祛风消痛胶囊质量标准的研究

1、    祛风消痛胶囊质量标准的研究        摘要采用薄层色谱法鉴别防己、青风藤等主要药味，用薄层扫描法测定粉防己碱的含量。结果：定性鉴别斑点清晰，分离度好；定量测定的平均回收率为97.50%，RSD=1.36%(n=3)。此定性定量方法简便、灵敏、准确、重现性好，可用于控制制剂的质量。关键词祛风消痛胶囊；薄层色谱；粉防己碱；薄层扫描法中号R927文献标识码:A文章编号:1006-8783(2000)03-0206-03 祛风消痛胶囊是由防己、青风藤、黄芪等十多味中药以一

2、定工艺制成的复方制剂，具有祛风通络、清热利湿、祛淤止痛之功，主要用于治疗痛风性关节炎。为控制制剂的质量，本文建立了防己、青风藤、黄芪、当归和赤芍的薄层鉴别方法，以及粉防己碱的含量测定方法。1仪器和试药CS-9000型薄层扫描仪(日本岛津)，PBQ-型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验仪器厂)，定量毛细管(Drummond USA)。硅胶G(青岛海洋化工厂)；粉防己碱、防己诺林碱、青藤碱、阿魏酸、黄芪甲苷和芍药苷对照品均由中国药品生物制品检定所提供，祛风消痛胶囊为自制，所用试剂均为分析纯。2薄层色谱鉴别2.1防己、青风藤的鉴别取胶囊内容物1.0 g，加甲醇20 mL，超声提取25 min，滤过，滤

3、液蒸干，加甲醇1 mL溶解，作为供试液。根据处方比例称取药材，按制剂制备工艺及供试液制备方法，制得缺防己、缺青风藤的阴性对照液和防己、青风藤药材对照液。另取粉防己碱、防己诺林碱、青藤碱对照品适量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的对照品溶液。吸取上述供试液、阴性对照液、药材对照液各5 L，对照品溶液2 L，点于同一硅胶G薄层板上，以V(氯仿)V(乙酸乙酯)V(甲醇)=724为展开剂展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照液无相应斑点，见1。2.2当归的鉴别取胶囊内容物0.5 g，加乙醚20 mL，超声提取20 min，滤过，

4、滤液蒸干，加甲醇1 mL溶解作为供试液。根据处方比例称取药材，按制剂制备工艺及供试液制备方法，制得缺当归的阴性对照液和当归药材对照液。另取阿魏酸对照品适量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的对照品溶液。分别吸取供试液、阴性对照液、药材对照液各5 L，对照品溶液2 L，点于同一硅胶G薄层板上，以V(苯)V(氯仿)V(冰乙酸)=651展开，取出，晾干，于365 nm紫外光灯下观察。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上有相同颜色的斑点，阴性对照液无相应斑点，见2。2.3黄芪的鉴别取胶囊内容物1 g，加水30 mL溶解，以乙醚萃取2次，每次20 mL，弃去乙醚液，再以水饱和的正丁醇萃取2次，

5、每次20 mL，合并正丁醇萃取液，以=0.5%氢氧化钠溶液洗涤2次，每次15 mL，弃去碱水液，回收正丁醇至干，残渣加甲醇1 mL溶解作为供试液。根据处方比例称取药材，按制剂制备工艺及供试液制备方法，制得缺黄芪的阴性对照液和黄芪药材对照液。另取黄芪甲苷对照品适量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的对照品溶液。分别吸取供试液、阴性对照液、药材对照液各5 L，对照品溶液2 L，点于同一硅胶G薄层板上，以V(氯仿)V(甲醇)V(水)=653510下层液为展开剂展开，取出，晾干，喷以=10%硫酸乙醇液，于105 烘5 min。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照液无

6、相应斑点，见3。2.4赤芍的鉴别取胶囊内容物0.5 g，加水30 mL溶解，用水饱和正丁醇萃取2次，每次20 mL，合并萃取液，蒸干，残渣以甲醇1 mL溶解作为供试液。根据处方比例称取药材，按制剂制备工艺及供试液制备方法，制得缺赤芍的阴性对照液和赤芍药材对照液。另取芍药苷对照品适量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的对照品溶液。分别吸取供试液、阴性对照液、药材对照液各5 L，对照品溶液2 L，点于同一硅胶G薄层板上，以V(氯仿)V(甲醇)=72展开，取出，晾干，喷以=5%香草醛硫酸液，于105 烘5 min。供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照液无相应斑点，

