、，想活化的也可活化。即移入烘箱，缓慢升温至105-110 C恒温活化半小时，取出放入干燥器中备用。（3）硅胶薄层板的展层用点样毛细管取少量溶液点于硅胶板（离板底部大约0.5cm ）。将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点2-3mm为宜（切勿将样点侵入展开剂中），密封顶盖，待展开至溶剂前沿达到规定的展距，取出薄层板，晾干（4）硅胶薄层板的显色及Rf的计算分离的化合物若有颜色，很容易识别出来各个样点。但多数情况下化合物没有颜色,、紫外线显色要识别样点，必须使样点显色。通用的显色方法有显色剂显色 （碘蒸气显色）和荧光薄层板显色和硫酸-乙醇溶液显色。产生的碘蒸气能碘蒸气显色：

4、将展开的薄层板挥发干展开剂后，放在盛有碘晶体的圭寸闭容器中，升华 与有机物分子形成有色的缔合物，完成显色。紫外线显色：用掺有荧光剂的固定相材料（如硅胶F,氧化铝F等）制板，展开后在以被观察到。用紫外线照射展开的干燥薄层板，板上的有机物会吸收紫外线，在板上出现相应的色点，可254nm紫外灯,荧光薄层板检测：荧光薄层是在硅胶中掺入少量荧光物质制成的板，在整个薄层板显黄绿色荧光，被测物质由余吸收了部分照射在此斑点位置的紫外线，而呈现各种颜色。硫酸乙醇溶液显色剂：用乙醇-硫酸液显色时，配制方法为把10ml浓硫酸加入在90ml乙醇中。注意要少量地慢慢混合。均匀喷在薄层板上，然后通过加热，不同的化合物则显示不同的颜色。比移值Rf的计算：Rf =原点至组分点中心的距离/原点至流动前沿的距离组分1的Rf =d1/d组分2的Rf =d2/ddip弘值计算示意图柱层析条件的选择：以薄层层析第一个点的Rf为0.3左右的展开系统为柱层析 的洗脱条件。6项目需用仪器设备名称：涂布器、层析缸、紫外灯、喷雾器、加热烤板7、所需主要元器件及耗材：薄层层析硅胶、柱层析硅胶、层析柱、层析缸、点样毛细管、硫酸、乙醇8、实验项目目的和任务： 掌握薄层板的铺制、 活化以及点样技术， 掌握利用薄