7、见4。1防己、青风藤的鉴别1 粉防己碱2 防己诺林碱3 青藤碱4 供试液5 缺防己阴性对照液6 缺青风藤阴性对照液7 防己药材8 青风藤药材2当归的鉴别1 阿魏酸2 供试液3 阴性对照液4 当归药材3黄芪的鉴别1 黄芪甲苷2 供试液3 阴性对照液4 黄芪药材4赤芍的鉴别1 芍药苷2 供试液3 阴性对照液4 赤芍药材3粉防己碱的含量测定3.1薄层层析条件吸附剂，硅胶G-0.5% CMC-Na薄层板，用薄层自动铺板器铺制，厚0.6 mm，105 活化1 h；展开剂，V(氯仿)V(乙酸乙酯)V(甲醇)=724；展距，12 cm；显色剂，稀碘化铋钾试液。3.2薄层扫描条件扫描方式，双波长反射式锯齿扫描

8、；检测波长，S=515 nm，R=650 nm；狭缝，0.4 mm×0.4 mm；线性参数，SX=3；灵敏度，中。3.3对照品溶液的制备精密称取粉防己碱对照品适量，加甲醇溶解定容，制成0.74 mg/mL的对照品溶液。3.4线性关系考察精密吸取粉防己碱对照品溶液1、2、3、4、5 L点于同一硅胶G薄层板上，依上述条件展开、显色、扫描测定，以点样量为横坐标，斑点峰面积积分值为纵坐标，得回归方程A=36 929.7c+4 664.9，r=0.999 2(n=5)。结果表明粉防己碱在0.743.70 g范围内有良好的线性关系。3.5稳定性试验精密吸取粉防己碱对照品溶液3 L点于薄层板上，依

9、法测定斑点峰面积积分值，每隔15 min测1次，连续测9次，得RSD=3.82%，表明斑点显色后在2 h内稳定。3.6精密度试验精密吸取粉防己碱对照品溶液，于同一薄层板上点相同量5点，每点3 L，依法测定斑点峰面积积分值，测得RSD=2.89%；对其中一点连续扫描测定5次，测得RSD=2.76%；精密吸取对照品溶液3 L，分别点于5个薄层板上，依法测定斑点峰面积积分值，测得RSD=2.05%。结果表明同板内重现性、异板间精密度和仪器精密度均良好。3.7回收率试验精密称取已知含量的胶囊内容物0.8 g，准确加入粉防己碱对照品溶液(1.22 mg/mL)0.4、0.5、0.6 mL，按样品测定项下

10、方法制备供试液并进行测定，测得回收率为99.14%、98.97%、96.40%，平均回收率为97.50%，RSD=1.36%(n=3)。3.8样品测定取胶囊10粒，倾出内容物并混匀，精密称取1.5 g，加乙醇30 mL回流提取2次，每次1 h，合并提取液并蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至2 mL，作为供试液。精密吸取供试液4 L，对照品溶液2 L、4 L，分别点于同一薄层板上，依法测定斑点峰面积积分值，用外标两点法计算粉防己碱含量，结果见表1。表1样品含量测定结果批号/(mg.g-1)RSD/%9901200.771 70.780 00.752 01.859903150.821 50.831 60

11、.804 31.699905100.748 50.735 40.720 21.934讨论4.1采用本文方法可同时鉴别防己、青风藤两种药材，使定性分析更为简便。4.2防己为方中君药，故测定其所含粉防己碱的含量以控制制剂质量。粉防己碱的含量测定方法有HPLC法1、薄层扫描法2,3、薄层-紫外分光光度法4等多种，由于本制剂组成药味多，成分复杂，本文采用前处理操作简单的薄层扫描法进行测定。实验中，比较氯仿、乙醇、甲醇3种提取溶剂和加热回流提取、超声提取两种提取方式，以及V(苯)V(丙酮)V(二乙胺)=810.5、V(氯仿)V(甲醇)=51等多种展开系统，结果以文中所述的提取方法和展开系统效果最佳，测定结果准确可靠。罗毅（湖北医科大学附属第一医院药学部，湖北 武汉 430060）张洪（湖北医科大学附属第一医院药学部，湖北 武汉 430060）罗顺德（湖北医科大学附属第一医院药学部，湖北 武汉 430060）张华（湖北医科大学附属第一医院药学部，湖北 武汉 430060）参考文献1江俊，乔明，刘超英.中药防己中汉防己甲素的HPLC法定量分析